PMA-PCR方法快速检测VBNC状态青枯菌

发布时间：2017-09-20 08:37

  本文关键词：PMA-PCR方法快速检测VBNC状态青枯菌

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【摘要】：青枯菌为应对逆境胁迫,可进入活的但非可培养状态(viable but non-culturable,VBNC)。本文利用叠氮溴化丙锭(PMA)与PCR技术相结合,建立了一种快速有效区分青枯菌死活细胞的分子检测方法。基于hrcS基因序列,设计了一对青枯菌种特异性检测引物hrcSf/hrcSr;利用PMA对青枯菌Po82菌株的细胞悬浮液样品进行预处理,随后进行常规PCR扩增。结果表明,当样品中PMA质量浓度为3μg/mL、曝光时间大于5min时,PMA可有效抑制死亡菌体细胞中的DNA扩增;且对可培养和VBNC状态细胞中的DNA扩增没有影响;本试验建立的PMA-PCR方法能有效对包括VBNC状态在内的青枯菌活菌进行检测,避免了假阳性与假阴性结果的产生。
【作者单位】： 天津农学院园艺园林学院;中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室;
【关键词】： 青枯菌 叠氮溴化丙锭 活的非可培养状态
【基金】：公益性行业(农业)科研专项(201303015) 国家自然科学基金(31272008;31371908) 天津市农业科技成果转化与推广项目(201002250)
【分类号】：S432.4
【正文快照】： (1.College of Horticulture and Landscape,Tianjin Agricultural University,Tianjin 300384,China;2.Institute of Plant Protection,Chinese Academy of Agricultural Sciences,State Key Laboratory forBiology of Plant Diseases and Insect Pests,Beijing 100193,China

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本文编号：887037