双酚A和17β-雌二醇的纳米荧光核酸适配体传感器的构建与应用研究

发布时间：2017-12-05 17:01

  本文关键词：双酚A和17β-雌二醇的纳米荧光核酸适配体传感器的构建与应用研究

  更多相关文章： 双酚A 17β-雌二醇 TGA-CdTe量子点 金纳米粒子 纳米荧光核酸适配体传感器

【摘要】：食品有害物与食品安全和人体健康密切相关,而目前对小分子食品有害物的定量检测研究尚不充分,因此构建快速有效检测小分子食品有害物的传感器显得尤为重要。核酸适配体由于具有亲和性高、特异性好、易修饰等优势,作为识别元件被广泛应用于传感器的构建。纳米材料具有独特的理化性质可作为信号转导元件,是研发新型传感方法和改善现有检测方法有力工具。本论文将核酸适配体特异性和量子点—金纳米粒子复合纳米探针的优势相结合,基于荧光内滤效应(Inner Filter Effect,IFE)和荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET)原理,构建了两种普遍适用的纳米荧光核酸适配体传感器,用于快速检测双酚A(bisphenol,BPA)和17β-雌二醇。主要研究内容如下:(1)基于核酸适配体的特异性识别,运用带相同电荷的金纳米粒子(AuNPs)和TGA-CdTe量子点(TGA-CdTe QDs),我们建立了一种核酸适配体IFE法检测BPA。AuNPs通过IFE可以猝灭TGA-Cd Te QDs的荧光。BPA和核酸适配体的特异性识别对盐诱导的AuNPs聚集有不同程度的影响,相应地改变IFE过程,因而BPA可以间接地调节IFE效率。在最优条件下,该方法检测BPA的线性范围为10 ng·mL-1-80 ng·mL-1,获得的检出限1.86 ng·mL-1低于我国饮用水中BPA的最大限量标准。该方法对BPA的选择性明显优于其它BPA同系物。在实际自来水样品中,该方法获得了与HPLC方法相一致的良好的回收率。该方法具有灵敏度高、选择性好、操作简便等突出的优势,有望适用于实际样品中目标物的现场实时检测。(2)基于核酸适配体的特异性识别,运用带相反电荷的TGA-CdTe量子点(TGA-CdTe QDs)和巯基乙胺保护的金纳米粒子(cysteamine-AuNPs),我们建立了一种新型的核酸适配体FRET法检测17β-雌二醇。当cysteamine-AuNPs和TGA-CdTe QDs混合时,由于两者之间有FRET作用,cysteamine-AuNPs可以显著地猝灭TGA-CdTe量子点的荧光。不同浓度的17β-雌二醇与其适配体之间的特异性识别对适配体诱导的cysteamine-AuNPs团聚有不同的影响,从而调节FRET过程。通过进行17β-雌二醇的检测证明了该方法的可行性,本实验获得的17β-雌二醇的线性浓度范围为0.5 ng·mL-1-150 ng·mL-1,检出限为0.057 ng·mL-1。相比于其它的内分泌干扰物和实际样品种可能共存的物质,该方法对17β-雌二醇有很好的选择性。此外,该方法被成功应用于实际水样和饲料样品中17β-雌二醇的检测,并具有很好的检测性能。该方法的检测结果与HPLC方法一致,这表明了该检测体系的可靠性。这种核酸适配体FRET检测体系将为实际样品中17β-雌二醇的快速检测提供一种新的可能。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O657.3;TP212

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本文编号：1255514