微小RNA-21对脓毒症MMP-2和MMP-9表达的调控及分子机制研究

发布时间：2020-06-12 01:39

【摘要】：第一部分miR-21、MMP-2和MMP-9在脓毒症患者血浆中的表达水平及相关性分析目的:探讨微小RNA-21(micro RNA-21,miR-21)、基质金属蛋白酶-2(metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9在脓毒症患者血浆中的表达水平及相关性分析,为探索脓毒症诊疗新靶点提供理论和实验依据。方法:通过在GEO数据库中检索脓毒症相关数据集,根据是否有统计学意义(P0.05)及差异倍数(2),分析筛选差异表达mi RNA。选取脓毒症患者(脓毒症组)及健康志愿者(健康对照组)各40例作为研究对象,采用实时荧光定量PCR法和ELISA法检测miR-21和MMP-2、MMP-9在脓毒症组与健康对照组中的表达水平,并运用Pearson分析脓毒症患者血浆中miR-21和MMP-2、MMP-9的相关性。结果:最终入选的数据集为GSE94717,符合条件的差异表达mi RNA为miR-21(P0.05)。脓毒症组患者血浆miR-21、MMP-2和MMP-9表达水平较健康对照组升高,且两者呈正相关(r=0.464,P0.05;r=0.538,P0.05)。结论:脓毒症患者血浆中miR-21与MMP-2、MMP-9蛋白高表达,且呈正相关,可能存在调控关系。第二部分miR-21对脂多糖诱导下RAW264.7细胞MMP-2和MMP-9表达的调控及机制目的:探讨miR-21对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激下RAW264.7细胞中MMP-2和MMP-9表达的调控及机制,进一步研究miR-21在脓毒症中的作用及机制。方法:对RAW264.7细胞给予10mg/ml LPS刺激,24h后采用实时荧光定量PCR法和ELISA法检测miR-21和MMP-2、MMP-9在LPS组与对照组中的表达水平,并运用Pearson分析miR-21和MMP-2、MMP-9的相关性。构建外源性miR-21干扰的LPS刺激下RAW264.7细胞模型,采用Western blot检测miR-21对MMP-2、MMP-9和TIMP-3蛋白表达影响。结果:LPS组miR-21、MMP-2和MMP-9表达水平较对照组上升,两者呈正相关(P0.05)。通过miR-21模拟物(miR-21 mimic)外源性上调miR-21表达,MMP-2、MMP-9表达升高,TIMP-3表达降低(P0.05);通过miR-21抑制剂(miR-21 inhibitor)抑制miR-21表达,MMP-2、MMP-9表达降低,TIMP-3表达升高(P0.05)。结论:miR-21能促进RAW264.7细胞MMP-2和MMP-9表达,其机制可能与靶向抑制TIMP-3有关。
【图文】：

脓毒症,相关性分析

组别 miR-21（２－△△Ｃｔ）MMP-2 MMP-对照组 1.00±0.00 72.84±11.04 167.34±1毒症组 1.83±0.31* 109.69±28.82* 384.60±61康对照组相比，* P＜0. 05 ，#P＜0. 01症组患者血浆 MMP-2 和 MMP-9 蛋白表达升高组患者血浆，用 ELISA 方法检测各组 MMP-2 和 MMP-9 的表达水平毒症组患者血浆中 MMP-2 和 MMP-9 表达较健康对照组表达升高，差（P<0.05），见表 2.2。症患者血浆 miR-21 与 MMP-2、MMP-9 水平的关系son 相关分析结果显示脓毒症组患者血浆中 miR-21 表达水平与 M平呈正相关（r=0.464，P<0.05; r=0.538，P<0.05）。

脓毒症,相关性分析

图 2-2 脓毒症组 miR-21 与 MMP-9 表达相关性分析Figure2-1 Correlation analysis between miR-21 and MMP-9 expression in sepsis gr症是机体对感染引起的全身炎症反应综合症，其发病率高，病死率高病房的主要问题之一，，而通过早期诊断、有效干预治疗能降低脓毒症寻找能早期诊疗脓毒症的标志物和治疗靶标。本部分研究通过探讨 MMP-2 和 MMP-9 的表达水平，并进一步探索 miR-21 与 MMP-2系，寻找脓毒症新的诊断标志物和治疗靶标。症组患者血浆 miR-21 表达升高反应失衡是脓毒症的中心环节。miRNA 是一类非编码单链小分子 R 3’端结合抑制靶基因表达，在转录后水平负向调控基因表达，参与调
【学位授予单位】：右江民族医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R459.7

【参考文献】