透明质酸修饰的阳离子类脂质体作为眼底基因递送载体的研究

发布时间：2020-11-17 16:55

　　 近年来,采用基因治疗手段对眼底疾病进行根本性的治疗,受到越来越多科研学者的重视。然而,基因治疗遇到的瓶颈在于高效的递送载体。因此,寻求能够紧密结合基因,实现定位靶组织、定时释放基因和定点自我降解的目标的理想载体成为目前基因治疗领域研究的重中之重。本课题从三个部分进行研究。首先,研究考察了Niosomes的制备条件与理化性质。经HA修饰后的阳离子类脂质体,粒径为175~184 nm,电位为-29~-33 mV。其次,采用视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞,对载体进行细胞摄取水平的研究。结果显示,各组载体细胞摄取能力随着HA的修饰量增加而不断增加,且20%HA-C-niosomes组的摄取能力显著高于无HA修饰组。最后,采用了增强型绿色荧光蛋白(pEGFP),将其作为质粒包载入阳离子类脂质体后,并修饰以透明质酸,得到HA-C-niosomes/DNA。体外细胞学实验结果表明,20%HA-C-niosomes组的转染效率,相比裸质粒组,增加了2倍。而通过在SD大鼠体内开展的体内转染学评价,视网膜冷冻切片,发现RPE层有明显绿色荧光蛋白的表达;且20%HA-C-niosomes组体内转染效率是裸质粒组的6.5倍。综上,该HA修饰的阳离子类脂质体(HA-C-niosomes)具有良好的稳定性以及基因保护作用,能够主动靶向到RPE细胞,并实现良好的基因转染效果。
【学位单位】：上海应用技术大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R77;R450
【部分图文】：

图 1. 人眼的示意图Fig 1. Schematic diagram of the human eye[14]分在视觉的过程中都有一个特定的功能，但含有感光则扮演中较为重要的角色。视网膜的垂直部分揭示了组织: 内界膜，神经纤维层，神经节细胞层，内网状，外界膜，PR 内外节段和色素上皮细胞（如图 2）。层。它由一个单层的细胞构成，夹在脉络膜与脉络。RPE 执行各种功能：处理 PR 细胞外部节段，形成血强视力，清除废物，防止有毒和氧化损伤，选择性运说，光感受器和 RPE 是视网膜疾病的基因治疗的主要着关键作用，并且容易受到大量单基因缺陷的影响[13结构，可用于精确地向光感受器和 RPE 提供治疗材料

图 1. 人眼的示意图Fig 1. Schematic diagram of the human eye[14]眼睛的每个部分在视觉的过程中都有一个特定的功能，但含有感光内的视网膜在其中则扮演中较为重要的角色。视网膜的垂直部分揭示了好的层组成的多层组织: 内界膜，神经纤维层，神经节细胞层，内网状外丛状层，外核层，外界膜，PR 内外节段和色素上皮细胞（如图 2）。视网膜最外部的一层。它由一个单层的细胞构成，夹在脉络膜与脉络Bruch 膜(BM)之间。RPE 执行各种功能：处理 PR 细胞外部节段，形成血吸收多余的光来增强视力，清除废物，防止有毒和氧化损伤，选择性运经视网膜。一般来说，光感受器和 RPE 是视网膜疾病的基因治疗的主要们在视觉周期中起着关键作用，并且容易受到大量单基因缺陷的影响[13高度组织性的层状结构，可用于精确地向光感受器和 RPE 提供治疗材料

上海应用技术大学 硕士学位论部基因治疗：给药途径部基因的传递可以通过不同的途径进行，包括局部灌注、眼周路线、腔内注射注射、视网膜下注射或脉络膜上腔注射（图 3）[11]。不同的给药途径具有不点，选择给药途径时应该基于目标细胞以及所使用的载体的特征[15]。
【参考文献】

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1 周冬梅;谢晓芳;庄燕;王飞;刘凤芝;曾健强;马轶凡;蔡林涛;;不同表面电荷的阳离子脂质体对人外周血单核细胞活化和细胞活性的影响[J];生物物理学报;2010年08期

本文编号：2887720