紫花苜蓿内生菌的分离鉴定及特性分析

发布时间：2017-05-12 07:06

  本文关键词：紫花苜蓿内生菌的分离鉴定及特性分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：植物内生菌种类繁多,广泛分布于多种植物的各个器官和组织中。植物内生菌通过分泌多种有益代谢物、与病原菌竞争生态位点和营养物质、诱导植物产生系统抗性等不同机制帮助植物抵抗病害。紫花苜蓿(Medicago sativa)是一种历史悠久的多年生豆科牧草,其营养丰富,含有多种必需氨基酸、稀有氨基酸和可消化蛋白,并具有耐贫瘠、抗干旱等优良特性。本研究以紫花苜蓿内生细菌为实验材料,评价其生防效果和生防特性,结果如下:1、紫花苜蓿内生细菌的分离筛选及鉴定本研究从紫花苜蓿中分离出60株内生细菌,通过平板对峙实验筛选出6株对尖孢镰刀菌有拮抗作用的菌株,根据16S r DNA序列分析、菌落形态和生理生化实验初步鉴定菌株Y1和Y5为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、G43为绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)、Y22为河生肠杆菌(Enterobacter amnigenus)、G62为假单胞菌Pseudomonas argentinensis、G68为霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)。2、紫花苜蓿内生细菌生防效果评价在平板对峙实验中,6株紫花苜蓿内生细菌能够不同程度地拮抗多种病原真菌;而且,6株菌株发酵液均能抑制尖孢镰刀菌菌丝及孢子正常生长,导致菌丝断裂、畸形,孢子数量明显减少;在盆栽实验中,经6株菌株处理的苜蓿病情均得到不同程度地缓解,其中,菌株Y22防效最高,为53.97%。3、紫花苜蓿内生细菌生物学特性分析本研究评价了6株紫花苜蓿内生细菌产嗜铁素能力、产HCN能力、几丁质酶活力和羧甲基纤维素酶活力。6株菌株均能产生嗜铁素和几丁质酶,菌株Y22合成嗜铁素能力最强,其相对含量为0.521,菌株G62几丁质酶活力最高,其值为0.355 IU/m L。除菌株G62外,其余菌株均能产生HCN,其中菌株G43产HCN能力最强。菌株Y1和Y5能产生羧甲基纤维素酶,其酶活力值分别为0.486 IU/m L和0.360 IU/m L。
【关键词】：紫花苜蓿 苜蓿根腐病 内生菌 生物防治
【学位授予单位】：哈尔滨师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S435.4;S476.1
【目录】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-9
• 第1章 绪论9-17
• 1.1 植物内生菌的研究进展9-10
• 1.2 植物内生菌的防病机制10-13
• 1.3 苜蓿根腐病的危害及防治13-14
• 1.4 植物内生菌在防治病害中的作用14-15
• 1.5 研究的目的与意义15-17
• 第2章 苜蓿内生菌的分离及鉴定17-25
• 2.1 引言17
• 2.2 材料和方法17-19
• 2.2.1 材料17
• 2.2.2 方法17-19
• 2.3 结果和分析19-24
• 2.3.1 苜蓿内生菌的分离筛选与形态观察19-20
• 2.3.2 苜蓿内生菌的生理生化鉴定20-21
• 2.3.3 苜蓿内生菌的 16S r DNA序列分析21-24
• 2.4 本章小结24-25
• 第3章 苜蓿内生菌生防效果的评价25-33
• 3.1 引言25
• 3.2 材料和方法25-27
• 3.2.1 材料25-26
• 3.2.2 方法26-27
• 3.3 结果和分析27-32
• 3.3.1 平板对峙实验27-28
• 3.3.2 发酵液对尖孢镰刀菌菌丝及孢子生长的抑制作用28-30
• 3.3.3 分离菌株防治苜蓿根腐病的盆栽实验30-32
• 3.4 本章小结32-33
• 第4章 苜蓿内生菌的生物学特性分析33-41
• 4.1 引言33
• 4.2 材料和方法33-36
• 4.2.1 材料33-35
• 4.2.2 方法35-36
• 4.3 结果和分析36-40
• 4.3.1 分离菌株嗜铁素合成能力的测定36-37
• 4.3.2 分离菌株产HCN能力的测定37-38
• 4.3.3 分离菌株几丁质酶活力测定38-39
• 4.3.4 分离菌株羧甲基纤维素酶活力测定39-40
• 4.4 本章小结40-41
• 第5章 讨论41-43
• 5.1 苜蓿内生菌的分离鉴定41
• 5.2 苜蓿内生菌的生防效果41-43
• 结论43-44
• 参考文献44-49
• 攻读硕士学位期间所发表的学术论文49-50
• 致谢50-51

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