局部冷、热处理对大鼠压疮相关凋亡蛋白及炎性因子的影响

发布时间：2020-07-17 08:26

【摘要】：目的探讨局部冷、热处理对大鼠压疮相关凋亡蛋白及炎性因子的影响,为临床防治和护理压疮时对冷、热疗法的选择提供依据。方法将40只SPF级成年雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、热处理组(Heating组)和冷处理组(Cooling组)。用缺血-再灌注(IRI)法建立大鼠早期压疮模型,对Cooling组和Heating组大鼠分别进行冷、热温度处理。实验终点取局部受压肌肉组织,通过HE染色法观察肌肉组织病理变化;透射电镜检测肌肉组织超微结构改变;免疫组化检测肌肉组织中凋亡标志因子Bax、Bcl-2的表达水平;免疫荧光检测肌肉组织中炎性因子TNF-α和IL-6的表达水平;Western blot检测肌肉组织中Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、Cyt-c、TNF-α和IL-6的表达情况;TUNEL法检测肌肉组织的细胞凋亡情况;线粒体肿胀实验评估各组肌肉组织中mPTP的开放程度。结果1大鼠肌肉组织的病理变化显示,Sham组肌纤维形态正常,排列紧密,无明显炎性细胞浸润;Model组肌纤维出现病理损伤,表现为排列紊乱,部分出现明显的断裂、溶解,间隙增宽,出现明显的炎性细胞浸润;Heating组与Model组相比损伤程度加重,Cooling组与Model组相比损伤减轻。2大鼠肌肉组织超微结构变化显示,Sham组肌丝排列致密,肌节完整,线粒体形态正常;Model组肌丝排列紊乱,肌节挛缩,线粒体肥大变形,扩张明显;Heating组与Model组相比损伤程度加重,Cooling组与Model组相比损伤减轻。3免疫组化与Western blot对大鼠肌肉组织中线粒体凋亡通路相关蛋白的检测结果显示,与Sham组相比,Model组肌肉组织中Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达均显著增加,Cyt-c从线粒体大量释放到胞浆中(P0.05);Heating组与Model组相比,Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达均进一步上升,Cyt-c从线粒体到胞浆的释放量增加(P0.05);Cooling组与Model组相比,Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达均有所减少,Cyt-c从线粒体到胞浆中释放量减少(P0.05)。4线粒体肿胀试验结果显示,与Sham组相比,Model组线粒体吸光度下降率明显增高(P0.05);与Model组相比,线粒体吸光度下降率在Heating组进一步增加(P0.05),在Cooling组有所下降(P0.05)。5TUNEL结果显示,与Sham组相比,Model组中阳性细胞核明显增多(P0.05);与Model组相比,凋亡细胞核在Heating组进一步增加(P0.05),在Cooling组有所减少(P0.05)。6免疫荧光与Western blot对大鼠肌肉组织中TNF-α和IL-6的检测结果显示,与Sham组相比,Model组肌肉组织中TNF-α和IL-6表达均显著增加(P0.05);Heating组与Model组相比,TNF-α和IL-6表达均进一步上升(P0.05);Cooling组与Model组相比,TNF-α和IL-6表达均有所减少(P0.05)。结论1大鼠压疮早期肌肉组织出现损伤,炎性因子和线粒体凋亡通路参与了大鼠早期压疮的形成;2局部热处理会加重受压组织损伤程度,局部冷处理会减轻受压组织损伤程度,因此临床上对于早期压疮的防治和护理可能不适宜使用热疗法,应采取冷疗法。
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R47
【图文】：

图 1 压疮造模装置Fig.1 The device of pressure ulcer modeling恒温箱装置主要由温度计、泡沫箱组成，在泡沫箱一侧设半径为 0.75cm

温度干预装置

图 3 大鼠压疮造模示意图Fig.3 The preparation of pressure ulcer model in rat.6 实验分组及处理方法

【参考文献】

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本文编号：2759203