凡纳滨对虾血清中直接与病原菌相结合的主要蛋白的鉴定

发布时间：2018-06-24 17:09

  本文选题：凡纳滨对虾 + 亲和蛋白质组学　； 参考：《水产学报》2008年01期

【摘要】：以凡纳滨对虾为研究对象,将其血清分别与溶藻酸弧菌,哈维氏弧菌,嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌等4种病原菌孵育,采用亲和蛋白质组学和Western-blotting等分子生物学方法纯化、鉴定和确证其中可与病原菌直接结合的蛋白。结果发现,与对照组相比4种病原菌与虾血清孵育5h后均可与对虾血清中分子质量约为75 000(p75)的蛋白相结合,而孵育15h后既可与p75相结合,还可与分子质量约为77 000(p77)的蛋白以及0~4种不同分子质量的蛋白相结合。经MALDI-TOF/MS分析和Mascot搜索引擎检索,p75和p77蛋白分别与凡纳滨对虾中分子质量约为75 000、77 000的2个血蓝蛋白亚基具有显著一致性。尤其是p75蛋白还可与兔抗血蓝蛋白75 000亚基抗体发生特异性结合。由此推断,凡纳滨对虾血清中与病原菌直接结合的主要蛋白为血蓝蛋白,提示血蓝蛋白全蛋白可能具有抗菌活性。
[Abstract]:The serum of Penaeus vannamei was incubated with Vibrio alginate, Vibrio harvetii, Aeromonas hydrophila and Staphylococcus aureus respectively, and purified by affinity proteomics and Western-blotting. To identify and confirm the proteins which can directly bind to pathogenic bacteria. The results showed that after incubation with shrimp serum for 5 h, the four pathogens could bind to protein with molecular weight of 75 000 (p75) in the serum of Penaeus penaeus, but after 15 hours of incubation, they could bind to p75. It also binds to proteins with molecular weight of about 77000 (p77) and four proteins with different molecular weights. By MALDI-TOF / MS analysis and Mascot search engine, the p75 and p77 proteins were found to be significantly consistent with the two hemocyanin subunits with molecular weight of 75,000 ~ 77000 in Penaeus vannamei, respectively. In particular, p75 protein can bind specifically with rabbit anti-hemocyanin 75 000 subunit antibody. It is inferred that the main protein that binds directly to pathogenic bacteria in the serum of Penaeus vannamei is hemocyanin, suggesting that the whole protein of hemocyanin may have antibacterial activity.
【作者单位】： 汕头大学理学院生物学系 汕头大学理学院生物学系 汕头大学理学院生物学系 汕头大学理学院生物学系 汕头大学海洋生物研究所 汕头大学医学院第一附属医院
【基金】：国家自然科学基金(30400258) 广东省自然科学基金(06027212) 汕头市科技计划项目(2006-148) 广东省科技计划项目(2006A36502004)
【分类号】：S945.4

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2062326