CXCL12和CXCR4基因多态性与冠心病以及冠状动脉狭窄程度相关性研究

发布时间：2020-07-12 16:12

【摘要】：目的 探究甘肃省兰州市汉族人群CXC型趋化因子配体12(chemokine CXC motif ligand 12,CXCL12)及其受体趋化因子受体4(CXC chemokine receptor4,CXCR4)基因多态性与冠心病发病风险以及冠状动脉狭窄程度的相关性。方法 入选2017年11月至2018年6月在兰州大学第二医院住院治疗的302例无血缘关系的CAD患者作为病例组,并以同期年龄、性别与病例组相匹配的302名的体检者作为健康对照组。应用竞争性等位基因特异性PCR法(Kompetitive Allele Specific PCR,KASP)完成所有选定的易感基因SNPs分型,并以Sanger测序对分型结果进行验证;根据临床冠状动脉造影结果采用Gensini评分对患者冠状动脉的狭窄程度进行评价。数据统计处理使用SPSS进行卡方检验分析CAD组以及对照组等位基因以及基因型频率之间的差异,二元Logistic回归分析和多因素线性回归分析分析不同遗传模型下基因多态性与冠心病发病风险以及冠状动脉狭窄程度之间的相关性。另外,采用SHEsis在线软件以及haploview软件计算Hardy-Weinberg遗传平衡,分析连锁不平衡和构建单倍型。结果 (1)对符合Hardy-Weinberg遗传平衡检测的4个SNP(rs2297630 GA、rs2322864 TC、rs266085CT和rs266087 GA)进行卡方统计分析,4个位点在CAD组与对照组间基因型频率以及等位基因频率比较差异均具有统计学意义(P均0.05)。(2)在三种遗传模型下,对两组间符合HW平衡的位点进行发病风险回归分析。在多因素logistics回归分析中发现,位点rs2297630除了在共显性模型中AG基因型与冠心病的发病风险无关(P=0.180),其余遗传模型均与冠心病的发病正相关,是CAD发病的危险因素(P均0.05)。(A vs G:O R=2.32,95%CI=1.62-3.31;P0.01),携带AA基因型与携带GG基因型相比会显著增加CAD的发病风险(AA vs GG:OR=10.21,95%CI=3.98-26.20;P0.01)。在调整性别、年龄、高血压、糖尿病、吸烟史、GLU、TG、TC、HDL、L DL多种传统风险因素对关联性分析的影响前后,CXCR4上多态性位点rs2322864均与CAD的发病风险显著相关(C vs T:OR=1.66,95%CI=1.20-2.30;P=0.002),携带CT基因型与携带TT基因型相比会显著增加CAD的发病风险(CT vs TT:OR=2.03,95%CI=1.35-3.06;P=0.001)位于CXCL12基因上的多态性位点r s266085和rs266087在单因素和多因素回归分析控制其他风险因素影响前后均与CAD的发病风险显著负相关(T vs C:OR=0.71,95%CI=0.55-0.94;P=0.015、A vs G:OR=0.72,95%CI=0.55-0.94;P=0.016),是CAD的保护因素。(3)通过秩和检验分析研究对象多态性位点不同基因型之间Gensini评分的差异;结果显示,位点rs2297630纯合突变型AA与野生型GG以及杂合突变型AG之间Gensini评分均值存在显著性差异(P均0.05),AG基因型与GG基因型之间Gensini评分无显著性差异(P=0.85)。位点rs2322864各基因型之间Gensini评分不存在显著性差异(P=0.93)位点rs266085野生纯合型CC与突变杂合型TC之间Gen sini评分差异具有统计学意义(P=0.03),总体组间差异不具有统计学意义(P=0.085);位点rs266087总体不同基因型组间Gensini评分差异具有统计学意义(P=0.036),野生纯合型GG与突变杂合型AG之间Gensini评分具有显著性差异(P=0.011),其余基因型之间Gensini评分不具有统计学差异(P均0.05)。(4)在探究SNP位点rs2297630与冠状动脉狭窄程度的相关性分析中,单因素线性回归分析发现A等位基因与冠状动脉狭窄程度正相关(β=0.10,95%CI=0.02-0.17;P=0.012);纯合突变AA基因型与野生型GG相比,冠状动脉狭窄程度增加(β=0.16,95%CI=0.04-0.23;P=0.006),同时在隐性模型中,也与冠脉狭窄程度正相关。在校正了包括性别、年龄、高血压、糖尿病、吸烟、GLU、TG、TC、HDL、LDL、病变支数等混杂因素后,A等位基因仍与冠状动脉狭窄程度正相关(β=0.07,95%CI=0.001-0.13;P=0.048);同时,携带AA基因型(β=0.12,95%CI=0.01-0.18;P=0.024)的CAD患者和隐性遗传模型(AA vs AG+GG:β=0.12,95%CI=0.02-0.18;P=0.020)与冠状动脉的狭窄程度显著正相关。其余多态性位点rs2322864、rs266085和rs266087均与冠脉狭窄程度无关(P均0.05)。(5)连锁不平衡分析显示CXCL12上多态性位点rs266087与rs266085能够构建单倍型(D’=0.745,r2=0.529,P0.05);rs2297630与rs266085、rs266087均不能构成有效单倍型(D’=0.482,r2=0.056;D’=0.321,r2=0.023,P均0.05);单倍型分析结果显示,rs266087和rs266085位点单倍型GT、GC和AC在病例组和对照组间存在统计学差异(P均0.05)。单倍型AC和GT均与冠心病发病风险负相关,是冠心病的保护因素(OR均1,P均0.05);而GC单倍型与冠心病发病风险正相关,是冠心病的危险因素(OR1,P0.05)。结论 (1)甘肃兰州汉族人群中CXCL12基因多态性位点rs2297630、rs266085和rs266087与冠心病的发病风险显著相关。其中位点rs2297630携带AA基因型的人群冠状动脉狭窄程度增高,其余多态性位点与冠状动脉粥样硬化狭窄程度无相关性。(2)甘肃兰州汉族人群中CXCR4基因多态性位点rs2322864与冠心病的发病风险显著相关,但与冠状动脉粥样硬化狭窄程度无相关性。(3)CXCL12多态性位点rs266087、rs266085构建的单倍型与冠心病的发病风险相关。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R541.4;R440
【图文】：

兰州大学硕士研究生学位论文 CXCL12和CXCR4基因多态性与冠心病以及冠状动脉狭窄程度相关性研究2.3.1 标本收集和保存收集实验对象空腹8 h后的外周静脉血3ml（乙二胺四乙酸二钾抗凝），并进行分组，CAD组和对照组分别编号为 H-流水号 、 C-流水号 ,置于-40℃冰箱内保存待用。2.3.2 基因组 DNA 提取2.3 方法

high-density lipoprotein cholesterol; LDL-C: low-density lipoprotein cholesterol.3.2 SNP 位点分型的基本情况利用如图2所示经电泳显示成功提取的完整基因组DNA进行 KASP分型后，根据图 3 荧光散点读取结果按照如下确定基因的具体基因型：聚集在接近 X 轴的荧光散点所代表的样本的基因型为突变纯合基因型，聚集在接近 Y 轴荧光散点所代表的样本为野生纯合基因型，在中间聚集的荧光散点所代表的样本基因型为两种等位基因的杂合型；如有显示黑色的样本，可能由于 DNA 浓度过低，扩增产物未被明确分型产生。此外，如图 4 显示，经随机抽样测序验证，4 个 SNP的 KASP 基因分型结果与测序结果完全一致。

图 3 分型荧光散点图聚集在接近 X 轴的荧光散点所代表的样本的基因型为突变纯合基因型；聚集在接近 Y轴荧光散点所代表的样本为野生纯合基因型；在中间聚集的荧光散点所代表的样本基因型为两种等位基因的杂合型。

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 许维雪;孙达欣;张小薄;刘臻;;甲状腺乳头状癌中CXCL12的表达及意义[J];现代肿瘤医学;2012年09期

2 迟啸威;侯静波;于波;;CXCL12过表达促进骨髓基质干细胞整合素α_V/β_3介导的黏附和增殖[J];中国生物工程杂志;2008年07期

3 王璐;张斌;于涛;;趋化因子CXCL12及其受体在涎腺腺样囊性癌组织中表达的意义[J];医学信息(中旬刊);2010年06期

4 苏英花;郑梅玲;化爱玲;张月莲;张桂林;贺江梅;;CXCL12与不明原因复发性流产的相关性研究[J];中国优生优育;2012年05期

5 金笛;何丽;张海锋;;内质网应激相关蛋白与CXCL12蛋白在特发性肺纤维化中的表达及意义[J];重庆医学;2016年29期

6 吴松;项炜;朱滨;;血清CXCL12水平用于预测严重感染性休克患者死亡率的可能性[J];人人健康;2016年16期

7 李邦银;蒋涛;阴洪;余淼;邢辉;任先军;;CXCL12对少突胶质前体细胞分化的影响及其机制初步研究[J];中国矫形外科杂志;2018年22期

8 李莎;曹晓雨;范卫明;刘庆新;周晓生;陈金波;;急性高血压脑出血患者血浆CXCL12水平与脑水肿的相关性研究[J];国际神经病学神经外科学杂志;2017年03期

9 鲁向明,王仲,袁宏银;乳腺癌患者血浆CXCL12水平的检测及临床意义[J];肿瘤防治研究;2005年09期

10 朱妍;王溪唯;陈启洪;朴花子;;白藜芦醇对CXCL12诱导的人脐静脉内皮细胞株细胞增殖及血管生成的影响[J];延边大学医学学报;2017年01期

相关会议论文 前10条

1 赵秀英;王文静;姚瑶;朱东;;趋化因子CXCL12β在原发性肝细胞癌、肝硬化和肝纤维化患者肝组织及血清中的表达研究[A];第6届全国疑难及重症肝病大会论文集[C];2011年

2 刘国岩;徐展望;徐琬梨;;骨碎补提取物对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化及CXCL12表达的影响及意义[A];第四届全国中医药博士生优秀论文专辑[C];2013年

3 徐婷;张晓龙;刘翠翠;信文君;;抗微管蛋白化疗药物通过上调CXCL12介导神经病理性疼痛的表观遗传学机制研究[A];中华医学会疼痛学分会第十二届学术年会论文集[C];2016年

4 邹丽;钟少平;王轶瑛;赵云;;CXCL12、VEGF在先兆子痫中的表达[A];中华医学会第五次全国围产医学学术会议论文汇编[C];2005年

5 王莉;董劏;鹿洪亭;江布先;姜忠;郝希伟;;CXCL12及其受体拮抗剂AMD3100对神经母细胞瘤迁移和侵袭能力的影响[A];中华医学会第八次全国小儿外科学术会论文集[C];2010年

6 魏梅;梁立治;张吕卿;熊樱;张颖;李锦清;;宫颈腺癌细胞CXCR4／CXCL12过表达与淋巴结转移和慢性炎症的关系[A];中华医学会第九次全国妇科肿瘤学术会议论文汇编[C];2006年

7 路伟;;趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在人脑星形胶质细胞瘤中的表达及意义[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年

8 毛伟峰;;CXCL12对大鼠创伤性脑损伤后损伤区周围脑组织中神经元凋亡的影响[A];中国解剖学会2012年年会论文文摘汇编[C];2012年

9 张博为;李梦涛;王迁;徐东;侯勇;胡朝军;宋宁;曾小峰;;CXCL12可作为系统性硬化症合并肺间质病变的血清标记物:来自中国EUSTAR数据库的分析[A];第17次全国风湿病学学术会议论文集[C];2012年

10 胡兵;吴建华;方颖;;趋化因子CXCL12诱导的Jurkat细胞钙响应的力学调控机制[A];第十二届全国生物力学学术会议暨第十四届全国生物流变学学术会议会议论文摘要汇编[C];2018年

相关博士学位论文 前9条

1 毛伟峰;CXCL12在大鼠创伤性脑损伤后所起作用的研究[D];苏州大学;2013年

2 吴海建;CHRN、CXCL12和TERT-CLPTM1L基因多态性与胃癌患病风险和淋巴结转移的关联研究[D];山东大学;2016年

3 张钰;复发性流产的病因分析及其与趋化因子CXCL12、CCL2、RANTES表达异常的研究[D];天津医科大学;2010年

4 张雷;过表达CXCL12促进人牙周膜干细胞成血管相关因子表达的体内外实验研究[D];山东大学;2017年

5 郭清;CXCL12-CXCR4生物轴与卵巢上皮性癌腹腔转移关系的研究[D];河北医科大学;2009年

6 李娟;单核细胞趋化蛋白-1、基质细胞衍生因子-1在子宫腺肌病中的表达及意义[D];山东大学;2012年

7 李潇瑾;人工设计的CXCR4靶向肽应用于AML治疗的基础研究[D];北京协和医学院;2015年

8 傅志超;宫颈癌放疗前后干性相关基因差异表达及意义[D];第二军医大学;2015年

9 谢咏秋;TSA在脑缺血再灌注损伤中的脑保护机制[D];中南大学;2011年

相关硕士学位论文 前10条

1 王安奇;CXCL12和CXCR4基因多态性与冠心病以及冠状动脉狭窄程度相关性研究[D];兰州大学;2019年

2 李莎;急性高血压脑出血患者血浆CXCL12水平与脑水肿的相关性研究[D];滨州医学院;2017年

3 杨莹;CXCL12基因多态性与大动脉粥样硬化型脑梗死的关系[D];青岛大学;2018年

4 苏英花;趋化因子12（CXCL12）与不明原因复发性流产的相关性研究[D];山西医科大学;2013年

5 李邦银;CXCL12对少突胶质前体细胞的促增殖作用及其机制研究[D];第三军医大学;2016年

6 喻亚群;CXCL12及受体CXCR4在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义[D];中南大学;2009年

7 陈叶青;趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在原发性干燥综合征患者外周血及其T淋巴细胞中的表达[D];河北医科大学;2014年

8 辛明明;趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在膀胱肿瘤组织中的表达及意义[D];昆明医科大学;2012年

9 谈宜傲;CXCL12和CXCR4在肾透明细胞癌及转移淋巴结中的表达[D];安徽医科大学;2011年

10 胡守森;趋化因子CXCL12及受体CXCR4在喉鳞癌中的表达及意义[D];郑州大学;2010年

本文编号：2752200