生防菌密旋链霉菌Act12中SPA7074缺失突变株的构建及其次级代谢产物鉴定

发布时间：2017-09-21 05:07

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【摘要】：【目的】通过基因工程手段构建生防菌Act12转录调控因子SPA7074缺失突变株,并挖掘其中活性次级代谢产物资源和探讨其活性机理。【方法】利用同源重组方法敲除Act12基因组中可能的Tet R家族转录调控因子编码基因spa7074(accession number:KU955325),平板实验检测缺失突变株发酵液抑菌活性的变化,并通过HPLC比较代谢图谱,然后通过质谱及核磁共振对差异峰对应化合物进行结构鉴定。【结果】SPA7074缺失突变株对几种病原真菌的拮抗活性显著增强,比较代谢图谱表明出现数个差异峰,将最显著差异峰所对应化合物进行分离纯化鉴定,结果为寡霉素D。【结论】本研究通过基因工程手段敲除生防菌株Act12中的负转录调控转录因子,使得突变菌株抑菌活性显著增强,并获得了产量达野生型菌株7倍的寡霉素D高产菌株Δspa7074。
【作者单位】： 西北农林科技大学生命科学学院;西北农林科技大学资源环境学院;
【关键词】： 生防菌 密旋链霉菌Act TetR家族 基因中断 寡霉素D
【基金】：陕西省农业科技创新与攻关(2015NY066) 上海交通大学微生物代谢国家重点实验室开放基金(MMLKF14-09) 中央高校基本科研业务费(Z109021426,Z109021432) 高校博士点基金(20120204120034,20120204120042)~~
【分类号】：S476.1
【正文快照】： 链霉菌是一类高G+C含量的革兰氏阳性细菌,产生的抗生素种类繁多,结构丰富多样,生理活性广泛,占目前已市场化的天然产物来源抗生素的三分之二[1]。这些活性物质的产生通常受到复杂而庞大的调控网络的控制,所以,尽管链霉菌的基因组中蕴藏着非常丰富的次级代谢产物生物合成基因簇

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本文编号：892525