滋养血管在维持性血液透析患者自体动静脉内瘘狭窄部位表达的研究

发布时间：2020-07-16 09:38

【摘要】：目的:自体动静脉内瘘(arteriovenous fistula,AVF)作为透析患者的血管通路已有50余年的历史。它具有低感染率和其他并发症低发的优势,是维持性血液透析患者首选的血管通路。但是,AVF的1年通畅率约为60%。AVF的失功严重影响了血液透析患者的透析质量,同时也是维持性血液透析患者首要的住院原因。内膜增生导致的非血栓性管腔狭窄是动静脉内瘘失功的主要原因。AVF内膜增生的病理特点是炎性细胞的浸润、平滑肌细胞的迁移、细胞外基质的积聚。目前的研究认为炎症反应、毒素聚集、缺氧和血管剪切力的改变是动静脉内瘘内膜增生的基本病理机制。其中缺氧诱导的病理反应是血管重塑的重要机制。由于内膜的增厚会增加营养物质弥散的距离,加上增生细胞导致代谢所需能量的增,内膜的增生必然会引起管壁中氧气和营养物质的缺乏。缺氧状态通常会引起组织中血管的新生。关于冠状动脉粥样硬化的研究中发现血管内膜的增生及斑块的形成均伴有血管壁滋养血管的增生,这些增生的滋养血管可以为增厚的管壁提供氧气及营养物质。目前的研究认为滋养血管参与了动脉粥样硬化的病理过程。内膜增生是动静脉内瘘狭窄和动脉粥样硬化疾病的共同病理特点。这提示滋养血管也可能参与了人体动静脉内瘘内膜增生的形成过程。本实验的目的为通过观察滋养血管在人体狭窄动静脉内瘘中的表达情况,探索滋养血管在动静脉内瘘内膜增生中的作用,为动静脉内瘘狭窄的治疗提供理论依据。方法:1.试验分为试验组、对照组A(自身对照组)和对照组B。试验组标本:透析患者行AVF重建术时所取得的管腔明显狭窄的废弃静脉段,10例。对照组A标本:实验组患者行AVF重建术时根据手术需要取得的废弃的邻近狭窄部位且无明显狭窄的静脉组织片段,10例。对照组B标本:初次行AVF成形术时结扎较粗的头静脉分支时所取得的废弃静脉段,10例。2.数据收集:各组标本分别进行HE染色观察血管管壁的结构形态学变化,应用Image profession plus6.0图像处理软件对内膜增生情况进行评估。应用血管性血友病因子(Von Willebrand factor,vWF)免疫组织化学染色技术显示管壁中的微血管(滋养血管),对血管壁中的微血管进行定量分析,以微血管密度(Microvascular density,MVD)评估所观察区域滋养血管的增生程度。应用血管内皮生长因子-A(Vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)免疫组织化学染色技术观察各组标本中VEGF-A的表达情况。3.统计方法:实验中收集的数据均采用均数±标准差(x?s)表示,应用t检验比较组间数据的差异,应用SPSS 23.0统计学软件进行数据分析,P0.05认为差异具有统计学意义。结果:1.HE染色光学显微镜下观察试验组中的静脉内膜存在明显的增厚,呈不均匀增厚,有炎性细胞浸润。对照组A的内膜呈均匀、轻度增厚,对照组B的静脉内膜未见明显增生,无炎细胞浸润。对实验组及两对照组的内膜/中膜厚度比进行测量、比较,发现实验组的内膜/中膜厚度比明显高于对照组A和对照组B,且对照组A明显高于对照组B,差异均具有统计学意义(2.683±0.356 vs.0.686±0.059,P0.01;2.683±0.356 vs.0.123±0.024;P0.01;0.686±0.059 vs.0.123±0.024,P0.01)。2.vWF免疫组织化学染色高倍光学显微镜下观察vWF染色,着色部位位于血管内皮细胞的胞浆中,阳性染色部位主要位于血管外膜,沿微血管的管腔分布。在400x高倍镜下观察三组血管外膜视野中微血管的数量,计算微血管的密度。结果显示试验组中血管壁外膜的MVD明显高于对照组A和对照组B,对照组A与对照组B相比无明显差异(15.923±4.924 vs.6.879±1.821,P0.01;15.923±4.924 vs.4.586±1.611,P0.01;6.879±1.821 vs.4.586±1.611,P0.05)。3.VEGF-A免疫组织化学染色VEGF-A表达主要位于细胞的胞浆中,管壁各层均可见阳性细胞表达。在试验组中VEGF-A的表达呈强阳性,在对照组A及对照组B中VEGF-A的表达呈弱阳性。结果显示实验组VEGF-A的表达水平明显高于对照组A和对照组B,两对照组间比较无明显差异(0.119±0.438 vs.0.049±0.176,P0.01;0.119±0.438 vs.0.039±0.011,P0.01;0.049±0.176 vs.0.039±0.011,P0.05)。4.相关性分析Pearson相关性分析结果显示在狭窄的AVF中血管外膜的微血管密度与内膜/中膜的厚度比呈极强相关性(r=0.830,P0.01),同时VEGF-A表达与血管外膜滋养血管的表达呈强相关性(r=0.768,P0.01)。结论:1.滋养血管在自体动静脉内瘘狭窄部位血管外膜的表达增多。2.VEGF-A在自体动静脉内瘘狭窄部位组织中存在高表达,且其可能与滋养血管的增生相关。3.滋养血管可能与自体动静脉内瘘非血栓性管腔狭窄的形成相关。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R459.5
【图文】：

实验组-HE染色（100X）

对照组A-HE染色（100X）

图 1.3 对照组 B-HE 染色（100X）Fig.1.3 HE staining in control group B (100X)平滑肌细胞炎性细胞空泡变性

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本文编号：2757836