保护性耕作土壤微生物与纤维素降解基因cbhI多样性的研究
发布时间：2023-05-13 03:43
保护性耕作是在传统耕作方式基础上的一种改进措施,是一种比较完美的耕作方式。通常以秸秆残茬的覆盖量来衡量是否是保护性耕作,若在30%以上则认为是保护性耕作,主要包含秸秆覆盖耕作、少耕、免耕、深松、防止坡地水土流失、合理利用水资源、农药及肥料、合理轮作轮耕等技术。保护性耕作可保护农田,改善土壤结构,增加农民收益,保护生态环境,为发展可持续农业奠定了基础,因此,研究保护性耕作具有重要的意义。同时,纤维素降解茵在秸秆还田中秸秆的降解占主导地位。该试验始于2006年玉米季,以是否耕作和是否秸秆还田两种因素设置了4个处理,土壤样品采集于2013年春季4月初。研究了四种不同处理对土壤酶活性,土壤细菌、真菌多样性和纤维素降解菌cbhI功能基因多样性的影响。主要研究结果如下：1)通过对四种不同处理的土壤样品的有机质、全氮、碱解氮、有效磷、速效钾进行分析测定可知,在四种处理的土壤样品中的全氮、有机碳、全磷、全钾、碱解氮、速效磷、速效钾含量均：CNTWNTS>CNTWTS,CNTWNT>CNTWT, CNTWNTS>CNTWNT,CNTWTS>CNTWT.其中CNTWNTS有其中的六...
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
符号与缩略语说明
前言
第一章 文献综述
1 保护性耕作研究背景及意义
1.1 保护性耕作的定义
1.2 保护性耕作在国外的起源与背景
1.3 保护性耕作在国内发展情况
1.4 保护性耕作的优缺点
1.5 保护性耕作对土壤微生物多样性的影响
2 土壤微生物多样性的研究进展
2.1 土壤微生物多样性
2.2 土壤微生物多样性研究方法
3 纤维素降解基因研究进展
3.1 纤维素酶
3.2 纤维素降解基因
第二章 保护性耕作土壤理化性质和几种酶活的测定和比较
1 材料与方法
1.1 试验区概况
1.2 长期试验设计及样品采集
1.3 土壤理化性质测定
1.4 常规稀释涂布平板法计数
1.5 土壤蔗糖酶的测定
1.6 土壤过氧化氢酶的测定
1.7 土壤纤维素酶的活性
2 结果与分析
2.1 土壤理化性质
2.2 土壤微生物计数
2.3 土壤中蔗糖酶的活性
2.4 土壤中过氧化氢酶的活性
2.5 土壤中纤维素酶的活性
3 讨论
4 小结
第三章 保护性耕作土壤中细菌和真菌群落多样性的研究
1 材料与方法
1.1 取样地点与方法
1.2 土壤样品的理化性质及生物学特性
1.3 菌株、培养基与试剂
1.4 土壤总DNA的提取及纯化
1.5 土壤细菌多样性的PCR-DGGE分析
1.6 土壤真菌多样性的PCR-DGGE分析
1.7 大肠杆菌DH5a普通感受态细胞的制备
1.8 PCR产物的TA克隆
1.9 普通感受态细胞酶连产物转化
2 实验结果及分析
2.1 土壤总DNA提取与纯化
2.2 土壤细菌多样性的PCR-DGGE分析
2.3 土壤真菌多样性的PCR-DGGE分析
3 讨论
4 本章小结
第四章 保护性耕作土壤中纤维素降解基因cbhI基因多样性的研究
1 试验材料与方法
1.1 功能基因cbhI的PCR扩增
1.2 感受态细胞的制备
1.3 PCR产物的TA克隆
1.4 普通感受态细胞酶连产物的转化
1.5 克隆文库的构建与保存
1.6 转化子的PCR扩增验证
1.7 cbhI基因文库的RFLP分析
1.8 cbhI基因文库统计分析
2 结果分析
2.1 土壤cbhI基因的PCR扩增
2.2 cbhI基因文库酶切类型统计分析
2.3 cbhI基因文库库容分析
2.4 cbhI基因文库多样性指数分析
2.5 cbhI基因文库库容分析
2.6 cbhI基因文库相似度比较
2.7 cbhI基因测序分析和cbhI基因系统发育分析
3 讨论
4 小结
全文总结
创新点
附录 文中所用的培养基和试剂配方
参考文献
致谢
本文编号：3815230
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
符号与缩略语说明
前言
第一章 文献综述
1 保护性耕作研究背景及意义
1.1 保护性耕作的定义
1.2 保护性耕作在国外的起源与背景
1.3 保护性耕作在国内发展情况
1.4 保护性耕作的优缺点
1.5 保护性耕作对土壤微生物多样性的影响
2 土壤微生物多样性的研究进展
2.1 土壤微生物多样性
2.2 土壤微生物多样性研究方法
3 纤维素降解基因研究进展
3.1 纤维素酶
3.2 纤维素降解基因
第二章 保护性耕作土壤理化性质和几种酶活的测定和比较
1 材料与方法
1.1 试验区概况
1.2 长期试验设计及样品采集
1.3 土壤理化性质测定
1.4 常规稀释涂布平板法计数
1.5 土壤蔗糖酶的测定
1.6 土壤过氧化氢酶的测定
1.7 土壤纤维素酶的活性
2 结果与分析
2.1 土壤理化性质
2.2 土壤微生物计数
2.3 土壤中蔗糖酶的活性
2.4 土壤中过氧化氢酶的活性
2.5 土壤中纤维素酶的活性
3 讨论
4 小结
第三章 保护性耕作土壤中细菌和真菌群落多样性的研究
1 材料与方法
1.1 取样地点与方法
1.2 土壤样品的理化性质及生物学特性
1.3 菌株、培养基与试剂
1.4 土壤总DNA的提取及纯化
1.5 土壤细菌多样性的PCR-DGGE分析
1.6 土壤真菌多样性的PCR-DGGE分析
1.7 大肠杆菌DH5a普通感受态细胞的制备
1.8 PCR产物的TA克隆
1.9 普通感受态细胞酶连产物转化
2 实验结果及分析
2.1 土壤总DNA提取与纯化
2.2 土壤细菌多样性的PCR-DGGE分析
2.3 土壤真菌多样性的PCR-DGGE分析
3 讨论
4 本章小结
第四章 保护性耕作土壤中纤维素降解基因cbhI基因多样性的研究
1 试验材料与方法
1.1 功能基因cbhI的PCR扩增
1.2 感受态细胞的制备
1.3 PCR产物的TA克隆
1.4 普通感受态细胞酶连产物的转化
1.5 克隆文库的构建与保存
1.6 转化子的PCR扩增验证
1.7 cbhI基因文库的RFLP分析
1.8 cbhI基因文库统计分析
2 结果分析
2.1 土壤cbhI基因的PCR扩增
2.2 cbhI基因文库酶切类型统计分析
2.3 cbhI基因文库库容分析
2.4 cbhI基因文库多样性指数分析
2.5 cbhI基因文库库容分析
2.6 cbhI基因文库相似度比较
2.7 cbhI基因测序分析和cbhI基因系统发育分析
3 讨论
4 小结
全文总结
创新点
附录 文中所用的培养基和试剂配方
参考文献
致谢
本文编号：3815230
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/nykj/3815230.html
