通过体外细胞培养观察血液透析对内皮细胞功能的变化及其可能机制

发布时间：2020-04-13 16:50

【摘要】：【目的】本研究通过体外培养不同环境下的内皮细胞,观察单次血液透析对内皮细胞功能的变化,研究不同因素与内皮细胞生长的关系及其可能存在的机制。【方法】1.收集2018年6月至2018年11月在广西医科大学第一附属医院体检部随机挑选40例健康体检者和在广西医科大学第一附属医院血液净化中心进行维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)的77例患者的血清干预内皮细胞,检验其增殖能力和迁移能力,同时检测两组血清尿素肌酐(creatinie,Cr)、β2-微球蛋白(β2-MGicroglobulin,β2-MG)含量,用酶联免疫吸附法(Elisa)检测白介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量;2.用不同浓度的肌酐、β2-MG、IL-6、IS培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),检测其增殖活性和迁移距离;3.用肌酐、β2-MG、IL-6和IS组处理24小时后,使其正常化,继续培养24h和48h后,检测各组细胞的增殖活性,推测其是否建立尿毒症毒素记忆;4.用MHD患者做单次血液透析(HD)治疗前后的血清干预内皮细胞,检测其增殖能力和迁移能力,同时检测两组血清的肌酐、β2-微球蛋白和IL-6;5.分析肌酐、β2-MG、IL-6和内皮细胞增殖功能的相关性,并计算出线性回归方程。【结果】1.CKD患者的细胞增殖能力均高于健康组,CKD患者HD前的细胞增殖能力均高于治疗后的细胞增殖能力,差异有显著性(P0.05);2.健康组与MHD患者的肌酐、β2-MG和IS的差异有统计学意义(P0.05),MHD患者透析前肌酐和β2-MG水平显著高于透析治疗后水平,IL-6水平透析治疗后水平较透析治疗前低,其差异有统计学意义(P0.05);3.随着肌酐和IS浓度的增加,肌酐、β2-MG和IS分别对内皮细胞增殖的抑制作用也逐步增加(P0.05),但是IL-6对内皮细胞的增殖有促进作用,其促进作用随浓度的增加而增加(P0.05);4.肌酐、β2-MG和IS抑制内皮细胞的愈合能力,且其作用随浓度的增加而增加;IL-6促进内皮细胞愈合能力,且其作用随浓度的增加而增加;5.与对照组相比,撤去干预条件后,肌酐、β2-MG和IS的增殖抑制率随着时间的增加而逐渐减小,同时IL-6促进增殖率也随着时间的增加而逐渐减小;6.Pearson相关分析显示细胞OD值与肌酐(r=0.640,P0.01)、β2-MG(r=0.633,P0.01)呈正相关,与IL-6呈负相关(r=-0.540,P0.01),并得出线性回归方程为y=0.000039a+0.002b-0.001c。【结论】肌酐、β2-MG和IS抑制内皮细胞的增殖和迁移,IL-6促进内皮细胞和迁移;血液透析通过改变尿毒症毒素(肌酐、β2-MG和IL-6)浓度,改变对内皮细胞的影响。
【图文】：

图 1.1 不同时间两组内皮细胞的吸光度值（450nm）Fig1.1 The optical densitometry of two groups in HUVEC at different times3 细胞迁移能力的检测为了研究尿毒症毒素对迁移的影响，我们将 HUVEC 与健康的血清一起孵育，，发现 MHD 患者培养的内皮细胞迁移距(P<0.05)。其结果表明：暴露于 MHD 患者血清中的内皮损暴露于健康组血清的细胞。

不同时间两组内皮细胞的吸光度值（450nm）he optical densitometry of two groups in HUVEC at different times迁移能力的检测究尿毒症毒素对迁移的影响，我们将 HUVEC 与健康组和 一起孵育，发现 MHD 患者培养的内皮细胞迁移距离低于5)。其结果表明：暴露于 MHD 患者血清中的内皮损伤修复健康组血清的细胞。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R692.5

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本文编号：2626205