大草蛉雄虫卵黄原蛋白功能研究

发布时间：2023-05-13 20:02

　　大草蛉(Chrysopa Pallens)是蚜虫等多种农林业害虫重要的捕食性天敌昆虫。其分布广、食量大、繁殖能力强,在控制害虫种群、减少农作物损失方面发挥重要作用。大量扩繁是天敌昆虫应用的基础与前提,而揭示天敌昆虫的生殖生理则有助于开发调控天敌昆虫繁殖的技术与方法,促进天敌昆虫规模化生产。大草蛉雄虫非常罕见地含有昆虫雌性生殖蛋白Vg,本文克隆了大草蛉雄虫Vg基因部分m RNA序列,并借助RNAi、石蜡切片、透射电镜与转录组测序等技术探讨了雄虫Vg基因表达对雄虫生殖腺发育、雄虫转录组,及交配后对雌虫寿命、生殖腺发育、产卵期、产卵量等繁殖指标的影响,明确了大草蛉雄虫Vg基因在雄虫与雌虫生殖中的功能,并从雄虫生殖效应的角度出发,揭示了Vg基因的作用机理。主要分为三个部分:1.大草蛉雄虫Vg部分序列的克隆及表达分析克隆了雄虫Vg基因部分mRNA序列,并在转录水平上检测了时空表达规律,发现Vg基因在雄虫不同发育阶段的表达不具有显著性差异,其在腹部表达量最高,是胸部的2.64倍,头部的3.51倍数。此外,在蛋白水平上,整虫和腹部的Vg均由165 kD的大亚基和46 kD的小亚基组成;而头部和胸部的...

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 大草蛉概述及其研究现状
        1.1.1 大草蛉的生物学特性
        1.1.2 大草蛉在生物防治中的应用
        1.1.3 大草蛉的分子生物学研究现状
    1.2 昆虫卵黄原蛋白的研究进展
        1.2.1 昆虫卵黄原蛋白的分子结构
        1.2.2 昆虫卵黄原蛋白的表达研究
        1.2.3 昆虫卵黄原蛋白的功能研究
        1.2.4 大草蛉卵黄原蛋白的研究进展
    1.3 RNA干扰技术概述
        1.3.1 RNAi的发现
        1.3.2 RNAi的作用原理与特点
        1.3.3 RNAi在昆虫中的应用
        1.3.4 昆虫RNAi的方法
    1.4 本研究的目的意义及技术路线
        1.4.1 研究的目的意义
        1.4.2 研究的技术路线
第二章 雄虫Vg部分序列的克隆及表达分析
    2.1 材料与方法
        2.1.1 供试昆虫
        2.1.2 菌株和质粒
        2.1.3 主要试剂和药品
        2.1.4 主要仪器设备
        2.1.5 主要溶液配制
        2.1.6 Vg部分序列的克隆
        2.1.7 Vg部分序列的表达分析
        2.1.8 卵黄原蛋白分离
    2.2 结果与分析
        2.2.1 Vg部分序列的克隆结果
        2.2.2 Vg部分序列的表达分析
    2.3 讨论
第三章 大草蛉雄虫Vg基因的功能研究
    3.1 材料与方法
        3.1.1 供试昆虫
        3.1.2 菌株和质粒
        3.1.3 主要试剂和药品
        3.1.4 主要仪器设备
        3.1.5 主要溶液配制
        3.1.6 dsRNA的制备
        3.1.7 RNA干扰
        3.1.8 石蜡切片观察
        3.1.9 透射电镜观察
    3.2 结果与分析
        3.2.1 dsRNA的合成
        3.2.2 RNAi结果分析
        3.2.3 石蜡切片观察结果
        3.2.4 透射电镜观察结果
    3.3 讨论
第四章 RNAi后转录组数据初步分析
    4.1 材料与方法
        4.1.1 供试昆虫
        4.1.2 菌株和质粒
        4.1.3 主要试剂和药品
        4.1.4 主要仪器设备
        4.1.5 主要溶液配制
        4.1.6 转录组测序样本的准备
        4.1.7 Vg基因的序列的确定和分析
        4.1.8 转录组测序相关基因表达量变化的q-PCR验证
    4.2 结果与分析
        4.2.1 转录组数据分析概述
        4.2.2 雄虫Vg序列的分析
        4.2.3 RNAi前后差异表达基因
    4.3 讨论
第五章 全文结论
参考文献
致谢
作者简历



本文编号：3816423