小菜蛾触角结合蛋白PxylOBP31的鉴定与结合特性分析

发布时间：2017-09-10 00:03

  本文关键词：小菜蛾触角结合蛋白PxylOBP31的鉴定与结合特性分析

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【摘要】：【目的】触角结合蛋白(antennal binding proteins,ABPs)为昆虫气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)家族的一个亚类,是昆虫识别和响应外界环境中气味信号的载体之一,对昆虫的生存和繁衍有着重要的意义。明确触角结合蛋白在小菜蛾Plutella xylostella(L.)嗅觉识别中的作用,有助于揭示小菜蛾嗅觉识别分子机制。【方法】利用PCR技术克隆小菜蛾的一个触角结合蛋白基因;采用实时荧光定量PCR技术对该基因在小菜蛾不同发育阶段和成虫不同组织中的表达量进行分析;利用荧光竞争结合实验测试该触角结合蛋白与39种配基化合物的结合特性。【结果】成功克隆了一个小菜蛾触角结合蛋白基因,命名为Pxyl OBP31(Gen Bank登录号:KT156676)。序列分析结果显示,其开放阅读框全长411 bp,编码136个氨基酸,N端自起始位置开始21个氨基酸为信号肽,含有气味结合蛋白家族的6个保守半胱氨酸残基,预测分子量为14.74 k D,等电点为4.41。表达谱分析表明,Pxyl OBP31主要在雄蛾中表达,且交配后的雄蛾中表达量明显降低;该基因在小菜蛾触角中有较高表达,在雄蛾触角中的表达量比雌蛾触角中高近2倍。结合特性实验结果显示,Pxyl OBP31与醛、酮、萜品油烯以及邻苯二甲酸二异丁酯等物质的结合能力较强,与3种性信息素及其他烯烃与酯类结合能力弱。【结论】本研究明确了Pxyl OBP31的核苷酸序列以及发育和组织表达谱。根据qRT-PCR和荧光竞争结合实验结果,推测Pxyl OBP31蛋白可能与小菜蛾觅偶、定位寄主植物等行为有关。
【作者单位】： 福建农林大学应用生态研究所;闽台特色作物病虫生态防控协同创新中心;农业部闽台作物有害生物综合治理重点实验室;福建农林大学植物保护学院;福建农林大学生命科学学院;
【关键词】： 小菜蛾 气味结合蛋白 触角结合蛋白 基因克隆 表达谱 荧光竞争结合试验
【基金】：国家自然科学基金项目(31301666;31230061;31320103922) 福建省自然科学基金项目(2014J05031)
【分类号】：S433.4
【正文快照】： 小菜蛾Plutella xylostella(L.)属鳞翅目(Lepidopetera)菜蛾科(Plutellidae),是为害十字花科作物的重要害虫之一,其分布遍及世界所有十字花科蔬菜种植区(Furlong et al.,2013)。据节肢动物农药抗性数据库(APRD,http://www.pesticideresistance.com)统计结果显示,目前小菜蛾已

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