自感光神经节细胞对腹外侧视前区的突触传递及腹外侧视前区的微环路功能研究

发布时间：2017-12-24 08:11

  本文关键词：自感光神经节细胞对腹外侧视前区的突触传递及腹外侧视前区的微环路功能研究　出处：《安徽医科大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的鉴定腹外侧视前区(ventrolaterol preoptic nucleus, VLPO)神经元的类型,揭示不同类型VLPO神经元昼夜发放的规律；研究自感光神经节细胞(intrinsically photosensitive retinal ganglion cells,ipRGCs)对VLPO投射的突触传递方式；研究VLPO区域内不同类型神经元间的微环路功能连接。方法1.VLPO区域神经元的鉴定及其昼夜发放4-6周龄野生型小鼠新鲜脑片,根据形态、对药物去甲肾上腺素的响应及电特性对VLPO脑区的神经元进行鉴定；膜片钳方式记录VLPO区域的神经元在白天的11：00～16：00以及夜间的22：00～02：00动作电位的发放；采用t检验对神经元动作电位的发放频率进行统计学分析。2.ipRGCs对VLPO的突触传递研究1.2月龄opn4-cre;Rosa-lsl-ChR2-eYFP(Ai32)小鼠新鲜脑片,用470 nm蓝光激发iPRGCs在VLPO区域的突触末梢,电压钳或电流钳模式下记录SCN及VLPO区域神经元的突触后电流或电压；3.VLPO区域内的微环路连接研究4-6周龄Galanin-cre;Rosa-TDT小鼠新鲜脑片,同时分别钳制1个不同类型VLPO区域神经元,即中间神经元与促睡眠神经元,电流钳模式下刺激促睡眠神经元使其产生动作电位,电压钳模式下观察中间神经元的响应。结果1.在VLPO鉴定出两类神经元,一类形态为多极三角形,其阈值有LTS(low-threshold spike)特性的去甲肾上腺素抑制性神经元；一类形态呈两极梭形,其阈值无LTS特性的去甲肾上腺素兴奋性神经元。在记录的59个VLPO神经元中，有LTS特性的神经元有44个,无LTS特性的有15个；t检验分析发现具有LTS特性的去甲肾上腺素抑制神经元白天AP的发放频率明显高与夜间AP的发放频率(P0.01)；无LTS特性的去甲肾上腺素兴奋神经元白天AP的发放频率也明显高于夜晚AP的发放频率(P0.05)；2.在记录的30个VLPO神经元中,对470 nm蓝光刺激有直接响应的神经元数量为2个,根据神经元的电特性及对药物的响应,发现这两个神经元都是促睡眠神经元,并且蓝光激发的iPRGCs突触末梢递质的释放对促睡眠神经元的作用是兴奋性的；3.应用双电极膜片钳方式观察的25对VLPO神经元中,未检测到相互之间有功能连接的神经元。结论1. VLPO脑区存在两类神经元,这两类神经元的白天AP发放频率皆高于夜间AP发放频率,提示两类神经元都参与了昼夜节律的调控；2. ipRGCs与VLPO之间有直接的功能连接,蓝光可能通过直接兴奋VLPO区域的促睡眠神经元参与睡眠与觉醒的调控,为临床光治疗睡眠障碍提供了功能学证据。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R740

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本文编号：1327528