姜黄素对人胃上皮细胞GES-1放射性损伤的保护作用及其机制研究

发布时间：2020-04-25 15:54

【摘要】：目的:研究姜黄素对人胃上皮细胞GES-1的放射性损伤的影响,并对其抗氧化损伤及抗细胞凋亡途径的机制进行探索,为胃的放射性损伤的治疗提供新的可能治疗思路。方法:实验分为空白对照组、姜黄素组、辐照模型组、辐照+姜黄素组。采用MTT法对辐照组的GES-1细胞活力进行实验分析,X线辐照剂量选用1、2、4、8 Gy,辐照后观察时间限定为6、12、24、48 h,选出细胞活力变化明显的一组辐照剂量及辐照后观察时间为辐照模型组的处理因素和观察时间;通过MTT法检测2、4、8、16μM浓度的姜黄素单纯处理是否对GES-1细胞的活力产生影响;采用MTT法检测上述不同浓度的姜黄素对放射性损伤的GES-1细胞是否具有保护作用;利用DCF法检测上述不同浓度姜黄素处理后的放射性损伤的GES-1细胞的ROS升高率变化;通过MDA-TBA法检测上述不同浓度姜黄素处理后的放射性损伤的GES-1细胞的MDA浓度变化;利用Western Blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3在不同浓度姜黄素处理后的放射性损伤的GES-1细胞中的表达情况。结果:1.GES-1细胞活力呈X线放射剂量依赖性下降,在4 Gy X线剂量辐照后24 h其细胞活力开始显著下降(P0.05);在2、4、8、16μM浓度的姜黄素单纯处理下,GES-1细胞活力不受影响;随着姜黄素的浓度上升,放射性损伤GES-1细胞模型的细胞活力呈浓度依赖性上升,并当姜黄素浓度为4μM时,其细胞活力与辐照模型组比较上升显著(P0.05),但均未回复到空白对照组水平。2.姜黄素处理下的辐照模型GES-1细胞内的ROS上升率呈药物浓度依赖性下降趋势,浓度为2、4μM的姜黄素处理下的放射性损伤GES-1细胞模型的ROS上升率变化与辐照模型组无统计学差异(P0.05),当姜黄素浓度增至8μM时,其ROS上升率开始与辐照模型组有统计学差异(P0.05)。3.X线辐照+姜黄素组GES-1细胞内的MDA含量均低于辐照模型组,且与之比较均具有统计学意义(P0.05),且当姜黄素浓度为16μM时,其MDA含量接近空白对照组水平,相比较无统计学差异(P0.05)。4.X线辐射损伤的GES-1细胞Bcl-2蛋白含量呈姜黄素浓度依赖性上升,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白含量呈浓度依赖性下降,但均未回复到空白对照组水平。结论:姜黄素可通过抗氧化损伤及抗凋亡途径发挥其对GES-1细胞的放射性损伤保护作用,部分机制为降低其ROS及MDA含量,并上调Bcl-2,下调Bax、Cleaved Caspase-3凋亡相关蛋白水平。
【图文】：

细胞活力,姜黄素,观察时间,辐照剂量

GES-1 细胞在不同 X 线辐照剂量和不同辐照后观察时间下的细胞活力（%注：*表示与对照组比较 P <0.05，**表示与对照组比较 P <0.01姜黄素对 GES-1 细胞活力的影响有众多实验研究报道姜黄素对人体细胞无明显负面作用，，但对 G关研究较少。为了确定单独姜黄素处理是否会影响实验结果，同，选用姜黄素浓度为 2、4、8、16μM，培养时间为 24h。表 3.2 姜黄素各浓度处理组细胞活力与对照组均无显著性差异，可认为在黄素不影响 GES-1 细胞的生长。GES-1 细胞在不同姜黄素浓度下培养 24h 后的细胞活力（%）变化（n=5，分组细胞活力（%）Control 100 ± 0.0Cur 2 μM 99.8 ± 0.85

细胞活力,姜黄素,细胞,浓度

GES-1 细胞在不同姜黄素浓度下培养 24h 后的细胞活力（对 X 线辐照后 GES-1 细胞的活力的影响图 3.3 显示，经 4GyX 线辐照后培养 24h，GES-1 细
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R730.55

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