生物3D打印制备SA/Ge凝胶支架探究淫羊藿苷对软骨细胞增殖、分泌的影响

发布时间：2022-02-19 01:38

　　软骨缺损在运动损伤中是最常见的,容易导致形成骨性关节炎,引发疼痛、关节畸形等症状。存在于关节中的软骨细胞分化完全、成熟度高,致使其非常弱的再生能力,外加在软骨周围没有神经、血管及淋巴组织,所以靠自身来修复的可能性显得微乎其微。随着组织工程技术的发展,修复软骨损伤这一难题将逐渐得到解决。本论文利用生物3D打印技术,首先考察实验仪器参数对组织支架结构以及孔径的影响。以2 g海藻酸钠和6 g明胶作为打印基材,制备出的复合凝胶呈现透明状、粘度适中且材料的流体性能良好。通过考察打印气压、打印速度、打印针头直径和打印间距对支架形貌的影响,确定出0.30 Mpa、16 mm/s、300μm和0.8 mm是最优的制备参数,制备出的支架结构规整、孔孔贯通性良好。其次,对制备出的SA/Ge复合凝胶支架的性能进行简单的研究。热稳定性实验表明,复合支架相比纯海藻酸钠支架具有更好的稳定性能;支架溶胀结果发现,复合凝胶支架在4 h内就达到其最大溶胀率,为713%;从复合支架的降解实验结果得出,Ca Cl2对海藻酸钠交联度较低且主要交联支架的外部结构;对支架的浸提液做毒性分析,与正常培养基相比没有显著性差异,表明制... 

【文章来源】：华侨大学福建省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
主要符号对照表
第1章 绪论
    1.1 组织工程原理
    1.2 组织工程支架制备方法
        1.2.1 静电纺丝法
        1.2.2 相分离技术
        1.2.3 微球烧结技术
        1.2.4 纤维黏结
    1.3 生物 3D打印
    1.4 骨软骨缺损研究现状
    1.5 本论文研究意义与主要内容
第2章 SA/Ge支架制备及优化
    2.1 引言
    2.2 实验材料和仪器
        2.2.1 实验试剂
        2.2.2 实验设备
    2.3 实验方法
        2.3.1 复合胶体溶液配制及打印前预处理
        2.3.2 打印压力对支架精确度的影响
        2.3.3 打印速度对支架精确度的影响
        2.3.4 打印针头直径对支架精确度的影响
        2.3.5 打印线条间距对支架精确度的影响
    2.4 实验结果
        2.4.1 打印气压对支架的影响
        2.4.2 打印速度对支架的影响
        2.4.3 打印针头直径对支架的影响
        2.4.4 打印间距对支架的影响
    2.5 小结
第3章 复合支架性能研究及毒性测试
    3.1 引言
    3.2 实验材料和仪器
        3.2.1 实验试剂
        3.2.2 实验设备
    3.3 实验方法
        3.3.1 复合支架热稳定性测试
        3.3.2 支架溶胀率测定
        3.3.3 支架降解速率测定
        3.3.4 支架毒性测定
    3.4 实验结果
        3.4.1 热稳定性分析
        3.4.2 溶胀率检测
        3.4.3 降解速率测定
        3.4.4 毒性检验
    3.5 小结
第4章 软骨细胞培养、性能鉴定及ICA对其生长影响
    4.1 引言
    4.2 实验材料和仪器
        4.2.1 实验试剂
        4.2.2 实验设备
    4.3 实验方法
        4.3.1 软骨细胞形态观察
        4.3.2 软骨细胞生长曲线
        4.3.3 软骨细胞组织学染色
        4.3.4 ICA对平面培养细胞的增殖影响
        4.3.5 ICA对平面培养细胞分泌GAG影响
        4.3.6 ICA对软骨细胞凋亡影响
    4.4 实验结果
        4.4.1 软骨细胞形态
        4.4.2 细胞生长曲线
        4.4.3 软骨细胞组织学染色
        4.4.4 ICA对软骨细胞增殖的影响
        4.4.5 ICA对细胞分泌GAG的影响
        4.4.6 ICA对细胞凋亡的观察
    4.5 小结
第5章 细胞在支架上生长状态及ICA对其影响
    5.1 引言
    5.2 实验材料和仪器
        5.2.1 实验试剂
        5.2.2 实验仪器
    5.3 实验方法
        5.3.1 细胞在支架上的粘附
        5.3.2 细胞在支架上的分布
        5.3.3 细胞在支架不同层厚的死活
        5.3.4 梯度ICA对细胞在支架上的增殖作用
        5.3.5 梯度ICA对细胞在支架分泌GAG测定
    5.4 实验结果
        5.4.1 细胞在支架上粘附
        5.4.2 细胞在支架上的分布
        5.4.3 细胞在支架不同层厚上的死活观察
        5.4.4 ICA对支架上细胞的促增殖作用
        5.4.5 ICA对支架上细胞分泌GAG影响
    5.5 小结
第6章 总结
    6.1 实验总结
    6.2 后续实验建议
参考文献
致谢
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]淫羊藿苷促进软骨细胞体外3-D培养下生成软骨[J]. 王鹏珍,万超.  中国老年学杂志. 2015(10)
[2]大鼠膝关节软骨细胞体外培养去分化时间的实验研究[J]. 丁万军,刘世清,贺斌,邓明.  武汉大学学报(医学版). 2012(01)
[3]微球在组织工程中的应用[J]. 崔代超,范田园.  国际药学研究杂志. 2010(04)
[4]淫羊藿苷对骨髓间充质干细胞骨向诱导的实验研究[J]. 吴昊,查振刚,姚平,熊高鑫,郇松玮,束志勇.  中国中西医结合杂志. 2010(04)
[5]淫羊藿苷元脂质体的制备及其对大鼠骨髓基质细胞增殖分化影响的研究[J]. 贾东升,贾晓斌,施峰,薛璟,孙娥,陈玲玲,张振海.  中国药学杂志. 2010(05)
[6]热致相分离法制备聚合物微孔膜的研究进展[J]. 苏仪,李永国,陈翠仙,李继定.  膜科学与技术. 2007(05)
[7]Icariin promotes expression of PGC-1α,PPARα,and NRF-1 during cardiomyocyte differentiation of murine embryonic stem cells in vitro[J]. Ling DING,Xing-guang LIANG,Dan-yan ZHU,Yi-jia LOU~2Institute of Pharmacology and Toxicology and Biochemical Pharmaceutics,College of Pharmaceutical Sciences,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2007(10)
[8]静电纺丝技术及其研究进展[J]. 杨恩龙,王善元,李妮,赵丛涛.  产业用纺织品. 2007(08)
[9]葛根素和淫羊藿甙对成骨细胞生物学作用的比较研究[J]. 殷晓雪,陈仲强,党耕町.  中国骨与关节损伤杂志. 2007(03)
[10]淫羊藿甙对成骨细胞Smad4 mRNA作用的实验研究[J]. 雪原,王沛,齐清会,倪虹,马信龙,郭世绂.  中华骨科杂志. 2005(02)

博士论文
[1]仿生组装淫羊藿苷控释型骨修复材料的构建与应用基础研究[D]. 吴涛.南方医科大学 2009

硕士论文
[1]亚临界二氧化碳烧结共载细胞多孔微球组织工程支架及其性能的研究[D]. 马腾.华侨大学 2015
[2]淫羊藿甙对关节软骨细胞增殖、分泌及MAPKs通路的影响[D]. 史冰楠.华中农业大学 2013



本文编号：3631950