CT灌注对Ilizarov骨搬移术治疗糖尿病足疗效评估研究的动物实验

发布时间：2020-03-17 23:16

【摘要】：目的:探讨CT灌注对Ilizarov骨搬移术治疗糖尿病足疗效的价值,以及初步探究Ilizarov骨搬移术治疗糖尿病足疗效机制及最佳搬移时间。方法:随机将40只新西兰大白兔分为A组、B组、C组。A组为糖尿病足外固定架骨搬移术组,共18只(将18只兔分为3个小组,每组6只);B组4只:糖尿病足不做任何处理组。C组18只:正常缺血足外固定架骨搬移术组(其中又将18只兔分为3个小组,每组6只)。第一步将A组、B组兔进行高脂高糖饲料喂养,随后对其进行血糖检测,以空腹血糖≥7.0mmol/L且出现胰岛素抵抗表现认定为T2DM造模成功。第二步将造模成功的T2DM兔(A组及B组)行手术结扎切除右侧股动脉全长及其所有分支。以临床表现为跛足或肌肉萎缩,且CT灌注值BV手术侧低于健侧,P0.05认定为糖尿病足模型造模成功。C组同时间点行股动脉结扎切除术。第三步将A组和C组行骨搬移术,A组以及C组的3个小组搬移时间分别为2周、4周、6周,B组不行骨搬移术。待搬移结束骨窗初步愈合后拆除固定架。随后所有组行CT灌注扫描。扫描结束后,立即麻醉过量处死,取足底肌肉送病理检查。CT采集的图像通过西门子VPCT Body软件进行后处理得到灌注伪彩图,在足底肌群选取感兴趣区进行灌注参数的测量。自实验开始的第一天,随后每2周早上检测实验组和对照组体重和血糖,每4周早上检测实验组和对照组空腹血糖、胰岛素、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白,并计算胰岛素抵抗指数,直至第16周结束。而在搬移期间每周检测搬移组及对照组(B组)血管内皮生长因子(VEGF),直至搬移过程结束。用Excel数据录入,采用SPSS25.0软件进行统计学分析,该实验的数据均为计量资料。体重、血糖、生化指标、胰岛素抵抗指数及VEGF值:各实验组小组之间数据采用单因素方差分析,实验组与对照组之间采用独立样本t检验(正态分布),非正态分布的资料采用非参数检验。CT灌注测量值及微血管密度:各实验组小组之间数据采用单因素方差分析,术前及搬移术后、实验组与对照组数据采用独立样本t检验(正态分布),非正态分布的资料采用非参数检验。结果:随着实验动物自高脂高糖喂养后,实验组的体重、空腹血糖、胰岛素及高密度脂蛋白略有上升,与对照组无显著性差异,总胆固醇及甘油三酯上升幅度较大,与对照组有显著性差异,低密度脂蛋白自高脂高糖喂养始末其势态始终趋于平稳,与对照组亦无明显差异。至第12周造模成功后实验组与对照组测得空腹血糖、甘油三酯,总胆固醇,高密度脂蛋白均有统计学意义。实验组与对照组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)两者之间有显著性差异。分别为34.29±9.30,5.47±1.92(t=-3.083,p=0.022)。实验组与对照组体重、胰岛素、低密度脂蛋白,两者之间无显著性差异。CT灌注结果显示糖尿病足搬移组与糖尿病足对照组BV值在搬移6周时具有统计学差异。糖尿病足搬移组与糖尿病足对照组在搬移4周及搬移6周时BF值均具有统计学差异。糖尿病足搬移组BV、BF术前与术后搬移6周比较,均有显著性差异,正常缺血足搬移组术前与术后搬移6周比较,BV、BF有显著性差异。糖尿病足搬移组术前与术后搬移6周MTT值比较无显著性差异。正常缺血足搬移组术前与搬移6周PMB比较有显著性差异。HE染色结果为糖尿病足搬移组三个搬移时间点足部微血管密度整体存在显著性差异(F=7.427,0.012)。糖尿病足搬移组在6周微血管密度明显高于搬移2周与搬移4周,6周与2周、6周与4周相比较,差异有统计学意义。糖尿病足搬移组与糖尿病足对照组在6周时间点微血管密度相比较,两者具有显著性差异(T=3.154,P=0.003)。糖尿病足搬移组微血管密度术前与术后搬移6W相比较,两者有显著性差异(T=-2.906,P=0.044)。实验组血管内皮因子自搬移开始后便快速升高。搬移过程中,VEGF一直维持在一个较高的水平,平均值为190.85pg/ml,而对照组(B组)一直维持在相对一个低的水平,平均值为117.82 pg/ml。第2周与第6周搬移组与对照组比较,VEGF差异均有统计学意义(P0.05)。结论:1.本实验证实以高脂高糖饲料联合注射低剂量四氧嘧啶可成功建立T2DM兔模型,而在此基础上行股动脉结扎剔除术可建立模拟糖尿病足长期慢性缺血的动物模型。2.本实验发现骨搬移术后较术前血流量、血容量、毛细血管通透性均升高,平均通过时间未见明显变化。骨搬移6周血流量、血容量与骨搬移2周、4周相比较,未见明显变化。3.本实验发现骨搬移可促进足底肌群微血管增多。4.本实验证实骨搬移可刺激机体产生VEGF,并在搬移过程中呈持续高表达状态。
【图文】：

外固定支架,骨针

27图 1-1 外固定支架手术安置图。A 为术前备皮消毒；B 为拧入骨针；C 为安置外固定支架；D 为肤缝合。Figure 1-1 The images of external fixation bracket surgical installation .Abelong to preoperative skindisinfection;B belong to screw into the bone needles；C belong to installing external fixing bracket;Dbelong to skin suture.

折线图,体重,折线图,糖尿病足

对 Ilizarov 骨搬移术治疗糖尿病足疗效评估研究的动物实验 2019 届硕士学组在第 10 周体重开始下降，，但下降幅度较小。而对照组以基础饲重呈缓慢上升趋势，但上升的幅度较实验组为轻。（见图 2-1）
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R587.2;R816

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