饮食对女性2型糖尿病患者尿液微生态与膀胱炎症反应调节效应的研究

发布时间：2020-11-20 21:12

　　 背景随着基因测序技术在尿液微生物检测方面的应用,传统的“膀胱无菌”概念已被打破。而且,越来越多的研究表明尿液微生态在疾病的发生与发展中扮演着重要角色。T2DM患者尿糖和尿液pH值的升高,引起了尿液微生物生存环境的改变,这一改变导致患者频发尿路感染。女性患者因尿道解剖位置的特殊性,较男性更易发生尿路感染。因此,女性患者尿液微生态结构较男性可能更易发生改变。IL-8是趋化因子家族的一种细胞因子,已被用于诊断膀胱炎症。机体其它部位微生态的研究表明,微生态紊乱与局部组织炎症反应相关。所以,尿液IL-8的出现与否可能也与尿液微生态有关。众所周知,科学饮食对于T2DM患者具有延缓病情作用,这与它对肠道微生态及其免疫功能的调节作用有关。由于尿液成分主要由饮食决定,其调节效应可能也将发生于尿液微生态与膀胱炎症反应之间。如需证明此假设,首先需探讨一种适宜微生态研究的尿标本采集法。目的1.探讨一种改良式尿液微生态标本采集法(下简称“改良法”),避免导尿术采集法给患者带来的痛苦,并为尿液微生态检测的临床应用提供一项新的护理技术。2.探讨女性T2DM患者尿液微生态多样性特征,并了解患者尿液微生态是否受个体特征如血糖、尿糖和年龄等因素影响。3.探讨T2DM患者尿液微生态变化与尿液IL-8浓度的关系。4.探讨饮食对T2DM患者尿液微生态与尿液IL-8浓度相关性的调节效应。方法1.自行设计的改良法包括:①指导患者学习导尿术消毒法;②患者下蹲,自行取碘伏棉球消毒会阴部及尿道口,持续分开阴唇,排尿时依次采用4根标有1、2、3和4的50mL无菌离心管接尿。采用自身前后对照研究设计,采集了 30名拟行留置导尿术的剖宫术女性志愿者尿标本,即于术前一日采用改良法采集标本,手术当日采用导尿术采集标本。将管2和管3尿液用于微生态检测和尿培养,采用磁珠法提取细菌DNA和Miseq测序平台对细菌16S rDNA高可变区V3-V4进行测序,使用R语言和STAMP软件进行生物信息与统计分析,以比较改良法与导尿术所采集尿标本的微生态。2.应用病例对照研究设计,招募了 70名女性T2DM患者及70名健康女性作为对照组。利用改良法采集尿标本,细菌DNA的提取和测序分析方法同第一部分研究,比较T2DM患者与健康女性尿液微生态多样性特征和结构,并分析年龄、血糖、尿糖、BMI和月经等个体特征对患者微生态的影响。3.使用第二部分研究中采用改良法采集的尿标本,采用ELISA试剂盒检测尿液IL-8浓度。接下来,根据检测结果将T2DM患者分为两组:有可检测的IL-8(with detectable IL-8,WIL8)组与无可检测的 IL-8(no detectable IL-8,NIL8)组。比较WIL8与NIL8组尿液微生态是否存在组间差异。同时,将第二部分研究所探知的T2DM组与健康组有组间差异的细菌属分为某一特定细菌属的“≥ HCs”和“HCs”亚组,继而比较两个亚组之间尿液IL-8浓度差异。另外,采用多元逐步回归分析判断与IL-8浓度变化有线性回归关系的细菌属。4.采用入户调查方式和《饮食频率法调查表》调查患者饮食摄入情况,使用Matlab软件按《食物成分表》将饮食转换为营养素。将第二部分研究中揭示的T2DM组与健康组存在组间差异的细菌属和细菌种、第三部分研究中证实的WIL8与NIL8组存在组间差异的细菌属和细菌种及与IL-8浓度具有回归关系的细菌属作为自变量,将尿液IL-8浓度作为因变量,将第二部分研究中证实的尿液微生态影响因素作为控制变量,采用分层回归分析方法进行调节效应分析。结果1.改良法与导尿术采集法的尿液标本微生态在菌群多样性特征及菌群的门、科和属水平无组间差异(p0.05)。同时,两种采集法的标本微生态在门、科和属水平相似度均接近100%。2.女性T2DM患者尿液微生态发生了以下变化:①与健康女性相比,患者尿液微生态丰富度和多样性指数均下降(p0.05);②微生态群落在细菌门、属和种水平发生了明显变化,主要表现在:与健康对照组相比,T2DM组细菌门绿弯菌、硝化螺旋菌和疣微菌相对丰度下降(p0.05);33个细菌属的相对丰度在组间呈现差异(P0.05),如普氏菌、乳杆菌和Shuttleworthia(暂无中文名,则采用英文名;根据国际惯例,细菌属和种水平采用斜体字。余同)相对丰度在T2DM组明显升高,而阿克曼氏菌、Faecalibacterium和铜绿假单胞菌相对丰度则在T2DM组降低;嗜黏蛋白阿克曼氏菌相对丰度在T2DM组明显降低;③放线菌门、卟啉单胞菌、黄杆菌目、脱硫弧菌、黄杆菌纲和柯林斯氏菌可作为T2DM生物标识物;④乳杆菌和放线菌门相对丰度随着血糖及尿糖的升高而升高,嗜黏蛋白阿克曼氏菌相对丰度则随着血糖和尿糖的升高而降低;⑤T2DM尿液微生态多样性指数Chao 1和ACE与碳水化合物及氨基酸代谢功能受损有关。3.70个标本中有46名患者的尿标本可检测出IL-8(浓度为64.31 ± 70.43 pg/mL),24名患者无可检测的IL-8。11个细菌属在WIL8组升高(p0.05),如棒状杆菌、阿克曼氏菌和肠球菌等;10个细菌属在WIL8组下降,如Faecalibacterium、拟杆菌和铜绿假单胞菌等(p0.05)。惰性乳杆菌在WIL8组升高(p0.05)。T2DM组与健康组间差异细菌属中,有4个细菌属在“≥ HCs”和“HCs”亚组的IL-8浓度有差异(p0.05),它们是不动杆菌、克雷白氏菌、铜绿假单胞菌和细杆菌。IL-8浓度变化与18个细菌属有线性回归关系(p0.05)。4.纤维素、VitB3和VitE摄入量对瘤胃球菌相对丰度与IL-8浓度起到正向调节效应,但饮水量为负向调节效应(p0.05);胆固醇和镁摄入量对丛毛单胞菌相对丰度与IL-8浓度相关性起正向调节效应(p0.05);Vit A摄入量对厌氧球菌相对丰度与IL-8浓度相关性起到负向调节效应(p0.05)。结论1.改良法可采集到不易污染的真正中段尿。它可替代导尿术标本采集法,用于尿液微生态及尿培养标本的采集。2.女性T2DM患者尿液微生态发生了紊乱,其个体特征如血糖和尿糖值与某些关键功能菌的变化有关。同时,微生态紊乱与代谢紊乱相关。3.女性T2DM患者尿液微生态紊乱与膀胱炎症反应互为影响。4.饮食对尿液微生态与膀胱炎症反应可发挥调节效应。今后,护理人员可通过调整患者饮食方案以增加Vit A、Vit B3、Vit E与膳食纤维摄入量,以促进膀胱炎症反应的缓解。同时,护理人员宜动态监测患者水、胆固醇和镁摄入量,以防止它们的过度摄入引起的膀胱炎症反应加重。
【学位单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R473.5
【部分图文】：

３．３?ＭＭＳＵ与ＴＵＣ采集法尿液微生态结果比较??３．３．１?ＭＭＳＵ与ＴＵＣ采集法微生态复杂度比较??从ＰＣｏＡ分析可以看出，两组样本完全不可聚类，且大部分样本重叠（图１．１）。??从表１．４可知，ＭＭＳＵ与ＴＵＣ标本微生态复杂度指数无统计学差异（ｐ＞０．０５）。??ＰＣＡ??２０?４?？??｜?Ｕｒ２５Ｂ??３？??〇〇?Ｇｒｏｕｐ??＾?释?ＭＭＳＵ??ｃｏ?Ｒ?ＴＵＣ??＾?－２０－??－４０－??Ｉ??????Ｕｒ？ＳＩ??－４０?－２０?０??ＰＣ１?７．０２％??图１．１?ＰＣｏＡ分析??ＰＣｏＡ分析，是微生态样品间差异分析结果，基于ｕｎｗｅｉｇｈｔｅｄ?ＵｎｉＦｒａｃ?ｍｅｔｒｉｃ进行分??析。红点代表ＭＭＳＵ组，蓝点代表ＴＵＣ组。??２４??

１３．２．１．１?ＭＭＳＵ与丁?ＵＣ组菌群门水平比较??在菌群分类学分析中发现有１９个细菌门（ｐｈｙｌｕｍ），?ＭＭＳＵ与ＴＵＣ采集法在门??水平无统计学差异（ｐ＞〇．〇５），详见图１．２。??１００??ｍ?ＭＭＳＵ?ｐ＞〇．〇５??＿?ＴＵＣ??Ｊ??８０－??２?ＳＤ??ｖ）?６０－??ａ＞?，?４??ｏ??ｃ??Ｑ＞??Ｄ??？??（Ｏ??ｃ??ＪＯ??〇．?４０－??〇Ｉ??图１．２?ＭＭＳＵ与ＴＵＣ法菌群门水平细菌丰度比较??采用ＳＴＡＭＰ软件分析两组菌群门水平相对丰度差异，利用Ｗｅｌｃｈ’ｓ?ｔ检验，采用??ＢｅｎｊａｍｉｎｉＦＤＲ进行校正。黄色代表ＭＭＳＵ组，绿色代表ＴＵＣ组。??２６??

?正文第一部分改良式中段尿与导尿术尿标本采集法对尿液微生态的影响??３．３．２．１．２ＭＭＳＵ与ＴＵＣ菌群门水平相似度??从图１．３可知，两种采集方法的微生态在菌群门水平Ｒ２＝０．９９１。可见，ＭＭＳＵ??采集法尿液微生态与ＴＵＣ采集法在门水平相似度高｜１３３］。??１?５??，?！?！?７１??Ｒ２?＝０．９９１?，??６０??／??Ｉ??／??／??／??／??５０?＾??／??／??／??／??／??／??４０?／?－??／??／??一?ｚ??２?３０?＾??／??／??／??２０??－—ｒ?＾?］??１０?（卜一＾???／??〇?—????／??——???１??０?１０?２０?３０?４０?５０?６０?０?１５??ＭＭＳＵ?（％）??图１．３?ＭＭＳＵ与ＴＵＣ组菌群门水平相似度??Ｓｃａｔｔｅｒ图采用ＳＴＡＭＰ软件分析生成，两组菌群细菌门丰度可信区间采用Ｗｉｓｏｎ??ｓｃｏｒｅ方法计算。??２７??
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 朱遵伟;王金根;黄跃胜;孟栋良;何洁卿;;膀胱炎症性肌纤维母细胞性肿瘤1例[J];广东医学;2011年14期

2 安伟;王伟刚;高嘉林;傅耀文;;膀胱炎症性肌纤维母细胞瘤1例报告并文献复习[J];中国实验诊断学;2009年01期

3 姜隽;姜睿;杨海帆;程勇;兰永树;韩福刚;;膀胱炎症性肌纤维母细胞瘤1例报告(英文)[J];泸州医学院学报;2010年06期

4 徐晓杰;;浅析膀胱炎症性肌纤维母细胞性肿瘤的病理特征[J];辽宁医学院学报;2014年03期

5 王欣;李志娟;许长江;;膀胱炎症性肌纤维母细胞瘤4例临床病理分析[J];淮海医药;2008年03期

6 陈易华;汪盛贤;王庆堂;罗艳;;膀胱炎症性肌纤维母细胞肿瘤3例临床病理分析[J];中国肿瘤临床;2008年15期

7 章锦湘,谢了武;气肿性膀航炎4例报告[J];温州医学院学报;1984年02期

8 李春元;IL-8与高危患者发展至成人型呼吸窘迫综合征[J];国外医学.呼吸系统分册;1993年03期

9 王志敏,谭志波,王世俊;幼年型类风湿关节炎血清IL-8水平[J];中华风湿病学杂志;1999年01期

10 李庆山,温春光,张国材;淋巴系统恶性血液病患者血清IL-8的测定[J];临床血液学杂志;2000年01期

相关博士学位论文 前2条

1 柳丰萍;饮食对女性2型糖尿病患者尿液微生态与膀胱炎症反应调节效应的研究[D];浙江大学;2018年

2 侯粲;饲料和猪尿液中非目标物筛查技术及应用研究[D];中国农业科学院;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 梁彦丽;阿托伐他汀对大鼠血管内皮细胞中瘦素诱导IL-8、IL-1β表达的作用[D];昆明医科大学;2015年

2 王审;IL-1β、IL-8和IL-10基因多态性与心肌梗死的相关性研究[D];浙江大学;2015年

3 陈敏;血浆IL-8、IP-10、MCP-1与2型糖尿病及其并发症的相关性研究[D];昆明医科大学;2016年

4 高红霞;梁文珍教授通络汤治疗气滞血瘀型盆腔炎性疾病后遗症的临床观察及对血液流变学、TNF-α、IL-8、IL-10影响的研究[D];安徽中医药大学;2016年

5 赵春波;针药结合对盆腔炎性疾病后遗症大鼠血清中IL-6、IL-8表达的影响[D];黑龙江中医药大学;2017年

6 赵彬彬;乳杆菌表层蛋白对菌株性质的影响及其生物学功能[D];江南大学;2017年

7 荆治;携IL-8单克隆抗体靶向性声学造影剂对兔腹主动脉粥样斑块的实验研究[D];昆明医科大学;2012年

8 杜琳麟;止咳平喘软胶囊治疗慢性支气管炎急性发作期的临床观察及对血清IL-8的影响[D];黑龙江中医药大学;2011年

9 张娜;人IL-8基因对宫颈癌侵袭和血管生成能力影响的实验研究[D];河北医科大学;2009年

10 杨永丽;乳腺癌患者尿液中酪氨酸及其代谢产物分析新方法研究[D];南昌大学;2017年

本文编号：2892001