高效液相色谱法测定A549细胞中的胆固醇水平研究

发布时间：2017-10-17 23:04

  本文关键词：高效液相色谱法测定A549细胞中的胆固醇水平研究

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【摘要】：目的建立检测A549细胞内胆固醇水平的高效液相色谱(HPLC)方法,为以胞内胆固醇相对水平变化作为指标鉴定组织细胞泡沫化程度及特定组织细胞泡沫化对组织损伤提供技术支持。方法用氢氧化钾乙醇溶液和三氯乙酸分别除去细胞裂解液中的三酰甘油和蛋白,用正己烷-异丙醇的混合溶剂提取细胞内的胆固醇。胆固醇水平采用HPLC法测定,色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6mm×150.0mm,5μm),流动相为乙腈-异丙醇(67∶33,V/V),流速为1mL/min,检测波长为206nm。结果细胞内胆固醇在5~100ng/μL内线性关系良好(r=0.999 9);相对标准偏差(RSD)均低于3.0%,平均加样回收率为94.89%,RSD为2.86%(n=6)。结论 HPLC法简便、准确、重复性好,可用于泡沫细胞程度鉴定,为探讨脂质代谢异常与器官损伤及进一步研究胆固醇代谢紊乱与肺损伤奠定基础。
【作者单位】： 重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室/感染性疾病分子生物学教育部重点实验室;重庆医科大学公共卫生与管理学院/医学与社会发展研究中心/健康领域社会风险预测治理协同创新中心;重庆医科大学检验医学院/临床检验诊断学教育部重点实验室;
【关键词】： 高效液相色谱 A细胞 胆固醇
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81071907) 教育部春晖计划合作科研启动项目(Z2012118)
【分类号】：R446.1
【正文快照】： 2.重庆医科大学公共卫生与管理学院/医学与社会发展研究中心/健康领域社会风险预测治理协同创新中心,重庆400016;3.重庆医科大学检验医学院/临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016)胆固醇是细胞、动物组织重要的组成物质,不仅是细胞膜形成的重要原料,而且还参与合成体内

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本文编号：1051540