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阿拉善地区粘细菌的分离鉴定及其抗致病疫霉活性的初步研究

发布时间:2023-07-26 18:34
  粘细菌(myxobacteria)是一类可滑行的革兰氏阴性细菌,具有种类多样的多细胞行为和复杂的形态发生。近年来,粘细菌作为可以产生多种次级代谢产物的药源微生物而备受关注。本研究采集了38个来自阿拉善地区的土壤样品,并对其理化指标进行了检测。阿拉善地区土壤处于干旱状态,土壤pH值处于中性偏碱性的状态,有机质、水解氮含量比较缺乏,有效磷、速效钾含量较为丰富或适宜。采用滤纸片诱导法、大肠杆菌诱导法、兔粪诱导法,结合子实体直接挑取及抗生素纯化法,诱导分离出118株菌株,纯化出90株,分属于6个属,11个种,分别为:橙色粘球菌、黄色粘球菌、变绿粘球菌、叶柄粘球菌、大孢粘球菌、大孢珊瑚球菌、Pyxicoccus fallax、过渡原囊菌、紫色孢囊杆菌、小孢囊杆菌、囊球粘细菌,粘球菌属为该地区的优势菌属。该地区可培养粘细菌资源与土壤酸碱性呈现出显著正相关,草甸盐土可培养粘细菌种属最为丰富,包括Myxococcus、Cystobacter、Anqiococcus三个菌属,流动荒漠风沙土及各类灰漠土可培养粘细菌菌株数较多;土壤的利用方式对粘细菌的分布有明显影响,林地土壤可培养粘细菌菌株含量高,且种属较...

【文章页数】:89 页

【学位级别】:硕士

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摘要
Abstract
1 引言
    1.1 粘细菌的发现与研究
    1.2 粘细菌的特征
        1.2.1 粘细菌的生长发育特征
        1.2.2 粘细菌的生长环境特征
    1.3 粘细菌的分离纯化
    1.4 粘细菌的分类学研究
        1.4.1 形态学分类
        1.4.2 分子遗传学分类
    1.5 粘细菌的生物活性物质
    1.6 马铃薯晚疫病的概述
    1.7 阿拉善地区的概述
    1.8 本研究的内容及目的
2 实验材料
    2.1 土壤样品的采集
    2.2 材料
        2.2.1 实验菌株
        2.2.2 实验植株
        2.2.3 实验主要仪器设备
        2.2.4 主要试剂及配置方法
        2.2.5 实验主要培养基
        2.2.6 实验相关软件
    2.3 实验方法
        2.3.1 土样的采集及处理
        2.3.2 土壤理化特性的测定
        2.3.3 粘细菌的分离纯化
        2.3.4 粘细菌的分类鉴定
        2.3.5 拮抗致病疫霉粘细菌的筛选
        2.3.6 高抗菌株的生理生化特征检测
        2.3.7 致病疫霉高抗性菌株的抗菌谱检测
        2.3.8 致病疫霉高抗性菌株活性物质发酵条件的优化
        2.3.9 菌株AL-10、AL-24活性物质稳定性检测
3 结果与分析
    3.1 土壤理化指标的检测结果
    3.2 粘细菌的诱导、分离与纯化
    3.3 粘细菌的种属鉴定
        3.3.1 粘细菌的形态学鉴定
        3.3.2 粘细菌的分子鉴定
    3.4 致病疫霉拮抗菌株的筛选
    3.5 高抗菌株AL-24 和AL-10的生理生化特征检测
    3.6 高抗菌株AL-24 和AL-10的发酵条件优化
        3.6.1 菌株发酵液吸附树脂的用量
        3.6.2 菌株AL-24、AL-10最佳发酵培养基的筛选
        3.6.3 菌株AL-10最佳发酵条件单因素水平的选择
        3.6.4 菌株AL-10发酵条件的正交优化
        3.6.5 菌株AL-10、AL-24的复合发酵
    3.7 菌株AL-24和AL-10次级代谢产物对其他植物病原真菌的抗性
    3.8 菌株AL-24和AL-10抗致病疫霉活性物质的稳定性
        3.8.1 热稳定性测定
        3.8.2 酸碱稳定性测定
        3.8.3 紫外线及自然光的稳定性测定
        3.8.4 储存稳定性测定
    3.9 菌株AL-24和AL-10活性物质对马铃薯离体叶片的防治作用
4 讨论与结论
    4.1 讨论
        4.1.1 粘细菌的诱导分离及纯化
        4.1.2 粘细菌分布与环境的相关性
        4.1.3 粘细菌的抗致植物致病菌活性分析
        4.1.4 拮抗致病疫霉粘细菌发酵条件的优化
        4.1.5 菌株AL-24和AL-10活性物质的稳定性
        4.1.6 马铃薯体叶片的防治试验
    4.2 结论
致谢
参考文献
作者简介



本文编号:3837338

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