基于突变阻滞扩增系统的实时荧光PCR技术检测幽门螺杆菌23S rRNA基因突变及其评价

发布时间：2017-11-20 11:38

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【摘要】：目的探索突变阻滞扩增系统(ARMS)联合实时荧光PCR技术用于检测幽门螺杆菌23S rRNA基因突变的可行性。方法以幽门螺杆菌23S rRNA基因2143位点的两种基因型(野生型为AAA,突变型为AGA)质粒DNA为研究模型,设计ARMS引物同时对实时荧光PCR体系进行优化,对突变阻滞扩增系统联合实时荧光PCR技术的基因分型特异性进行评价。结果在与模板匹配的ARMS引物3'端附近故意引入错配碱基,降低该ARMS引物浓度和镁离子浓度,并采用两步PCR循环的反应程序,使ARMS引物的特异性增强,能够得到清晰的基因分型结果。结论这种基于突变阻滞扩增系统的实时荧光PCR技术,实验设计简便,特异性较好,并有望在此基础上发展成为适合临床应用的突变检测方法。
【作者单位】： 生物芯片上海国家工程研究中心;
【基金】：上海市浦东新区科技发展基金(PKJ2015-S)
【分类号】：R440
【正文快照】： 基因突变是人类各种遗传疾病和恶性肿瘤发生的根本原因,检测与遗传病及肿瘤发生有关的突变基因一直是医学遗传学和肿瘤学研究的热点,它对阐明遗传病和肿瘤发生的分子生物学基础及早期诊断具有重要意义。目前传统的基因检测方法有聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymera

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本文编号：1207033