人类白细胞抗原B5801/5701/1502核酸检测国家参考品的建立

发布时间：2020-12-11 23:33

　　目的建立人类白细胞抗原B5801/5701/1502核酸检测国家参考品。方法采集HLAB5801/5701/1502阳性和阴性志愿者的新鲜外周血,经EB病毒转化,培养建立永生化细胞系。细胞扩增培养,提取基因组DNA,制备成国家参考品并经高通量测序验证。4家协作标定单位采用荧光PCR法、高通量测序（NGS）、基因测序分型（SBT测序法）对国家参考品进行定值,并进行国家参考品的复溶（在-20℃and 20～25℃之间反复冻融3次）稳定性和均匀性研究。结果 HLA-B5801/5701/1502核酸检测国家参考品成功制备,包含5例HLA-B5801阳性、3例HLA-B5701阳性、3例HLA-B1502阳性和9例阴性样本。该参考品定值准确,均匀性结果一致,参考品复溶3次后仍然稳定。结论人类白细胞抗原B5801/5701/1502核酸检测国家参考品的各项指标均符合要求,可用于HLA-B5801核酸检测试剂盒、HLA-B5701核酸检测试剂盒、HLA-B1502核酸检测试剂盒的性能评价。 

【文章来源】：分子诊断与治疗杂志. 2020年09期 第1137-1141页

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 试剂
        1.1.2 仪器
    1.2 方法
        1.2.1 样本收集
        1.2.2 细胞系基因组DNA提取、质检及定量
        1.2.3 国家参考品的制备与验证
        1.2.4 国家参考品的协作标定
        1.2.5 国家参考品稳定性和均匀性验证
2 结果
    2.1 国家参考品的制备及验证
    2.2 国家参考品的协作标定
    2.3 国家参考品的稳定性和均匀性验证
3 讨论



本文编号：2911424