贝莱斯芽孢杆菌TCS001发酵条件优化及其生防作用研究
发布时间：2022-01-12 22:43
本文以渤海海泥生境细菌TCS001为研究对象,研究其生理生化性质与系统分类地位,探讨最佳发酵条件,揭示TCS001抑菌活性、生防作用及其初步作用机理,以期为TCS001微生物农药开发利用提供实验依据。1、结合形态学、生理生化试验与gyrA分子鉴定技术,对菌株TCS001进行菌种鉴定;测定不同培养时间TCS001的OD630,绘制细菌生长曲线。结果显示TCS001为革兰氏阳性菌,系芽孢杆菌科（Bacillaceae）芽孢杆菌属贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）;TCS001适宜生长期为0-52 h,对数生长期为10-20 h。2、采用平板对峙法检测TCS001的抑菌谱,发现TCS001有广谱的抑菌活性,其对黄瓜灰霉病菌（Botrytis cinerea,BC）抑菌活性最强,为84.12±0.19%;采用单因素试验和响应面分析法对TCS001的发酵条件进行优化,优化后的最佳条件为牛肉浸膏4.0 g,转速164 rpm,温度25℃,该条件下培养得到的发酵滤液,稀释20倍后,对BC生长抑制率仍然可达89.27±2.06%。3、制备不同浓度TCS001...
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
我国微生物农药登记情况汇总Figure1-1SummaryofmicrobialpesticideregistrationinChina注：数据摘自2019年4月4日中国农药工业协会《颖态分析》
图 2-1 TCS001 在光学显微镜下的形态e 2-1 Morphology of strain TCS001 under an optical mic芽孢时的细胞形态；B-TCS001 产生芽孢后的形态；C-TCS001 游离征果见表 2-2，表明菌株 TCS001 能分解利用葡萄糖，可水解淀粉和明胶，能利用葡萄糖产酸，原反应和接触酶反应均呈阳性，甲基红试验和 H2SS001 的培养性状、形态及生理生化特征，初步鉴108,109]。表 2- 2 生理生化试验结果e 2-2 The results of physiological and biochemical identif结 果 项 目 验 + 接触酶试验葡萄糖 + 硝酸盐还原试验乳糖 + V-P 试验 蔗糖 + H2S 产气试验果糖 + 明胶液化 木糖 - 甲基红试验
甲基红试验和 H2S 反应呈阴性（图2-2）。根据菌株 TCS001 的培养性状、形态及生理生化特征，初步鉴定其为芽孢杆菌属（Bacillus）细菌[108,109]。表 2- 2 生理生化试验结果Table 2-2 The results of physiological and biochemical identification项 目 结 果 项 目 结 果葡萄糖氧化发酵试验 + 接触酶试验 +碳源利用试验葡萄糖 + 硝酸盐还原试验 +乳糖 + V-P 试验 +蔗糖 + H2S 产气试验 -果糖 + 明胶液化 +木糖 - 甲基红试验 -麦芽糖 + 氧化酶试验 +甘露醇+淀粉水解试验 +柠檬酸盐试验 -注：a：“+”表示阳性；注：b：“-”表示阴性。
【参考文献】：
期刊论文
[1]海洋细菌GM-1-1产芽孢发酵培养基和摇瓶发酵条件优化[J]. 吴海霞,陈茹,曹雪梅,李欢,暴增海,马桂珍,王军强,罗志会. 南方农业学报. 2018(12)
[2]南极交替单胞菌R11-5产卡拉胶酶的发酵条件优化[J]. 潘爱红,李江,王蕾,宋益民. 微生物学通报. 2018(09)
[3]拮抗细菌在植物病害生物防治中应用的研究进展[J]. 王超,郭坚华,席运官,田伟. 江苏农业科学. 2017(18)
[4]贝莱斯芽孢杆菌S6拮抗物质分离纯化及抑菌机理[J]. 杨胜清,张帆,马贵龙. 农药. 2017(09)
[5]Bacillomycin D发酵与纯化工艺优化及其抑菌活性初步研究[J]. 顾康博,张道敬,罗远婵,李元广. 农药学学报. 2017(04)
[6]拮抗尖孢镰刀菌的PGPR筛选与抑菌机制的初步研究[J]. 刘东岳,李敏,孙文献,刘润进. 植物病理学报. 2017(05)
[7]我国微生物农药的应用现状及发展前景[J]. 苑丽蒲. 化工设计通讯. 2016(12)
[8]生防菌Act12铁载体合成酶Ser基因的功能[J]. 赵玉玲,董奉鑫,李素俭,黄丽丽,颜霞. 微生物学通报. 2017(01)
[9]利用响应面法优化固氮类芽孢杆菌Paenibacillus sp.1–49的发酵培养基（英文）[J]. 邓志平,陈浩,陈三凤. 微生物学报. 2016(09)
[10]田间试验常见问题的表现及对策[J]. 师萍. 现代农业. 2015(02)
博士论文
[1]印楝内生放线菌抑菌活性物质及作用机制初步研究[D]. 张丽.沈阳农业大学 2014
硕士论文
[1]决明子提取物对番茄灰霉病菌的生物活性及作用机理研究[D]. 秦楠.山西农业大学 2013
[2]普城沙雷菌A21-4对辣椒诱导抗性机理的初步研究[D]. 张维娜.河南农业大学 2013
本文编号：3585583
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
我国微生物农药登记情况汇总Figure1-1SummaryofmicrobialpesticideregistrationinChina注：数据摘自2019年4月4日中国农药工业协会《颖态分析》
图 2-1 TCS001 在光学显微镜下的形态e 2-1 Morphology of strain TCS001 under an optical mic芽孢时的细胞形态；B-TCS001 产生芽孢后的形态；C-TCS001 游离征果见表 2-2，表明菌株 TCS001 能分解利用葡萄糖，可水解淀粉和明胶，能利用葡萄糖产酸，原反应和接触酶反应均呈阳性，甲基红试验和 H2SS001 的培养性状、形态及生理生化特征，初步鉴108,109]。表 2- 2 生理生化试验结果e 2-2 The results of physiological and biochemical identif结 果 项 目 验 + 接触酶试验葡萄糖 + 硝酸盐还原试验乳糖 + V-P 试验 蔗糖 + H2S 产气试验果糖 + 明胶液化 木糖 - 甲基红试验
甲基红试验和 H2S 反应呈阴性（图2-2）。根据菌株 TCS001 的培养性状、形态及生理生化特征，初步鉴定其为芽孢杆菌属（Bacillus）细菌[108,109]。表 2- 2 生理生化试验结果Table 2-2 The results of physiological and biochemical identification项 目 结 果 项 目 结 果葡萄糖氧化发酵试验 + 接触酶试验 +碳源利用试验葡萄糖 + 硝酸盐还原试验 +乳糖 + V-P 试验 +蔗糖 + H2S 产气试验 -果糖 + 明胶液化 +木糖 - 甲基红试验 -麦芽糖 + 氧化酶试验 +甘露醇+淀粉水解试验 +柠檬酸盐试验 -注：a：“+”表示阳性；注：b：“-”表示阴性。
【参考文献】：
期刊论文
[1]海洋细菌GM-1-1产芽孢发酵培养基和摇瓶发酵条件优化[J]. 吴海霞,陈茹,曹雪梅,李欢,暴增海,马桂珍,王军强,罗志会. 南方农业学报. 2018(12)
[2]南极交替单胞菌R11-5产卡拉胶酶的发酵条件优化[J]. 潘爱红,李江,王蕾,宋益民. 微生物学通报. 2018(09)
[3]拮抗细菌在植物病害生物防治中应用的研究进展[J]. 王超,郭坚华,席运官,田伟. 江苏农业科学. 2017(18)
[4]贝莱斯芽孢杆菌S6拮抗物质分离纯化及抑菌机理[J]. 杨胜清,张帆,马贵龙. 农药. 2017(09)
[5]Bacillomycin D发酵与纯化工艺优化及其抑菌活性初步研究[J]. 顾康博,张道敬,罗远婵,李元广. 农药学学报. 2017(04)
[6]拮抗尖孢镰刀菌的PGPR筛选与抑菌机制的初步研究[J]. 刘东岳,李敏,孙文献,刘润进. 植物病理学报. 2017(05)
[7]我国微生物农药的应用现状及发展前景[J]. 苑丽蒲. 化工设计通讯. 2016(12)
[8]生防菌Act12铁载体合成酶Ser基因的功能[J]. 赵玉玲,董奉鑫,李素俭,黄丽丽,颜霞. 微生物学通报. 2017(01)
[9]利用响应面法优化固氮类芽孢杆菌Paenibacillus sp.1–49的发酵培养基（英文）[J]. 邓志平,陈浩,陈三凤. 微生物学报. 2016(09)
[10]田间试验常见问题的表现及对策[J]. 师萍. 现代农业. 2015(02)
博士论文
[1]印楝内生放线菌抑菌活性物质及作用机制初步研究[D]. 张丽.沈阳农业大学 2014
硕士论文
[1]决明子提取物对番茄灰霉病菌的生物活性及作用机理研究[D]. 秦楠.山西农业大学 2013
[2]普城沙雷菌A21-4对辣椒诱导抗性机理的初步研究[D]. 张维娜.河南农业大学 2013
本文编号：3585583
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/nykj/3585583.html
