大豆根际氢氧化细菌的分离及不同生育期对大豆根际微生物多样性的影响

发布时间：2023-03-23 18:49

　　氢氧化细菌作为一类依赖于豆科植物共生固氮所释放的H2而生长的细菌,具有极高的研究价值。加大氢氧化细菌的研究力度,必将丰富生物固氮学的内容。本文采集大豆根际土壤,按照稀释涂布法分离氢氧化细菌,利用气相色谱仪检测菌株氧化氢能力来筛选氢氧化细菌,再通过菌株形态特征、生理生化试验以及16S r DNA鉴定筛选出的菌株的种属。同时,对筛选出来的菌株的促生特性进行了测定,用Salkowski reagent法和双层CAS平板法分别测定菌株分泌IAA和产铁载体的能力。本文还采用高通量测序技术对不同生育期对大豆根际细菌群落结构多样性的影响进行了研究。实验结果如下:利用气体循环培养体系来电解水产生H2,和泵入的空气形成混合气体,调节电流大小,使得混合气体的中H2的浓度为832 ppm,使得通入混合气体的流速为280 m L/min。利用涂布平板法将按浓度梯度稀释的土壤悬液涂布于矿质盐培养基上进行菌种分离,通过分离纯化共分离出菌株75株。利用气相色谱法对分离出来的菌株进行氧化氢能力的测定,经测定后筛选出14株氧化氢能力强的菌株:菌株01-8,菌株1-15,菌株1-17,菌株3-17,菌株3-18,菌株5-...

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
缩略语对照表
第一章 绪论
    1.1 研究背景
    1.2 根际促生菌(PlantGrowth–PromotingRhizobacteria,PGPR)
    1.3 根际促生菌的促生机制
    1.4 生物固氮与氢肥理论
    1.5 氢氧化细菌
        1.5.1 氢氧化细菌概念
        1.5.2 氢氧化细菌的分离
        1.5.3 氢氧化细菌的筛选
        1.5.4 氢氧化细菌的分类
        1.5.5 氢氧化细菌的应用研究
    1.6 土壤微生物多样性的研究方法
    1.7 研究内容、目的、意义
        1.7.1 研究目的
        1.7.2 研究内容
        1.7.3 研究意义
第二章 大豆根际氢氧化细菌的分离鉴定
    2.1 实验材料
        2.1.1 样品采集
        2.1.2 实验主要试剂和仪器
        2.1.3 培养基
    2.2 实验方法
        2.2.1 氢氧化细菌的分离与纯化
        2.2.2 菌株氧化氢能力的测定
        2.2.3 菌株的鉴定
        2.2.4 菌株分泌IAA能力的测定
        2.2.5 菌株产铁载体测定
        2.2.6 数据处理
    2.3 结果分析
        2.3.1 菌株氧化氢能力测定
        2.3.2 菌株形态学鉴定
        2.3.3 菌株生理生化鉴定
        2.3.4 16SrDNA菌种鉴定
        2.3.5 分泌IAA能力结果
        2.3.6 产铁载体能力结果
    2.4 讨论
        2.4.1 氢氧化细菌的分离、纯化
        2.4.2 氢氧化细菌的筛选
        2.4.3 氢氧化细菌的鉴定
        2.4.4 菌株产IAA能力的测定
        2.4.5 菌株产铁载体能力测定
第三章 不同生育期对大豆根际细菌群落结构的影响
    3.1 实验材料
        3.1.1 土壤样品
        3.1.2 实验试剂与仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 土壤采集与样品信息
        3.2.2 土壤总DNA提取
        3.2.3 16SrRNAV3+V4区的PCR扩增及测序
        3.2.4 数据分析
    3.3 结果与分析
        3.3.1 样品序列数特点
        3.3.2 土壤细菌结构群落分析
        3.3.3 样品间复杂度比较分析
        3.3.4 群落多样性分析
        3.3.5 PCoA分析
        3.3.6 组间样品差异分析
    3.4 讨论
第四章 问题与展望
    4.1 研究中存在的问题与改进
    4.2 展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间取得的科研成果



本文编号：3768551