铜绿假单胞菌GF31及其胞外粗酶液对高效氯氰菊酯的降解研究
发布时间：2024-02-28 06:01
高效氯氰菊酯是一种人工合成的广谱拟除虫菊酯类杀虫剂,由于其对害虫具有强烈的神经毒性,在世界范围内被广泛应用于农业与家庭内等处的害虫防治,长期使用造成的残留破坏生态环境,也危害人类的健康。利用微生物降解或矿化是一种安全有效的环境修复手段。 本文首先根据降解体系特性,建立了乙腈-无机盐-水双水相萃取高效氯氰菊酯及其降解产物3-苯氧基苯甲醛和3-苯氧基苯甲酸的方法,平均回收率在94.8%-98.3%之间,变异系数在2.1～3.2之间。与文献报道方法相比,该方法较为简单,能够精确定量测定水样中高效氯氰菊酯、3-苯氧基苯甲酸和3-苯氧基苯甲醛和残留。 研究实验室分离保藏的一株铜绿假单胞菌GF31的菌体降解特性,发现它不能以高效氯氰菊酯为唯一碳氮源生长；认为在无外加营养条件下具有降解效果是因为细胞释放胞外酶而发生的降解作用。发现此降解酶的生成不需要诱导,是组成酶。产酶条件初步优化,但是没有找出影响显著的因素。 研究外加营养源对铜绿假单胞菌GF31降解高效氯氰菊酯的影响,可知向无机盐培养基中添加不同种类的碳氮源与不同C/N的营养源时,均对高效氯氰菊酯的降解率造成影响。当添加甘露醇和硫酸铵C/N为3：...
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
符号说明
第一章 绪论
1.1 拟除虫菊酯类农药的特性与危害
1.2 拟除虫菊酯类农药检测前处理技术
1.2.1 萃取技术
1.2.2 净化技术
1.2.3 萃取、净化一体化技术
1.3 拟除虫菊酯类农药降解菌的分离与鉴定
1.4 拟除虫菊酯类农药降解酶的研究
1.6 拟除虫菊酯类农药降解机理与代谢产物的研究
1.7 外加营养源对微生物降解拟除虫菊酯影响的研究
1.8 本课题研究内容及研究意义
第二章 样品的制备及其分析
2.1 实验材料及设备
2.1.1 实验使用的试剂及试剂配制
2.1.2 实验设备
2.2 实验方法
2.2.1 有机溶剂萃取高效氯氰菊酯
2.2.2 乙腈-氯化钠-水双水相萃取高效氯氰菊酯
2.2.3 萃取回收率的测定
2.3 实验结果与讨论
2.3.1 有机溶剂萃取高效氯氰菊酯
2.3.2 乙腈-氯化钠-水双水相萃取高效氯氰菊酯
2.3.3 回收率的测定
2.4 本章小结
第三章 铜绿假单胞菌GF31的降解特性、产物及产酶条件优化
3.1 实验材料及设备
3.1.1 实验使用的试剂及试剂配制
3.1.2 实验设备
3.2 实验方法
3.2.1 菌体来源
3.2.2 菌体培养与粗酶液制备
3.2.3 高效氯氰菊酯降解实验
3.2.4 菌体、胞外粗酶液与细胞破碎液对高效氯氰菊酯的降解
3.2.5 GF31对高效氯氰菊酯的降解产物情况
3.2.6 胞外粗酶液对高效氯氰菊酯的降解产物情况
3.2.7 细菌对3-pbh的转化作用
3.2.8 产酶条件的优化
3.2.9 分析方法
3.3 实验结果与讨论
3.3.1 铜绿假单胞菌GF31对高效氯氰菊酯的降解
3.3.2 降解区域的定位
3.3.3 GF31对高效氯氰菊酯的降解产物情况
3.3.5 胞外粗酶液对高效氯氰菊酯的降解产物情况
3.3.6 细菌对降解产物3-pbh的转化
3.3.7 GF31产高效氯氰菊酯降解酶条件优化
3.4 本章小结
第四章 外加营养源对铜绿假单胞菌GF31降解高效氯氰菊酯的影响
4.1 实验材料与设备
4.1.1 实验试剂及试剂配制
4.1.2 实验设备
4.1.3 菌体的培养与粗酶液制备
4.2 实验方法
4.2.1 高效氯氰菊酯降解实验
4.2.2 分析方法
4.3 实验结果与讨论
4.3.1 不同种类的碳源对GF31降解的影响
4.3.2 不同种类的氮源对GF31降解的影响
4.3.3 不同种类的碳氮源对GF31降解的影响
4.3.4 碳氮比(C/N)对GF31降解的影响
4.3.5 外加C/N比为3：1的甘露醇和硫酸铵对GF31降解与产胞外酶的影响
4.4 本章小结
第五章 结论与展望
参考文献
附录
1. 高效氯氰菊酯标准曲线
2. 3-苯氧基苯甲酸标准曲线
3. 3-苯氧基苯甲醛标准曲线
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录
本文编号：3913576
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摘要
ABSTRACT
符号说明
第一章 绪论
1.1 拟除虫菊酯类农药的特性与危害
1.2 拟除虫菊酯类农药检测前处理技术
1.2.1 萃取技术
1.2.2 净化技术
1.2.3 萃取、净化一体化技术
1.3 拟除虫菊酯类农药降解菌的分离与鉴定
1.4 拟除虫菊酯类农药降解酶的研究
1.6 拟除虫菊酯类农药降解机理与代谢产物的研究
1.7 外加营养源对微生物降解拟除虫菊酯影响的研究
1.8 本课题研究内容及研究意义
第二章 样品的制备及其分析
2.1 实验材料及设备
2.1.1 实验使用的试剂及试剂配制
2.1.2 实验设备
2.2 实验方法
2.2.1 有机溶剂萃取高效氯氰菊酯
2.2.2 乙腈-氯化钠-水双水相萃取高效氯氰菊酯
2.2.3 萃取回收率的测定
2.3 实验结果与讨论
2.3.1 有机溶剂萃取高效氯氰菊酯
2.3.2 乙腈-氯化钠-水双水相萃取高效氯氰菊酯
2.3.3 回收率的测定
2.4 本章小结
第三章 铜绿假单胞菌GF31的降解特性、产物及产酶条件优化
3.1 实验材料及设备
3.1.1 实验使用的试剂及试剂配制
3.1.2 实验设备
3.2 实验方法
3.2.1 菌体来源
3.2.2 菌体培养与粗酶液制备
3.2.3 高效氯氰菊酯降解实验
3.2.4 菌体、胞外粗酶液与细胞破碎液对高效氯氰菊酯的降解
3.2.5 GF31对高效氯氰菊酯的降解产物情况
3.2.6 胞外粗酶液对高效氯氰菊酯的降解产物情况
3.2.7 细菌对3-pbh的转化作用
3.2.8 产酶条件的优化
3.2.9 分析方法
3.3 实验结果与讨论
3.3.1 铜绿假单胞菌GF31对高效氯氰菊酯的降解
3.3.2 降解区域的定位
3.3.3 GF31对高效氯氰菊酯的降解产物情况
3.3.5 胞外粗酶液对高效氯氰菊酯的降解产物情况
3.3.6 细菌对降解产物3-pbh的转化
3.3.7 GF31产高效氯氰菊酯降解酶条件优化
3.4 本章小结
第四章 外加营养源对铜绿假单胞菌GF31降解高效氯氰菊酯的影响
4.1 实验材料与设备
4.1.1 实验试剂及试剂配制
4.1.2 实验设备
4.1.3 菌体的培养与粗酶液制备
4.2 实验方法
4.2.1 高效氯氰菊酯降解实验
4.2.2 分析方法
4.3 实验结果与讨论
4.3.1 不同种类的碳源对GF31降解的影响
4.3.2 不同种类的氮源对GF31降解的影响
4.3.3 不同种类的碳氮源对GF31降解的影响
4.3.4 碳氮比(C/N)对GF31降解的影响
4.3.5 外加C/N比为3：1的甘露醇和硫酸铵对GF31降解与产胞外酶的影响
4.4 本章小结
第五章 结论与展望
参考文献
附录
1. 高效氯氰菊酯标准曲线
2. 3-苯氧基苯甲酸标准曲线
3. 3-苯氧基苯甲醛标准曲线
致谢
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本文编号：3913576
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