高效降解菌JBW4对两种土壤中硫丹的强化降解及去毒效应

发布时间：2022-01-16 06:39

　　本文以硫丹为研究对象,研究了硫丹高效降解菌JBW4对红壤与黑土中硫丹的降解作用和去毒效应。分别研究了JBW4菌株对红壤和黑土中硫丹的降解能力、JBW4在两种土壤中的定殖情况、接种JBW4菌株后硫丹降解前后土壤遗传毒性变化以及硫丹在两种土壤中的降解产物四个方面,主要研究结果如下：1、使用本实验室已经筛选的降解菌JBW4,测定其在红壤与黑土中对硫丹的降解能力。本研究设置灭菌土（SE）、自然土（NE）、灭菌土+降解菌（SEJ）、自然土+降解菌（NEJ）四个土壤处理,分别于处理后0、3、7、14、21、28、35、49、63、77d取样测定土壤中硫丹的残留量。研究表明：在红壤中,a硫丹在灭菌土、自然土、灭菌土+降解菌和自然土+降解菌四个处理中的半衰期分别为129.3d、111.9d、42.1d和32.4d；p硫丹在灭菌土、自然土、灭菌土+降解菌、自然土+降解菌四个处理中的半衰期分别为175d、162.6d、65.7d和50.4d。在黑土中,α硫丹在灭菌土、自然土、灭菌土+降解菌和自然土+降解菌四个处理中的半衰期分别为63.9d、31.8d、20.9和16.3d;p硫丹在灭菌土、自然土、灭菌土+... 

【文章来源】：山东农业大学山东省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

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Abstract
1 前言
    1.1 硫丹的结构和理化性质
    1.2 硫丹的应用概况
    1.3 硫丹的毒性
    1.4 硫丹在环境中的残留状况
    1.5 硫丹的微生物降解研究进展
    1.6 变性梯度凝胶电泳试验
    1.7 单细胞凝胶电泳试验
    1.8 硫丹的微生物降解途径和降解产物
    1.9 本文研究的意义和内容
2 材料与方法
    2.1 药品试剂
    2.2 仪器设备
    2.3 供试材料
        2.3.1 供试土壤
        2.3.2 供试菌株和培养基
            2.3.2.1 供试菌株
            2.3.2.2 供试培养基
    2.4 试验方法
        2.4.1 硫丹溶液配制
        2.4.2 降解菌的培养及菌悬液制备
        2.4.3 试验处理
        2.4.4 土壤染毒
        2.4.5 土壤中硫丹的提取及测定
            2.4.5.1 土壤中硫丹的提取
            2.4.5.2 土壤硫丹的GC-FID色谱分析条件
        2.4.6 结果计算
            2.4.6.1 土壤样品中硫丹降解率的计算
            2.4.6.2 降解方程的计算
            2.4.6.3 变异系数计算
        2.4.7 变性梯度凝胶电泳
            2.4.7.1 试剂配制
            2.4.7.2 土壤总DNA的提取
            2.4.7.3 JBW4降解菌DNA的提取
            2.4.7.4 PCR扩增
            2.4.7.5 DGGE电泳步骤
        2.4.8 彗星试验
            2.4.8.1 试剂配制
            2.4.8.2 蚯蚓染毒
            2.4.8.3 蚯蚓体腔细胞提取
            2.4.8.4 彗星试验步骤
            2.4.8.5 观察与分析
        2.4.9 GC-MS测定
            2.4.9.1 样品处理
            2.4.9.2 GC-MS分析条件
3 结果与分析
    3.1 土壤中硫丹残留量的测定
        3.1.1 土壤中硫丹GC-FID残留测定方法可靠性验证
        3.1.2 硫丹在红壤中的降解动态
        3.1.3 硫丹在黑土中的降解动态
    3.2 降解菌JBW4在两种土壤中的定殖情况
        3.2.1 降解菌在红壤中的定殖
            3.2.1.1 红壤细菌总DNA提取
            3.2.1.2 第一轮细菌16S rDNA PCR扩增结果
            3.2.1.3 第二轮细菌V3序列PCR扩增结果
            3.2.1.4 降解菌在红壤中的定殖结果
        3.2.2 降解菌在黑土中的定殖情况
            3.2.2.1 黑土细菌总DNA提取
            3.2.2.2 第一轮细菌16S rDNA PCR扩增结果
            3.2.2.3 第二轮细菌V3序列PCR扩增结果
            3.2.2.4 降解菌在黑土中的定殖结果
    3.3 硫丹降解前后遗传毒性的变化
        3.3.1 降解前后对红壤中蚯蚓体腔细胞DNA损伤程度的影响
        3.3.2 降解前后对黑土中蚯蚓体腔细胞DNA损伤程度的影响
    3.4 硫丹在两种土壤中的降解产物
        3.4.1 硫丹在红壤中的降解产物
        3.4.2 硫丹在黑土中的降解产物
4 讨论
    4.1 硫丹微生物强化降解
    4.2 降解菌JBW4在土壤中的定殖
    4.3 降解前后土壤遗传毒性变化
    4.4 硫丹微生物降解途径
    4.5 展望
5 结论
6 创新之处
7 参考文献
8 致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Biodegradation of organochlorine pesticide endosulfan by bacterial strain Alcaligenes faecalis JBW4[J]. Lingfen Kong,Shaoyuan Zhu,Lusheng Zhu,Hui Xie,Kunchang Su,Tongxiang Yan,Jun Wang,Jinhua Wang,Fenghua Wang,Fengxia Sun.  Journal of Environmental Sciences. 2013(11)
[2]一株番茄枯萎病生防菌的鉴定、定殖与盆栽防效研究[J]. 詹发强,侯敏,杨蓉,龙宣杞.  新疆农业科学. 2013(07)
[3]硫丹的生产使用现状及管理动态[J]. 杨峻,张文君.  农药科学与管理. 2011(10)
[4]硫丹降解菌C7在土壤中的降解性能及其酶促降解试验[J]. 李文,张京顺,李莹莹,闫艳春.  山东农业科学. 2008(09)
[5]硫丹对水生生物毒理效应的研究进展[J]. 胡国成,许木启,戴家银,曹宏,李雪梅.  中国水产科学. 2007(06)
[6]蚯蚓体腔细胞彗星试验检测阿散酸在泥浆体系中降解前后的遗传毒性变化[J]. 徐韵,陈海刚,李兆利,李梅,孙华,孔志明.  应用与环境生物学报. 2007(01)
[7]Evaluation of genotoxicity of combined soil pollution by cadmium and phenanthrene on earthworm[J]. ZHU Jiang, ZHAO Zuo-yuan, LU Yi-tong*(School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 201101, China.).  Journal of Environmental Sciences. 2006(06)
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博士论文
[1]镉—菲复合污染对安德爱胜蚓（Eisenia andrei）和白线蚓（Fridericia bulbosa）的生态毒理效应研究[D]. 朱江.上海交通大学 2008

硕士论文
[1]硫丹高效降解菌的筛选及对污染土壤的去毒作用[D]. 孔玲芬.山东农业大学 2013
[2]硫丹高效降解菌JBW4对硫丹污染土壤硫丹降解及去毒效应的影响[D]. 燕同祥.山东农业大学 2012



本文编号：3592132