异色瓢虫CYP4G79干扰后碳氢化合物水平下降引起的表皮黑化模式的变化研究
发布时间：2023-03-23 22:46
昆虫的表皮是和外界环境直接接触的重要结构,一方面能够提供外形的支撑,同时还保护昆虫抵御外界的伤害。昆虫表皮组织的成分非常复杂,包括几丁质,表皮蛋白和脂类物质(包括碳氢化合物)等,一些昆虫的体表还能观察到基于儿茶酚胺途径代谢产生的黑色素斑纹。昆虫表皮碳氢化合物作为其中重要的组分,和其他表皮物质之间联系的研究目前还比较少。CYP4G亚家族是细胞色素P450家族成员之一,参与到了昆虫碳氢化合物的合成过程中,可通过改变其转录水平或酶活性引起碳氢化合物含量的变化。异色瓢虫属于鞘翅目瓢甲科,是一种完全变态昆虫,对环境具有极强的适应性,广泛分布于中国的大部分地区。其成虫和蛹的表皮上的黑色素斑点规律性很强,且会跟随环境的变化而改变,形成多种色斑形式,在其调节体表温度、躲避天敌等方面具有重要的作用。CYP4G79是目前在异色瓢虫体内发现的唯一一种CYP4G基因,其在虫体内的功能需要进一步的研究。基于以上的这些问题开展了一系列的实验。首先对CYP4G79基因进行了时空表达分析并利用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)检测了目的基因被干扰后蛹表皮的碳氢化合物成分的定量变化,探究RNAi对异色瓢虫表皮成分的影响...
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要符号对照表
第一章 文献综述
1.1 昆虫表皮碳氢化合物
1.1.1 昆虫表皮
1.1.2 表皮碳氢化合物
1.1.3 细胞色素P450
1.2 黑化作用
1.2.1 黑化的概念及基本功能
1.2.2 昆虫表皮黑化途径
1.3 异色瓢虫的体色多样性
1.4 RNAi
1.4.1 RNA干扰简介
1.4.2 dsRNA的导入方法
1.5 研究的目的意义与主要内容
第二章 CYP4G79在异色瓢虫表皮碳氢化合物合成中的功能研究
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 供试虫源
2.2.2 主要试剂(配置)及仪器设备
2.2.3 异色瓢虫转录组测序
2.2.4 CYP4G79基因转录组分析
2.2.5 CYP4G79基因的时空表达谱分析
2.2.6 ds-CYP4G79 RNAi效率检测
2.2.7 异色瓢虫表皮碳氢化合物的提取与色谱分析
2.3 实验结果与分析
2.3.1 CYP4G79基因的时空表达谱分析结果
2.3.2 ds-CYP4G79 RNAi效率检测
2.3.3 异色瓢虫表皮碳氢化合物的提取及色谱分析结果
2.4 讨论
第三章 表皮碳氢化合物对异色瓢虫蛹表皮色斑形成的影响
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 供试虫源
3.2.2 主要试剂(配置)及仪器设备
3.2.3 蛹表皮黑斑及脂类物质的的分布特点探究
3.2.4 不同程度RNAi基因下调情况及虫体存活率统计
3.2.5 低强度RNAi后异色瓢虫蛹表型变化及黑化相基因的表达情况分析
3.2.6 高强度RNAi后异色瓢虫蛹表型的变化
3.3 实验结果与分析
3.3.0 蛹表皮黑斑及脂类物质的的分布特点
3.3.1 不同程度RNAi后基因下调情况及虫体存活率结果分析
3.3.2 低强度RNAi后异色瓢虫蛹表型变化及黑化相基因的表达情况分析
3.3.3 高强度RNAi后异色瓢虫蛹表型变化
3.4 讨论
第四章 CYP4G79的其他功能研究
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 供试虫源
4.2.2 主要试剂(配置)及仪器设备
4.2.3 不同湿度条件下蛹表型的观察及CYP4G79基因的表达情况分析
4.2.4 ds-CYP4G79 处理后蛹内的水分含量测定
4.2.5 ds-CYP4G79 处理后异色瓢虫蛹的表皮状态观察
4.3 实验结果与分析
4.3.1 不同湿度条件下蛹表型的观察及CYP4G79基因的表达情况分析
4.3.2 ds-CYP4G79 处理后蛹内的水分含量分析
4.3.3 ds-CYP4G79 处理后异色瓢虫蛹表皮的其他表型变化
4.4 讨论
第五章 结论
参考文献
附录 A 细胞色素 P450 命名法则
致谢
个人简历
本文编号：3768901
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要符号对照表
第一章 文献综述
1.1 昆虫表皮碳氢化合物
1.1.1 昆虫表皮
1.1.2 表皮碳氢化合物
1.1.3 细胞色素P450
1.2 黑化作用
1.2.1 黑化的概念及基本功能
1.2.2 昆虫表皮黑化途径
1.3 异色瓢虫的体色多样性
1.4 RNAi
1.4.1 RNA干扰简介
1.4.2 dsRNA的导入方法
1.5 研究的目的意义与主要内容
第二章 CYP4G79在异色瓢虫表皮碳氢化合物合成中的功能研究
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 供试虫源
2.2.2 主要试剂(配置)及仪器设备
2.2.3 异色瓢虫转录组测序
2.2.4 CYP4G79基因转录组分析
2.2.5 CYP4G79基因的时空表达谱分析
2.2.6 ds-CYP4G79 RNAi效率检测
2.2.7 异色瓢虫表皮碳氢化合物的提取与色谱分析
2.3 实验结果与分析
2.3.1 CYP4G79基因的时空表达谱分析结果
2.3.2 ds-CYP4G79 RNAi效率检测
2.3.3 异色瓢虫表皮碳氢化合物的提取及色谱分析结果
2.4 讨论
第三章 表皮碳氢化合物对异色瓢虫蛹表皮色斑形成的影响
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 供试虫源
3.2.2 主要试剂(配置)及仪器设备
3.2.3 蛹表皮黑斑及脂类物质的的分布特点探究
3.2.4 不同程度RNAi基因下调情况及虫体存活率统计
3.2.5 低强度RNAi后异色瓢虫蛹表型变化及黑化相基因的表达情况分析
3.2.6 高强度RNAi后异色瓢虫蛹表型的变化
3.3 实验结果与分析
3.3.0 蛹表皮黑斑及脂类物质的的分布特点
3.3.1 不同程度RNAi后基因下调情况及虫体存活率结果分析
3.3.2 低强度RNAi后异色瓢虫蛹表型变化及黑化相基因的表达情况分析
3.3.3 高强度RNAi后异色瓢虫蛹表型变化
3.4 讨论
第四章 CYP4G79的其他功能研究
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 供试虫源
4.2.2 主要试剂(配置)及仪器设备
4.2.3 不同湿度条件下蛹表型的观察及CYP4G79基因的表达情况分析
4.2.4 ds-CYP4G79 处理后蛹内的水分含量测定
4.2.5 ds-CYP4G79 处理后异色瓢虫蛹的表皮状态观察
4.3 实验结果与分析
4.3.1 不同湿度条件下蛹表型的观察及CYP4G79基因的表达情况分析
4.3.2 ds-CYP4G79 处理后蛹内的水分含量分析
4.3.3 ds-CYP4G79 处理后异色瓢虫蛹表皮的其他表型变化
4.4 讨论
第五章 结论
参考文献
附录 A 细胞色素 P450 命名法则
致谢
个人简历
本文编号：3768901
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