基于目标链双重信号放大的电致化学发光生物传感器的研究

发布时间：2017-10-23 08:49

  本文关键词：基于目标链双重信号放大的电致化学发光生物传感器的研究

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【摘要】：以CdSe/ZnS量子点为发光物质,结合目标物循环放大和信号转换放大的双重放大策略,利用电致化学放光技术(ECL),构建了一种新型传感器用于前列腺癌细胞标志物microRNA-141(mi RNA-141)的高灵敏检测。首先以发卡型DNA H1为模版DNA,目标物microRNA-141通过碱基互补配对打开发卡型DNA H1,得到带有部分裸露的DNA双链,当发卡型DNA H2存在的情况下,DNA H2与裸露的碱基杂交并将microRNA-141置换下来,从而实现目标物microRNA-141的循环,并得到大量的模版链。在DNA聚合酶的作用下,H1以H2为模版开始聚合,得到碱基互补配对的双链DNA。加入内切酶后,双链DNA上的两个特异性位点被剪切酶剪切,得到大量的Reporter DNA。通过该信号放大策略,实现了由一小部分DNA转换为大量的Reporter DNA。此时将得到的Reporter DNA滴加到修饰有DNA Capture 2的传感器界面上,通过碱基互补配对,Reporter DNA将修饰有CdSe/ZnS量子点的Capture 1捕获在电极表面,得到电致化学发光响应,在优化的实验条件下,线性范围为50 nmol/L~0.5 pmol/L,检测限为0.17 pmol/L(S/N=3)。该传感器对microRNA-141的检测具有灵敏度高、检测范围宽、制作简便、成本低的优点,并且具有良好的选择性和重现性。
【作者单位】： 西南大学化学化工学院发光与实时分析重点实验室;
【关键词】： 电致化学发光 目标物循环策略 microRNA-
【基金】：国家自然科学面上基金项目(21575116,21675129,21675130) 中央高校基本科研业务费专项资金资助(XDJK2015A002)
【分类号】：TP212.3
【正文快照】： 0引言 前列腺癌在西方国家男性高发的恶性肿瘤中,其死亡率高居癌症死亡率的第二位,仅次于肺癌,前列腺癌是目前最主要的危害欧美国家男性健康的肿瘤疾病[1]。近年来,我国前列腺癌的发病率呈现明显持续增长趋势,2008年中国男性前列腺癌发病率为11.00/10万,世界人口标化发病率为

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