中脑腹侧被盖区低表达硫氧还蛋白-1增强甲基苯丙胺所致的条件性位置偏好

发布时间：2018-01-25 05:04

  本文关键词： 甲基苯丙胺 条件性位置偏好 硫氧还蛋白-1　出处：《昆明理工大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：药物成瘾(Drug addiction)是指反复的使用某种精神类药物以后,从而引发的一种慢性复发性的脑疾病。长期使用这些药物会出现强迫性觅药行为、对药物不可控制的渴求、以及复吸等主要表现,其相关分子机制尚未阐述清楚。甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)是属于新型毒品苯丙胺类兴奋剂(amphetamine type stimulants,ATS),俗称冰毒,纯的 METH 为白色结晶体。具有作用时间持久,起效快等特点。所以近几年来,METH已经逐渐成为了继大麻后第二大广泛滥用的药物。长期滥用METH会产出依赖药物的现象和神经毒性,导致躯体疾病和精神病障碍。甲基苯丙胺被公认为中枢兴奋剂,并且作用于产生奖赏效应的中脑边缘多巴胺系统(mesolimbic dopamine system,MLDS),主要有中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area of the midbrain,VTA)、伏隔核(the nucleus accumbens,NAc)、前额叶皮层(prefrontal cortex,PFC)等脑区。所以,VTA-NAc-PFC神经环路可能与成瘾药物引起奖赏相关的。VTA到NAc和其他前脑区域中多巴胺(dopamine,DA)神经元活性与成瘾药物作用密切相关。当成瘾药物用于机体后使得VTA区中的DA水平升高。NAc作为VTA的投射区,NAc区中的DA的水平也增高,DA增高导致DA受体以及下游的分子改变。cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB),△ FosB 蛋白和细胞周期依赖蛋白激酶 5(Cyclin-depdent kinase 5,CDK5)等都与药物产生的奖赏效应有联系。硫氧还蛋白-1(Thioredoxin-1,Trx-1)是一种氧化还原调节蛋白,普遍存在于所有类型的细胞组织中,是从原核生物到哺乳动物的保守进化的。Trx-1系统是由Trx-1、硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase-1,Trx-1R),和一个电子供体烟酸胺腺嘌呤二核苷磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)组成的。Trx-1生物学功能很多:调节转录因子活性、细胞生长、胚胎生长发育生存等。此外,Trx-1在神经系统中的具有重要作用,包括类神经生长因子作用。METH成瘾能够产生氧化应激,使得氧化还原平衡状态受到破坏。Trx-1是体内重要的抗氧化蛋白,能够调节机体的氧化还原平衡,对于METH引起的氧化应激可以起到抵抗的作用,使机体内环境达到稳定状态。研究发现,过表达Trx-1以后能够调节增加抗炎细胞因子和减少促炎细胞因子,从而抑制甲基苯丙胺诱导脾中的炎症反应。此外,低表达Trx-1能够降低METH诱导增加的p-CREB表达水平,这些研究结果都说明Trx-1是与METH成瘾相关的。我们前期研究表明:在METH诱导小鼠条件性位置偏好(conditioned place preference,CPP)的模型中,高表达Trx-1能够对成瘾具有改善作用,Trx-1能够抵抗METH慢性作用以后引发的CPP的形成。为了进一步研究Trx-1在特定脑区中对METH成瘾的调节分子机制,通过构建METH所致CPP模型,利用核团定位注射技术,在小鼠VTA区双边注射Trx-1特异性干扰RNA,构建VTA区低表达Trx-1小鼠,并比较野生型/阴性对照组和低表达组,METH所致条件位置偏好差异。最后利用蛋白免疫印迹技术(western blotting,WB)检测VTA、NAc脑区中与METH成瘾相关分子Trx-1、多巴胺D1受体(D1 dopamine receptor,D1R)、CREB、△FosB 以及 CDK5 的表达。结果:本课题证实了 VTA区低表达Trx-1后,与野生型/阴性对照组相比,METH诱导的小鼠CPP的作用增强。蛋白质免疫印迹技术表明低表达Trx-1小鼠的VTA区和NAc区结果相同:METH导致Trx-1明显降低,METH作用后D1R、CREB、△FosB以及CDK5的表达增加,而Trx-1低表达进一步增加D1R、CREB、△FosB以及CDK5的表达。总结:VTA区低表达Trx-1增强了 METH引起的CPP相关的信号通路,因此,增强METH诱导的小鼠CPP的作用,Trx-1可能为METH成瘾的治疗新的靶点,本研究为进一步明确METH成瘾机制提供了理论依据。
[Abstract]:Drug addiction is a kind of chronic recurrent brain disease after repeated use of certain psychotropic drugs . Trx - 1 ( Trx - 1 , Trx - 1 , Trx - 1 ) is an important antioxidant protein in mice . The results showed that the low expression of Trx - 1 in the VTA region increased the expression of D1R , CREB , 鈻，

本文编号：1462064