利用转录组和16S测序技术评价Bt蛋白对龟纹瓢虫安全性的研究

发布时间：2024-03-10 16:50

　　转基因作物对非靶标生物的影响是转基因作物环境安全性评价的重要内容。龟纹瓢虫是棉田的优势捕食性天敌,不仅捕食棉田中多种害虫,还取食棉花花粉,是评价转基因棉花环境安全的重要指示性非靶标昆虫。本研究运用高通量测序技术,系统研究了Bt蛋白对龟纹瓢虫解毒、消化基因的表达量和对共生微生物组成和结构的影响。本研究旨在明确Bt蛋白对龟纹瓢虫的安全性,为我国转基因生物安全评价和安全管理提供技术支撑和依据。本研究获得以下主要研究结果。1、选择未取食蚜虫的龟纹瓢虫初孵幼虫,分别用含有500μg/ml Cry1Ac、Cry2Ab、Cry1Ac+Cry2Ab蛋白的2mol/L蔗糖水处理1龄期龟纹瓢虫48h,以蔗糖水处理为对照,利用高通量测序技术检测龟纹瓢虫体内解毒和消化相关基因的表达量变化。结果表明,高浓度Bt蛋白对龟纹瓢虫1龄幼虫体内解毒基因CarE、P450、GST、CCE和消化基因APN、CP、TPs的表达量没有显著影响。2、选择未取食蚜虫的龟纹瓢虫初孵幼虫,分别用含有500μg/ml Cry1Ac、Cry2Ab、Cry1Ac+Cry2Ab蛋白的2mol/L蔗糖水处理1龄期龟纹瓢虫48h,以蔗糖水处理为对...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 转基因作物的由来和发展现状
    1.2 转基因棉对非靶标害虫的影响
    1.3 转基因棉对经济昆虫的影响
    1.4 转基因棉对寄生性昆虫的影响
    1.5 转基因棉对捕食性天敌昆虫的影响
    1.6 研究目的、意义及内容
第二章 Bt蛋白对龟纹瓢体内解毒、代谢相关基因的影响
    2.1 材料与方法
        2.1.1 供试昆虫
        2.1.2 供试化合物
        2.1.3 取样
        2.1.4 龟纹瓢虫RNA的提取
        2.1.5 TotalRNA样品检测及文库构建
        2.1.6 解毒、消化相关基因的表达量的检测
        2.1.7 数据处理及分析
    2.2 结果与分析
        2.2.1 测序数据结果分析
        2.2.3 基因差异分析
    2.3 讨论
第三章 Bt蛋白对龟纹瓢虫共生微生物多样性的影响
    3.1 材料与方法
        3.1.1 供试昆虫
        3.1.2 供试化合物和配制
        3.1.3 取样
        3.1.4 DNA的提取和送样样本的筛选
        3.1.5 数据分析
    3.2 结果与分析
        3.2.1 数据统计分析
        3.2.2 龟纹瓢虫共生菌的组成和结构
        3.2.3 龟纹瓢虫幼虫体内共生菌群落组成和结构的比较
    3.3 讨论
第四章 Cry2Ab蛋白浓度对龟纹瓢虫幼虫体内共生菌种群的影响
    4.1 材料与方法
        4.1.1 供试昆虫
        4.1.2 供试化合物
        4.1.3 取样
        4.1.4 DNA的提取和送样样本的筛选
        4.1.5 虫重和单对产卵量的测定
        4.1.6 检测和测序方法
        4.1.7 数据分析
    4.2 结果与分析
        4.2.1 龟纹瓢虫生命表参数分析
        4.2.2 测序统计分析
        4.2.3 Cry2Ab蛋白不同浓度作用下龟纹瓢虫体内微生物的结构和多样性
        4.2.4 Cry2Ab蛋白不同浓度作用下龟纹瓢虫体内共生菌的组成多样性的比较
    4.3 讨论
第五章 Cry2Ab蛋白作用时间对龟纹瓢虫幼虫共生菌的影响
    5.1 材料与方法
        5.1.1 供试昆虫
        5.1.2 供试化合物
        5.1.3 取样
        5.1.4 虫体蛋白检测及饲料中Cry2Ab蛋白稳定性检测
        5.1.5 DNA的提取和送样样本的筛选
        5.1.6 数据分析
    5.2 结果分析
        5.2.1 饲料中及龟纹瓢虫体内Cry2Ab蛋白的含量
        5.2.2 数据统计分析及不同处理组共生菌的组成和结构
        5.2.3 龟纹瓢虫体内共生菌的组成多样性的比较
    5.3 讨论
第六章 全文结论
    6.1 总结
    6.2 创新点
    6.3 展望
参考文献
致谢
作者简历



本文编号：3925100