BRD4在福尔马林致小鼠急性炎性疼痛脊髓中的表达变化

发布时间：2020-07-30 09:46

【摘要】：[目的]:检测BRD4在小鼠脊髓中的表达及细胞定位,通过福尔马林疼痛模型,探讨BRD4在急性炎性疼痛中的作用。[方法]:36只健康雌性昆明小鼠随机分为3组,分别是正常对照组(control)、福尔马林组(FM)、福尔马林+吲哚美辛组(FM+Indo),每组12只。于小鼠右侧后肢足底皮下分别注射无菌生理盐水(control)或1%福尔马林溶液25μl(FM,FM+Indo),FM+Indo在小鼠皮下注射福尔马林溶液前1小时,给予腹腔注射吲哚美辛(20 mg/kg);福尔马林或生理盐水注射后立即观察小鼠的自发疼痛行为。运用免疫荧光双标方法确定BRD4在小鼠脊髓的细胞定位;免疫组织化学方法和Western blot检测各组小鼠双侧脊髓BRD4的表达。[结果]:(1)BRD4在小鼠脊髓中的表达及细胞定位免疫组织化学方法检测结果显示:BRD4阳性信号广泛分布于小鼠脊髓的各个区域,主要分布于后角浅层,左右两侧表达大致相同。免疫荧光双标方法检测了BRD4与神经元的标记物Neu N、星形胶质细胞标记物GFAP和小胶质细胞标记物Iba-1的共表达情况,结果显示BRD4主要分布于小鼠脊髓后角浅层,与神经元标记物Neu N存在共表达情况,但与星形胶质细胞标记物GFAP和小胶质细胞标记物Iba-1共定位表达较少,提示BRD4在小鼠脊髓后角浅层主要定位于神经元。(2)BRD4在福尔马林疼痛模型小鼠脊髓中的表达变化行为学结果显示:与正常对照组相比,福尔马林组小鼠组小鼠表现出明显的双相痛行为,而吲哚美辛预处理可减轻福尔马林诱导的第二相疼痛。免疫组织化学结果显示:与正常对照组相比,福尔马林组双侧脊髓后角浅层BRD4表达上调(P0.05);与福尔马林组相比,福尔马林+吲哚美辛组较福尔马林组小鼠双侧脊髓后角浅层BRD4表达显著下调(P0.05)。Western blot结果显示:与正常对照组相比,福尔马林组双侧脊髓BRD4蛋白表达上调(P0.05);与福尔马林组相比,福尔马林+吲哚美辛组较福尔马林组小鼠双侧脊髓BRD4蛋白表达显著下调(P0.05)。[结论]:小鼠脊髓后角浅层BRD4的表达变化可能参与了急性炎性疼痛的调节。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R402
【图文】：

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南华大学硕士学位论文第 3 章实验结果3.1 BRD4 在小鼠脊髓中的表达我们用免疫组织化学组织化学法检测 BRD4 在小鼠脊髓中的表达（如图 1）。实验结果显示：BRD4 阳性信号广泛分布于脊髓的各个区域，主要分布在脊髓后角浅层，且左右两侧表达大致相同。结果表明：BRD4 主要分布于小鼠脊髓后角浅层，提示它的分布可能与其浅层功能有关。

共表达,红色荧光,标记物,情况

图 2 脊髓后角神经元 BRD4 与 NeuN 共表达情况绿色荧光：BRD4，红色荧光：神经元的标记物 NeuN，黄色荧光：BRD4 与 NeuN 共表达标尺=100 μm 和 50 μm图 3 结果显示：在脊髓后角很少见 BRD4（绿色荧光）阳性产物与星形胶质细胞标记物 GFAP（红色荧光）的共存，并且与小胶质细胞标记物 Iba-1（红色荧光）共定位表达也难以见到。

共表达,红色荧光,情况,标记物

第 3 章实验结果图 2 脊髓后角神经元 BRD4 与 NeuN 共表达情况绿色荧光：BRD4，红色荧光：神经元的标记物 NeuN，黄色荧光：BRD4 与 NeuN 共表达标尺=100 μm 和 50 μm图 3 结果显示：在脊髓后角很少见 BRD4（绿色荧光）阳性产物与星形胶质细胞标记物 GFAP（红色荧光）的共存，并且与小胶质细胞标记物 Iba-1（红色荧光）共定位表达也难以见到。

【参考文献】