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血源性人细小病毒的分子流行病学分析与人细小病毒B19非结构蛋白功能研究

发布时间:2020-12-17 23:04
  人细小病毒B19(Human parvovirus B19,B19V)和人细小病毒4(Human parvovirus 4,PARV4)可以感染人类,且可经血液及血液制品传播。我国捐献血液/血浆时未对其中的B19V和PARV4进行检验,我国血液制品企业在生产血液制品时也未对它们进行筛查,且常规的病毒去除/灭活技术难以有效地将人细小病毒去除/灭活。血源性人细小病毒(B19V和PARV4)的存在对我国捐献的血液/血浆和我国血液制品的使用存在着不可忽视的安全隐患。因此,B19V和PARV4对临床用血和血液制品的潜在威胁越来越引起人们的关注。为了更好地保障我国临床用血和血液制品的病毒安全性,我们有必要对我国献血/献浆人群中的B19V和PARV4进行分子流行病学分析。因此,在本研究的第一部分,我们使用B19V-PARV4双重核酸检测体系对我国西安地区3200例单人份献血者血浆和我国某血液制品企业54份混合原料血浆进行了B19V和PARV4的核酸检测。为了解B19V不同基因型的分布状况,本研究基于B19V基因组中NS1-VP1u区的核苷酸序列或基因组近全长序列进行克隆测序后,经多重序列比对,最后基... 

【文章来源】:军事科学院北京市

【文章页数】:81 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

血源性人细小病毒的分子流行病学分析与人细小病毒B19非结构蛋白功能研究


技术路线图

核苷酸序列,实时荧光定量PCR,献血者,核酸


19V 的三种基因型代表毒株的核苷酸序列进行1a 亚型的 Au 株(GenBank NO.M13178.1)、1064)、2 型的 A6 株(GenBank NO.AY064475)亚型的 V9 株(GenBank NO.AX003421)和 3234.1)。中的 neighbor-joining method 对 B19V 不同基因型进行系统发育分析,并构建进化树。中 B19V 和 PARV4 的核酸阳性率的结果判定方法为:3 个复孔均为阳性者,判定为疑似阳性。使用巢式 PCR 扩增目的片段,若不扩增出目的片段,则判定为阳性。仅 1 个或 0 个者血浆中,B19V核酸阳性的样品有12份(阳性(阳性率为 0.13%)。

混合原料,实时荧光定量PCR,血浆,核酸


光定量 PCR 检测混合原料血浆中的 B19V 和基因片段的克隆及鉴定段的巢式 PCR 扩增 B19V 核酸阳性样品经巢式 PCR 扩增其 N糖凝胶电泳。从结果图 4 可以看到,无模板

【参考文献】:
期刊论文
[1]人细小病毒B19基因组编码蛋白真核表达质粒的构建与鉴定[J]. 钟亚迪,贾俊婷,范瑞,马丽敏,马玉媛,章金刚.  生物技术通讯. 2017(05)
[2]血液及血液制品中人细小病毒B19的检测及其意义[J]. 马玉媛,贾俊婷,章金刚.  临床输血与检验. 2016(03)
[3]Acute encephalitis and encephalopathy associated with human parvovirus B19 infection in children[J]. Toru Watanabe,Hideshi Kawashima.  World Journal of Clinical Pediatrics. 2015(04)
[4]人细小病毒B19三种基因型通用核酸检测体系的建立与评价[J]. 贾俊婷,郭逸,赵雄,马玉媛,章金刚.  军事医学. 2015(03)
[5]原料血浆和凝血因子类产品中人细小病毒B19污染情况调查[J]. 贾俊婷,马玉媛,郭逸,赵雄,赵福广,章金刚.  军事医学. 2015(03)
[6]新型细小病毒PARV4的特性及其与人细小病毒B19的关系[J]. 郭逸,马玉媛,段勇,叶世辉,章金刚.  中国输血杂志. 2014(07)
[7]GFP-LC3真核表达载体构建、定位及胶质瘤U87稳定转染细胞系筛选[J]. 李昊文,刘丽,任远,郭安臣,王雅杰.  中华临床医师杂志(电子版). 2013(21)
[8]B19病毒11kDa蛋白对Hela细胞内NF-κB信号通路的影响[J]. 董衍明,黄玉,彭建新,李毅.  生物工程学报. 2013(07)
[9]血液制品的现状与展望[J]. 王卓,赵雄,吕茂民,章金刚.  生物工程学报. 2011(05)



本文编号:2922860

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