新疆核桃复合微生物菌种的筛选

发布时间：2017-06-27 18:23

  本文关键词：新疆核桃复合微生物菌种的筛选，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：核桃(Juglans regia)是世界上重要的坚果树种之一,在我国的种植历史悠久。进入新世纪以来,新疆核桃生产发展迅猛,而新疆因为其特殊的自然环境和土壤条件往往使得引进的核桃微生物菌肥不能很好的发挥其作用甚至无法存活,对于新疆核桃专用微生物菌肥的研究势在必行。本研究使用新疆本地核桃根际土壤中分离筛选的菌种进行组合,通过多菌种混菌发酵,对各菌种组合解磷解钾能力进行测试,以期获得功能全面能力最优的最佳菌种组合,为新疆核桃专用微生物菌肥的研制打下基础。本论文的材料选用新疆农业大学林业研究所保藏的功能单菌株(分离自新疆南疆主要林果产区喀什、和田、阿克苏等地核桃园),经过以16s rDNA测序为基础的BLAST比对结合各单菌株之间的生物拮抗关系,将功能不同的菌株进行组合,根据实验室条件下的功能表现筛选出功能表达优秀的菌种组合；之后将筛选出的菌种组合进行大田实验,测定复合菌株定殖能力以及在大田复杂生存条件下的能力表达,最终筛选出适合生产核桃专用复合微生物菌肥的菌种组合。还进行了多组单因素实验优化了最佳菌种组合的单菌株发酵条件,主要结果如下：(1)通过本研究,进一步的确定了各供试菌株的分类地位,解磷菌主要属于Pseudomonas sp.. Acinetobacter sp.. Microbacterium sp.. Staphylococcus sp四个属：解钾菌主要来自Bacillus sp.. Microbacterium sp.. Pseudomonas sp.. Enterobacter sp.四个属,通过MEGA6的NJ建树可以得到各菌种的分类地位以及它们之间的分类关系。(2)在明确各菌种分类地位的基础上,进行不同功能菌种的组合,混合发酵,测定各菌种组合的解磷解钾能力,经过对测定结果的分析,获得了11株解无机磷能力较强的组合菌株(17、38、56、22、43、14、16、22、44、46、48),其中14和44最强发酵液溶磷量达到300μg/mL以上,10株解有机磷能力较强的菌株(15、35、42、44、45、25、57、59、63、68)其中表达能力最强的菌株为组合35和63,两菌种组合能力表达稳定且发酵液溶磷量达到40μg/mL;解钾能力在组合菌株中表现一般,最终得到7株(组合2、16、17、22、27、43、68)具有解钾能力的组合菌株,有3株(组合2、22、68)能表达出较强的解钾能力(高于30pg/mL)。综合各菌种组合在各项能力测定中的表达情况我们可以得到功能较为全面的两个菌种组合22(p-4p1k5)、68 (p-7p7k11)。(3)将室内试验筛选出的功能较全面菌种组合与保藏的固氮细菌复合后进行田间实验,根据活菌数的监控,各菌种组合均表现出较强的定殖能力,对实验区域土壤速效养分进行测定得到T3,T5两组解钾能力较强的菌株,两菌种组合处理内的土壤速效钾含量在整个生长季内稳定高于培养基对照和空白对照；所有田间实验的组合对土壤速效磷含量均表达出不同程度的影响,其中T5组合能力表达相对稳定持久；T2、T3、T5、 T6、T7提高了土壤中碱解氮的含量,达到50mg/kg。(4)对优势菌种组合内表现活跃的单菌株的发酵条件通过单因素实验法进行了优化,确定了富集培养基配方,为菌剂的大规模生产提供了参考。
【关键词】：新疆核桃 根际土壤 功能菌株 复合
【学位授予单位】：新疆农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S664.1;S144
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 第1章 绪论9-15
• 1.1 文献综述9-12
• 1.2 目的及意义12
• 1.3 研究内容及技术路线12-15
• 第2章 材料与方法15-19
• 2.1 供试材料15
• 2.2 试验地概况15-16
• 2.3 实验方法16-19
• 第3章 新疆核桃专用微生物菌肥菌种组合筛选19-28
• 3.1 分类地位19-21
• 3.2 生物拮抗测试结果21-23
• 3.3 菌种组合能力测定23-26
• 3.4 讨论与小结26-28
• 第4章 组合菌株在核桃根际的定殖动态及其对土壤速效养分影响28-38
• 4.1 组合菌株定殖动态28-31
• 4.2 菌种组合对土壤中速效养分的影响31-38
• 第5章 单菌株发酵条件优化38-41
• 5.1 最佳碳源及浓度的确定38-39
• 5.2 最佳氮源及其浓度的确定39-40
• 5.3 氯化钠浓度的确定40
• 5.4 结论与小结40-41
• 第6章 结论及展望41-43
• 参考文献43-47
• 致谢47-48
• 作者简历48

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