AI-2/LuxS群体感应系统介导植物乳杆菌益生特性的初步研究
发布时间：2024-06-02 17:55
近年来,关于群体感应(quorum sensing, QS)系统介导病原微生物致病机理等方面的研究比较多,而群体感应系统介导益生菌,特别是乳杆菌在抑菌效果、黏附性、耐酸性及在动物消化道中的定植等益生特性方面的研究比较少,并且AI-2/LuxS群体感应系统介导乳杆菌对胆盐的耐受、调节肠道微生态平衡以及对机体的免疫调节等益生特性还未见报道。基于当前的研究现状,本课题研究群体感应系统介导植物乳杆菌AY01和植物乳杆菌YM4-3的生长特性、抑菌性、luxS基因表达、耐酸耐胆盐并对植物乳杆菌群体感应luxS基因进行敲除。乳酸菌(Lactic acid bacteria, LAB)是指在发酵过程中能够利用碳水化合物进行发酵,产生以乳酸为主要发酵产物的一群细菌；它不是微生物分类学上的名称,只是一种惯用叫法。乳酸菌的分布非常广泛,在生物体和自然环境中均有分布,如：人和动物的消化系统、泌尿生殖系统、粪便；并且发酵动植物食品和饮料、植物体、土壤、淤泥和污水中均有乳酸菌分布。乳杆菌(Lactobacillus)是乳酸菌(LAB)最大的一个属,因其形态呈杆状以及能发酵碳水化合物(主要为葡萄糖)并产生大量乳酸而...
【文章页数】：93 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩写词表
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 种内的群体感应系统
1.2.1 革兰氏阴性细菌群体感应系统
1.2.2 革兰氏阳性细菌群体感应系统
1.3 种间信号感应系统
1.3.1 自诱导-2(AI-2)概述
1.3.2 扩散信号因子(Diffusible signal factor,DSF)概述
1.4 乳杆菌概述
1.5 乳酸杆菌AI-2/LuxS群体感应系统介导的益生特性研究进展
1.5.1 乳酸杆菌AI-2/LuxS群体感应系统介导的抑菌特性研究
1.5.2 乳杆菌AI-2/LuxS群体感应系统介导的耐酸特性研究
1.5.3 乳杆菌AI-2/LuxS群体感应系统介导的肠道黏附和生物膜形成
1.5.4 乳杆菌AI-2/LuxS群体感应系统介导的动物消化道定植
2 问题与展望
3. 研究的目的及意义
第二章 群体感应介导的植物乳杆菌益生特性
2.1 实验材料
2.1.1 实验菌株
2.1.2 实验仪器
2.1.3 实验试剂
2.1.4 培养基及试剂配制
2.2 实验方法
2.2.1 生长曲线和产酸试验
2.2.2 抑菌试验
2.2.3 生长阶段luxS基因表达分析
2.2.4 植物乳杆菌的酸耐受性研究
2.2.5 植物乳杆菌耐胆盐研究
2.3 实验结果与分析
2.3.1 植物乳杆菌生长和产酸曲线绘制
2.3.2 抑菌实验结果与分析
2.3.3 生长阶段luxS基因表达分析
2.3.4 植物乳杆菌耐酸特性结果
2.3.5 耐胆盐研究结果
2.4 本章小结
第三章 植物乳杆菌luxS基因功能研究
3.1 实验材料
3.1.1 菌种及质粒
3.1.2 实验仪器
3.1.3 工具酶与试剂盒
3.1.4 培养基
3.1.5 试剂
3.2 实验方法
3.2.1 引物设计
3.2.2 植物乳杆菌AY01和植物乳杆菌YM 4-3的基因组抽提
3.2.3 基因的PCR扩增以及序列分析
3.2.4. 非温度敏感性质粒构建
3.2.5 温度敏感性质粒构建
3.2.6 基因敲除载体转化进入植物乳杆菌
3.3 实验结果
3.3.1 植物乳杆菌AY01和YM4-3基因组提取及PCR扩增产物
3.3.2 植物乳杆菌AY01和YM4-3luxS基因的序列分析
3.3.3 植物乳杆菌基因敲除载体的构建
3.3.4 植物乳杆菌YM4-3luxS基因敲除载体pKML01构建
3.3.5 植物乳杆菌YM4-3luxS基因敲除载体pKML02构建
3.3.6 植物乳杆菌AY01luxS基因敲除载体pKML05构建
3.3.7 植物乳杆菌luxS基因敲除
3.4 本章小结
第四章 总结
附录A 攻读硕士期间发表论文目录
致谢
参考文献
附录A 本实验所用质粒图谱
本文编号：3987596
【文章页数】：93 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩写词表
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 种内的群体感应系统
1.2.1 革兰氏阴性细菌群体感应系统
1.2.2 革兰氏阳性细菌群体感应系统
1.3 种间信号感应系统
1.3.1 自诱导-2(AI-2)概述
1.3.2 扩散信号因子(Diffusible signal factor,DSF)概述
1.4 乳杆菌概述
1.5 乳酸杆菌AI-2/LuxS群体感应系统介导的益生特性研究进展
1.5.1 乳酸杆菌AI-2/LuxS群体感应系统介导的抑菌特性研究
1.5.2 乳杆菌AI-2/LuxS群体感应系统介导的耐酸特性研究
1.5.3 乳杆菌AI-2/LuxS群体感应系统介导的肠道黏附和生物膜形成
1.5.4 乳杆菌AI-2/LuxS群体感应系统介导的动物消化道定植
2 问题与展望
3. 研究的目的及意义
第二章 群体感应介导的植物乳杆菌益生特性
2.1 实验材料
2.1.1 实验菌株
2.1.2 实验仪器
2.1.3 实验试剂
2.1.4 培养基及试剂配制
2.2 实验方法
2.2.1 生长曲线和产酸试验
2.2.2 抑菌试验
2.2.3 生长阶段luxS基因表达分析
2.2.4 植物乳杆菌的酸耐受性研究
2.2.5 植物乳杆菌耐胆盐研究
2.3 实验结果与分析
2.3.1 植物乳杆菌生长和产酸曲线绘制
2.3.2 抑菌实验结果与分析
2.3.3 生长阶段luxS基因表达分析
2.3.4 植物乳杆菌耐酸特性结果
2.3.5 耐胆盐研究结果
2.4 本章小结
第三章 植物乳杆菌luxS基因功能研究
3.1 实验材料
3.1.1 菌种及质粒
3.1.2 实验仪器
3.1.3 工具酶与试剂盒
3.1.4 培养基
3.1.5 试剂
3.2 实验方法
3.2.1 引物设计
3.2.2 植物乳杆菌AY01和植物乳杆菌YM 4-3的基因组抽提
3.2.3 基因的PCR扩增以及序列分析
3.2.4. 非温度敏感性质粒构建
3.2.5 温度敏感性质粒构建
3.2.6 基因敲除载体转化进入植物乳杆菌
3.3 实验结果
3.3.1 植物乳杆菌AY01和YM4-3基因组提取及PCR扩增产物
3.3.2 植物乳杆菌AY01和YM4-3luxS基因的序列分析
3.3.3 植物乳杆菌基因敲除载体的构建
3.3.4 植物乳杆菌YM4-3luxS基因敲除载体pKML01构建
3.3.5 植物乳杆菌YM4-3luxS基因敲除载体pKML02构建
3.3.6 植物乳杆菌AY01luxS基因敲除载体pKML05构建
3.3.7 植物乳杆菌luxS基因敲除
3.4 本章小结
第四章 总结
附录A 攻读硕士期间发表论文目录
致谢
参考文献
附录A 本实验所用质粒图谱
本文编号：3987596
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/rengongzhinen/3987596.html
