维拉帕米对腹膜纤维化大鼠腹膜转运功能及腹膜细胞外基质积聚的影响
本文关键词:维拉帕米对腹膜纤维化大鼠腹膜转运功能及腹膜细胞外基质积聚的影响
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【摘要】:目的:观察维拉帕米对高糖腹膜透析液及乳酸红霉素诱导的腹膜纤维化大鼠腹膜转运功能及其腹膜组织细胞外基质(extracellular ma-trix,ECM)的影响。方法:按照随机数字表法,将45只清洁级雄性SD大鼠,分为3组,A组:模型组(15只)采用红霉素+4.25%高糖腹膜透析液诱导腹膜纤维化模型大鼠;B组:干预组(15只)在模型组的基础上给予维拉帕米腹腔注射;C组:对照组(15只)给予注射生理盐水100ml/kg.d;造模5周后进行腹膜平衡试验,并计算超滤(ultra filtration,UF)及葡萄糖转运量(Mass Transfer of Glucose,MTG)。留取壁层腹膜标本进行Masson染色,采用免疫组化法检测壁层腹膜组织基质金属蛋白酶-9(Matrix Metalloproteinase-9 MMP-9)及纤维连接蛋白(Fibronectin FN)表达,RT-PCR、Western-Blot检测转化生长因子-β(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)m RNA及蛋白的表达水平;结果:治疗第5周末,A组及B组腹膜透析腹膜纤维化大鼠UF分别为(-9.85±0.59)mL和(-4.36±0.41)mL,MTG分别为(18.14±1.19)mmol/kg和(14.24±0.67)mmol/kg,腹膜纤维化评分为(2.7±0.1)和(1.7±0.1),MMP-9表达分别为(2.7±0.44)%和(2.0±0.43)%,FN表达分别(2.1±0.32)%和(1.7±0.31)%,B组的TGF-β1mRNA及蛋白表达水平较A组有不同程度的下调,两组间各指标对比,差异均具有统计学意义,P0.05。结论:维拉帕米能减少腹膜纤维化模型大鼠腹膜TGF-β1合成,抑制腹膜细胞外基质积聚,延缓腹膜纤维化的进程。
【关键词】:纤维连接蛋白 转化生长因子β1 腹膜纤维化 维拉帕米
【学位授予单位】:南昌大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R572.2;R459.5
【目录】:
- 摘要3-4
- ABSTRACT4-8
- 中英文缩略词表8-9
- 第1章 前言9-11
- 第2章 材料与方法11-20
- 2.1 材料11-13
- 2.1.1 实验动物11
- 2.1.2 药品及试剂11-12
- 2.1.3 主要仪器及器材12-13
- 2.1.4 主要软件13
- 2.2 实验方法与步骤13-19
- 2.2.1 实验动物的分组与给药13-14
- 2.2.2 腹膜超滤量及腹膜葡萄糖转运量检测14
- 2.2.3 标本取材及处理14
- 2.2.4 病理Masson三色染色14-15
- 2.2.5 免疫组化检测壁层腹膜纤维化评分、FN%及MMP-9%表达比较15-16
- 2.2.6 逆转录 PCR 检测脏层腹膜组织中 TGF-β1 的 m RNA 表达水平16-17
- 2.2.7 WESTERN BLOT(免疫印迹)检测脏层腹膜TGF-β1 蛋白含量17-19
- 2.3 统计学处理19-20
- 第3章 实验结果20-26
- 3.1 各组大鼠腹膜功能的比较20-21
- 3.2 各组大鼠壁层腹膜纤维化评分、FN%及MMP-9%表达比较21-23
- 3.3 各组大鼠脏层腹膜TGF-β1 m RNA相对表达水平比较比较23-24
- 3.4 各组大鼠脏层腹膜TGF-β1 蛋白相对表达水平比较比较24-26
- 第4章 讨论26-28
- 第5章 结论与展望28-29
- 5.1 结论28
- 5.2 展望和不足28-29
- 致谢29-30
- 参考文献30-32
- 攻读学位期间的研究成果32-33
- 综述 TGF—β在肾脏间质纤维化中作用的相关研究33-41
- 参考文献39-41
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,本文编号:1118642
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