三叶斑潜蝇气味结合蛋白的鉴定及功能研究

发布时间：2024-05-11 11:57

　　三叶斑潜蝇Liriomyza trifolii,是一种多食性的世界性害虫,危害多种蔬菜、花卉,造成产量和品质下降。气味结合蛋白(odorant binding protein,OBP)是一类存在于昆虫嗅觉感器淋巴液中的小分子酸性蛋白,特异性识别气味分子,并将化学信号传递到受体,引发嗅觉反应。本研究通过对三叶斑潜蝇进行转录组测序,鉴定并克隆气味结合蛋白基因,对其时空表达情况进行分析,进行原核表达及纯化,研究其气味结合特性及免疫定位情况,为三叶斑潜蝇气味结合蛋白研究及其嗅觉机制提供理论依据,为绿色防治三叶斑潜蝇提供新的思路和方法。通过对转录组测序结果进行筛选和验证,最终得到9个三叶斑潜蝇气味结合蛋白基因,命名为LtriOBP1-9,分为三个亚家族:7个Classic OBPs,1个Minus-C OBP和1个Dimer OBP,而9个三叶斑潜蝇OBPs的无根进化树显示其之间的同源性较低,但与美洲斑潜蝇的气味结合蛋白具有非常高的同源性。采用qPCR技术,对其进行时空表达分析发现:在不同发育阶段,LtriOBP5在幼虫期大量表达,LtriOBP4在蛹期大量表达,剩下的7个LtriOBPs均在成...

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2.1三叶斑潜蝇总RNAFig.2.1ThetotalRNAofLiriomyzatrifoliiM：分子量标准；1，2，3：RNAM：Maker；1，2，3：RNA

图2.1三叶斑潜蝇总RNAFig.2.1ThetotalRNAofLiriomyzatrifoliiNAM：Maker；1，2，3：RNAOBPs基因克隆验证结果由短片段拼接而成，可能存在偏差，为了确保得到性，保证后续实验的可靠性，对转录组中的OBPs....

图2.2三叶斑潜蝇OBPs基因PCR产物Fig.2.2ThePCRproductofOBPsgeneinLiriomyzatrifoliiM：分子量标准；1-9：LtriOBP1-9M：Maker；1-9：LtriOBP1-9

图2.1三叶斑潜蝇总RNAFig.2.1ThetotalRNAofLiriomyzatrifoliiM：分子量标准；1，2，3：RNAM：Maker；1，2，3：RNA2.2.1.2三叶斑潜蝇OBPs基因克隆验证结果转录组测得的序列是由短片段拼接而成，....

图2.3三叶斑潜蝇LtriOBP1-9基因推导的氨基酸序列对比

图2.3三叶斑潜蝇LtriOBP1-9基因推导的氨基酸序列对比Fig.2.3AlignmentofdeducedaminoacidsequenceofLtriOBP1-9genesinLiriomyzatrifolii2.2.3三叶斑潜蝇OBP....

图2.5以MaximumLikelihood法构建的三叶斑潜蝇与黑腹果蝇、美洲斑潜蝇气味结合蛋白的进化树

14将三叶斑潜蝇LtriOBPs与黑腹果蝇、美洲斑潜蝇的OBPs进行系统发育分析，构建进化树，结果如图2.5所示，三叶斑潜蝇LtriOBPs与黑腹果蝇、美洲斑潜蝇的OBPs聚成多个小支，LtriOBP1与LsatPBP4，LtriOBP2与LsatPBP4，Ltri....

本文编号：3969917