棉铃虫V-ATP酶亚基A基因克隆及表达谱分析

发布时间：2017-08-16 04:24

  本文关键词：棉铃虫V-ATP酶亚基A基因克隆及表达谱分析

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【摘要】：为探索棉铃虫Helicoverpa armigera液泡型ATP酶(vacuolar-type proton ATPase,V-ATP酶)亚基A对棉铃虫生长发育的影响及其在Bt杀虫机制中的作用,采用PCR结合RACE技术克隆了棉铃虫V-ATP酶亚基A基因序列,通过实时荧光定量PCR技术测定了其在棉铃虫不同发育历期和幼虫肠道不同组织中的表达量;并比较了4龄幼虫取食含Cry1Ac蛋白饲料后中肠中该基因表达量的变化。结果显示,棉铃虫V-ATP酶亚基A基因全长2 578 bp(Gen Bank登录号KP090287),开放阅读框1 863 bp,编码621个氨基酸。V-ATP酶亚基A高度保守,不同物种间氨基酸序列同源性大于90%。V-ATP酶亚基A在棉铃虫整个生育期都有表达,在4龄幼虫体内表达量最高,是卵期的3.00倍;在幼虫肠道不同组织中,中肠中表达量最高,是后肠中的2.65倍。4龄棉铃虫幼虫取食含Cry1Ac蛋白的人工饲料后,中肠V-ATP酶亚基A的表达受到抑制,表达量为对照的0.39~0.81倍。表明V-ATP酶亚基A基因可能参与棉铃虫的生长发育和代谢过程,并可能与抵御Cry1Ac的毒杀作用有一定关系。
【作者单位】： 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室;
【关键词】： 棉铃虫 V-ATP酶亚基A 表达 苏云金芽胞杆菌
【正文快照】： Kakinuma et al.(1981)首次在酵母细胞的液泡膜上发现了一种运输质子的三磷酸腺苷酶(adeno-sine triphosphate,ATP),命名为液泡ATP酶(vacuo-lar-ATPase),简称V-ATP酶。V-ATP酶广泛分布于真核细胞原生质膜和各种细胞器内膜上(StevensForgac,1997),V-ATP酶通过利用水解ATP时所

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1 赵西梅;以V-ATP酶为靶标的二氢沉香呋喃衍生物的合成及其杀虫活性[D];西北农林科技大学;2016年

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本文编号：681457