临床不同部位分离须癣毛癣菌的形态学、分子生物学鉴定及药敏分析

发布时间：2020-10-22 19:58

　　 目的须癣毛癣菌从临床角度和宿主亲缘性上可被分成亲人和亲动物性两类,分别容易导致人体上半部分(如头面部)和下半部分(如足、指/趾甲)的感染,本研究拟从形态学、生理试验、分子生物学和药敏试验四个方面对不同部位分离的须癣毛癣菌行一对比分析,明确二者是否存在差异。方法选取武汉市第一医院皮肤科近3年从就诊患者不同身体部位分离的须癣毛癣菌48株,通过再培养形态学观察、尿素酶试验、PCR扩增ITS靶位和D1-D2靶位,产物测序后建立遗传进化发生树,并按照美国临床和实验室标准化委员会(Clinical Laboratory and Standards Institute,CLSI)的M38-A2方案,检测受试菌株对8种常见抗真菌药物的敏感性。结果分离自不同部位的须癣毛癣菌在形态学和尿素酶试验上表现出一致性,但毛发穿孔试验表现出不同的特征,通过ITS靶位和D1-D2靶位构建的种系发生树均提示所有的试验株均被归类为以万博节皮菌为有性期的趾间毛癣菌,且ITS靶位在须癣毛癣菌复合体的鉴定效能上优于D1-D2靶位。药敏试验中,须癣毛癣菌对卢立康唑的MIC值最低,氟胞嘧啶的MIC值最高,分离自身体上半部分的须癣毛癣菌对特比萘芬和咪康唑的MIC值显著高于分离身体下半部分的菌株。结论分离自患者不同部位的须癣毛癣菌通过分子生物学方法均被鉴定为趾间毛癣菌,但二者的毛发穿孔试验和对常见抗真菌药物的敏感性试验上存在差别。
【学位单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R446.5
【部分图文】：

菌落颜色微黄，短绒毛样，菌落中央多见褶皱，边缘不整齐；Ⅳ粉末型，菌落呈黄色，似粉末，表面较光滑，中间可见凸起，可见少数色菌丝；Ⅴ型颗粒型，色黄，菌落放射状，表面颗粒不平感，边缘不规（图 1），本研究 48 株菌中，羊毛绒毛型有 22 株，乳皮型有 10 株，末颗粒型有 16 株，大培养菌落形态和菌株的分离部位无明显联系。

图 2 须癣毛癣菌小培养形态 2a：羊毛型和绒毛型小培养形态，小分生孢子量少，短棒状，沿菌丝侧生；2b：乳皮型小培养形态，小分生孢子数量较羊毛和绒毛型多，卵圆形，沿菌丝侧生或散在分布；2c：颗粒型小培养形态，小分生孢子卵圆形或圆形，沿菌丝侧生或聚集成串；2d：粉末型小培养形态，大量圆形小分生孢子，葡萄串样排

48 株须癣毛癣菌在尿素酶培养基上 28℃培养 2 周后，均可使培养橘黄变为紫红色，为阳性，且颗粒型阳性程度最强，羊毛型最弱，即颗粒型较羊毛绒毛型尿素酶试验培养基颜色改变所需时间越短、颜色范围越大，但阳性程度和菌株分离部位无明显相关性，对照菌红色毛呈阴性（图 3）。
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本文编号：2852033