MicroRNA-206通过抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞connexin 43表达影响LPS诱导的通透性增加

发布时间：2020-11-06 08:17

　　 目的:探究脓毒症急性肺损伤肺泡Ⅱ型上皮细胞表达的缝隙连接蛋白43(Cx43)与肺泡气-血屏障通透性的关系以及microRNA-206对脓毒症急性肺损伤条件下肺泡Ⅱ型上皮细胞表达的Cx43影响。方法:动物实验分为假手术(sham)组、脓毒症(CLP)组、CLP+Cx43抑制剂(Cx43-In)组和CLP+miRNA-206模拟物(miR-206-Mi)组。我们采用的是盲肠结扎穿孔的方法来准备急性肺损伤模型。造模成功后6 h,取肺组织进行HE染色,湿干重比(W/D)和支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量测定,应用免疫组化、Western blot检测肺组织Cx43的表达,RT-qPCR检测肺组织miRNA-206和Cx43 mRNA的含量。在transwell板上培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,待培养成单层细胞后,用Cx43 mRNA抑制剂(siRNA-Cx43 mRNA)和miRNA-206模拟物预处理,再用脂多糖(LPS)进行干预,检测下室中经异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran)荧光强度来判断单层细胞的通透性。应用双荧光素酶报告基因实验,探究miRNA-206是否靶向Cx43 mRNA的3′非编码区来调节Cx43的表达,进而调控肺泡气-血屏障的通透性。结果:与sham组相比,CLP组肺泡结构破坏,肺泡壁增厚,肺间质充血、出血,炎症细胞浸润,肺间质和肺泡腔水肿,且肺泡腔内可见淡红色水肿液和中性粒细胞渗出,肺组织W/D、BALF蛋白含量增加(P0.05),同时Cx43的mRNA和Cx43蛋白的表达量也明显增加(P0.05),miRNA-206表达量降低(P0.05);相对于CLP组,Cx43-In组和miR-206-Mi组肺组织的炎症反应减轻,W/D、BALE蛋白含量降低(P0.05),Cx43的mRNA和Cx43蛋白的表达量也明显减少(P0.05)。此外,双荧光素酶报告基因实验结果显示,Cx43 mRNA的3′非编码区存在miRNA-206的互补序列。结论:脓毒症急性肺损伤条件下肺泡Ⅱ型上皮细胞表达的Cx43增加,导致了肺泡气-血屏障的通透性增加;microRNA-206通过标靶Cx43的mRNA下调了Cx43的表达,进而降低了肺泡气-血屏障通透性。
【学位单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R459.7;R563
【文章目录】：
中文摘要
abstract
常用缩写词中英文对照表
前言
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 实验方法在体水平
    1.3 实验方法细胞水平
    1.4 统计学方法
2 结果
3 讨论
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
个人简历

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 周定刚;喻国东;陈乾美;;连接蛋白Connexin 43在鼻息肉中的表达[J];中国当代医药;2011年24期

2 刘耀;张曦;司英健;高蕾;高力;陈幸华;;急性白血病骨髓基质细胞Connexin 43的表达及细胞间通讯功能研究[J];中国实验血液学杂志;2007年04期

3 王光宇;叶婷婷;张庆勇;;胰岛素诱导的大鼠急性低血糖对心律失常发生及心肌connexin 43表达的影响[J];上海交通大学学报(医学版);2015年07期

4 李环;胡殿兴;陈威;张燚;靳曙光;;Connexin 43介导细胞缝隙连接的研究进展[J];北华大学学报(自然科学版);2014年01期

5 覃虹锟;桂艳萍;王亚菁;赵丽;;间隙连接蛋白Connexin 43介导的胶质瘤替莫唑胺耐药研究进展[J];中国药科大学学报;2018年06期

6 马兴对;姬宁宁;吴靓;孟庆祥;赵盼盼;刘苏;李北平;;脊髓星形胶质细胞connexin 43调控CCL2释放在结直肠扩张致大鼠慢性内脏痛中的作用[J];临床和实验医学杂志;2018年22期

7 张永兴,徐洪涛,王恩华;Connexin 43和E-cadherin在非小细胞肺癌中表达及相关性研究[J];中国肺癌杂志;2005年02期

8 于永娟;牟芳芳;张泽安;田雪松;姜昕;路萍萍;;Connexin 43在银杏叶提取物抗大鼠脑缺血损伤中的作用[J];中国中医急症;2012年05期

9 宋东莉;刘晓宇;刘雯;左伋;;Connexin 43在细胞死亡中的作用[J];生命科学;2010年03期

10 赵亚冰;武玉东;;Connexin 43在神经原性逼尿肌过度活动中表达的实验研究[J];医药论坛杂志;2007年09期

相关博士学位论文 前1条

1 唐颖馨;缝隙连接通讯对脑缺血边缘区及远隔区神经元损伤的影响及机制研究[D];华中科技大学;2009年

相关硕士学位论文 前2条

1 周佳伟;MicroRNA-206通过抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞connexin 43表达影响LPS诱导的通透性增加[D];山西医科大学;2019年

2 宋东莉;缝隙连接蛋白Connexin 43半通道在H9c2细胞增殖调节中的作用及机制[D];复旦大学;2010年

本文编号：2872889