90株鲍曼不动杆菌OXA基因研究及ISAba1对OXA-23基因表达的影响
发布时间：2021-01-09 05:10
目的:检测皖南地区临床分离的鲍曼不动杆菌ISAba1和OXA基因流行趋势,以及研究ISAba1对OXA-23基因表达的影响。方法:采用VITEK 2 compact全自动微生物鉴定仪检测90株非重复的鲍曼不动杆菌,多重聚合酶链式反应（MPCR）检测OXA基因和插入序列（ISAba1）。TA克隆耐药基因全序列blaoxa-23、插入序列ISAba1和ISAba1-blaoxa-23,构建基因重组质粒,转化到大肠埃希菌DH5α中,后经转化到大肠埃希菌Rosetta（DE3）表达宿主菌株;SDS-PAGE检测pET28b（+）-blaoxa-23、pET28b（+）-ISAba1、pET28b（+）-ISAba1-blaoxa-23和转化子（pET28b（+））在表达菌株中的表达,通过肉汤稀释法测定表达后的阳性菌株和转化子对亚胺培南和美罗培南的最低抑菌浓度（MIC）。结果:90株非重复鲍曼不动杆菌,blaoxa-23基因阳性的菌株有73株,blaoxa-51基因阳性的菌株有90株,ISAba-1基因阳性的菌株有86株,未检测到blaoxa-24基因、blaoxa-58基因阳性菌株。其中17株...
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
部分多重PCR检测ISAba1及4种blaoxa酶基因的扩增产物条带注：M为Marker；1-2,4-8,10-11泳道为含有blaOXA-23，blaOXA-51和ISAba1的菌株检测结
R 检测 ISaba1-blaOXA-23、blaOXA-23 和 ISaba1 的扩增产物rker；1 泳道为 ISaba1-blaOXA-23 的目的基因检测结果；2-5 泳道为 bl结果；6-9 泳道为 ISaba1 的检测结果；粒的鉴定结果laOXA-23 和 ISABa1 阳性菌株进行全序列 PCR 扩增，ISABa1，ISABa1-blaOXA-23 全序列及空载的 PET-28b(+质粒 PCR 鉴定结果显示 blaOXA-23，ISABa1，ISABa1-blaO体均连接成功，PCR 电泳结果见图 2。提取经双酶切鉴定正l 交送南京金斯瑞公司采用双向测序，测序引物为 pET-28b(+软件与 GenBank 中已报道的基因序列进行比对，都与
图 2 重组质粒双酶切鉴定 Marker；1 泳道为空载 pET-28b(+)质粒；2 泳道为含有 blaOXA-23 的重组泳道为含有 ISAba1 的重组质粒检测结果；4 泳道为含有 ISABa1-blaOXA-果。菌株表达药敏 液体稀释法药敏结果显示含有单一 blaOXA-23 的重组质粒 Ros化空载质粒 pET-28b(+)的 Rosetta 菌株相比亚胺培南的 MIC 值从4ug/ml,美罗培南的 MIC 值从 0.03ug/ml 增加 4ug/ml,即亚胺培南和 分别增加了 33 和 133 倍。而单一 ISAba1 的重组质粒 Rosetta 表达质粒pET-28b(+)的Rosetta菌株相比亚胺培南的MIC值从0.12ug罗培南的 MIC 值从 0.03ug/ml 增加 0.5ug/ml,即亚胺培南和美罗培
【参考文献】：
期刊论文
[1]鲍曼不动杆菌8种RND外排泵介导替加环素耐药表型的研究[J]. 张驰,杨羚,凌保东. 中国抗生素杂志. 2018 (02)
[2]替加环素不同治疗方案对ICU泛耐药鲍曼不动杆菌肺部感染的临床效果对比观察[J]. 李双,张广庆,刘玉才. 中国抗生素杂志. 2018 (02)
[3]血流感染患者鲍曼不动杆菌的耐药基因检测及同源性分析[J]. 罗媛,张任飞,侯钧. 国际检验医学杂志. 2018(03)
[4]鲍曼不动杆菌对耐碳青霉烯类抗生素耐药机制研究[J]. 李小玉,罗一钧. 临床医药实践. 2017(12)
[5]2016年中国CHINET细菌耐药性监测[J]. 胡付品,郭燕,朱德妹,汪复,蒋晓飞,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,谢轶,康梅,王传清,王爱敏,徐元宏,沈继录,孙自镛,陈中举,倪语星,孙景勇,褚云卓,田素飞,胡志东,李金,俞云松,林洁,单斌,杜艳,郭素芳,魏莲花,邹凤梅,张泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,苏丹虹,汪瑞忠,房华,俞碧霞,赵勇,龚萍,郭大文,赵金英,刘文恩,李艳明,金炎,邵春红,温开镇,张贻荣,徐雪松,鄢超,喻华,黄湘宁,王山梅,楚亚菲,张利侠,马娟,周树平,周艳,朱镭,孟晋华. 中国感染与化疗杂志. 2017(05)
[6]三种药物联合清除耐多粘菌素和碳青霉烯类药物的鲍曼不动杆菌[J]. 豆清娅,吴安华,Lenhard JR,Thamlikitkul V,Silveira FP. 中国感染控制杂志. 2017(07)
[7]2013—2014年50株鲍曼不动杆菌耐药性分析及联合药敏实验研究[J]. 曹诗悦,张静萍,张岩岩,朱婉. 临床军医杂志. 2017(05)
[8]鲍曼不动杆菌的耐药机制研究进展[J]. 赵忺,刘长庭. 解放军医学院学报. 2017(05)
[9]南京市部分地区医院感染鲍曼不动杆菌的耐药基因和分子流行病学研究[J]. 张静,赵水娣,张之烽. 国际检验医学杂志. 2017(01)
[10]2015年CHINET细菌耐药性监测[J]. 胡付品,朱德妹,汪复,蒋晓飞,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,谢轶,康梅,王传清,王爱敏,徐元宏,沈继录,孙自镛,陈中举,倪语星,孙景勇,褚云卓,田素飞,胡志东,李金,俞云松,林洁,单斌,杜艳,郭素芳,魏莲花,吴玲,张泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,苏丹虹,汪瑞忠,房华,俞碧霞,赵勇,龚萍. 中国感染与化疗杂志. 2016(06)
博士论文
[1]中国部分地区鲍曼不动杆菌多位点序列分型及碳青霉烯类抗生素耐药机制研究[D]. 符一骐.浙江大学 2012
[2]碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌耐药机制及同源性研究[D]. 周华.浙江大学 2008
硕士论文
[1]成都医学院附一院鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物高水平耐药的流行病学研究[D]. 王彦宏.成都医学院 2016
本文编号：2966031
【文章来源】：皖南医学院安徽省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
部分多重PCR检测ISAba1及4种blaoxa酶基因的扩增产物条带注：M为Marker；1-2,4-8,10-11泳道为含有blaOXA-23，blaOXA-51和ISAba1的菌株检测结
R 检测 ISaba1-blaOXA-23、blaOXA-23 和 ISaba1 的扩增产物rker；1 泳道为 ISaba1-blaOXA-23 的目的基因检测结果；2-5 泳道为 bl结果；6-9 泳道为 ISaba1 的检测结果；粒的鉴定结果laOXA-23 和 ISABa1 阳性菌株进行全序列 PCR 扩增，ISABa1，ISABa1-blaOXA-23 全序列及空载的 PET-28b(+质粒 PCR 鉴定结果显示 blaOXA-23，ISABa1，ISABa1-blaO体均连接成功，PCR 电泳结果见图 2。提取经双酶切鉴定正l 交送南京金斯瑞公司采用双向测序，测序引物为 pET-28b(+软件与 GenBank 中已报道的基因序列进行比对，都与
图 2 重组质粒双酶切鉴定 Marker；1 泳道为空载 pET-28b(+)质粒；2 泳道为含有 blaOXA-23 的重组泳道为含有 ISAba1 的重组质粒检测结果；4 泳道为含有 ISABa1-blaOXA-果。菌株表达药敏 液体稀释法药敏结果显示含有单一 blaOXA-23 的重组质粒 Ros化空载质粒 pET-28b(+)的 Rosetta 菌株相比亚胺培南的 MIC 值从4ug/ml,美罗培南的 MIC 值从 0.03ug/ml 增加 4ug/ml,即亚胺培南和 分别增加了 33 和 133 倍。而单一 ISAba1 的重组质粒 Rosetta 表达质粒pET-28b(+)的Rosetta菌株相比亚胺培南的MIC值从0.12ug罗培南的 MIC 值从 0.03ug/ml 增加 0.5ug/ml,即亚胺培南和美罗培
【参考文献】：
期刊论文
[1]鲍曼不动杆菌8种RND外排泵介导替加环素耐药表型的研究[J]. 张驰,杨羚,凌保东. 中国抗生素杂志. 2018 (02)
[2]替加环素不同治疗方案对ICU泛耐药鲍曼不动杆菌肺部感染的临床效果对比观察[J]. 李双,张广庆,刘玉才. 中国抗生素杂志. 2018 (02)
[3]血流感染患者鲍曼不动杆菌的耐药基因检测及同源性分析[J]. 罗媛,张任飞,侯钧. 国际检验医学杂志. 2018(03)
[4]鲍曼不动杆菌对耐碳青霉烯类抗生素耐药机制研究[J]. 李小玉,罗一钧. 临床医药实践. 2017(12)
[5]2016年中国CHINET细菌耐药性监测[J]. 胡付品,郭燕,朱德妹,汪复,蒋晓飞,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,谢轶,康梅,王传清,王爱敏,徐元宏,沈继录,孙自镛,陈中举,倪语星,孙景勇,褚云卓,田素飞,胡志东,李金,俞云松,林洁,单斌,杜艳,郭素芳,魏莲花,邹凤梅,张泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,苏丹虹,汪瑞忠,房华,俞碧霞,赵勇,龚萍,郭大文,赵金英,刘文恩,李艳明,金炎,邵春红,温开镇,张贻荣,徐雪松,鄢超,喻华,黄湘宁,王山梅,楚亚菲,张利侠,马娟,周树平,周艳,朱镭,孟晋华. 中国感染与化疗杂志. 2017(05)
[6]三种药物联合清除耐多粘菌素和碳青霉烯类药物的鲍曼不动杆菌[J]. 豆清娅,吴安华,Lenhard JR,Thamlikitkul V,Silveira FP. 中国感染控制杂志. 2017(07)
[7]2013—2014年50株鲍曼不动杆菌耐药性分析及联合药敏实验研究[J]. 曹诗悦,张静萍,张岩岩,朱婉. 临床军医杂志. 2017(05)
[8]鲍曼不动杆菌的耐药机制研究进展[J]. 赵忺,刘长庭. 解放军医学院学报. 2017(05)
[9]南京市部分地区医院感染鲍曼不动杆菌的耐药基因和分子流行病学研究[J]. 张静,赵水娣,张之烽. 国际检验医学杂志. 2017(01)
[10]2015年CHINET细菌耐药性监测[J]. 胡付品,朱德妹,汪复,蒋晓飞,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,谢轶,康梅,王传清,王爱敏,徐元宏,沈继录,孙自镛,陈中举,倪语星,孙景勇,褚云卓,田素飞,胡志东,李金,俞云松,林洁,单斌,杜艳,郭素芳,魏莲花,吴玲,张泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,苏丹虹,汪瑞忠,房华,俞碧霞,赵勇,龚萍. 中国感染与化疗杂志. 2016(06)
博士论文
[1]中国部分地区鲍曼不动杆菌多位点序列分型及碳青霉烯类抗生素耐药机制研究[D]. 符一骐.浙江大学 2012
[2]碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌耐药机制及同源性研究[D]. 周华.浙江大学 2008
硕士论文
[1]成都医学院附一院鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物高水平耐药的流行病学研究[D]. 王彦宏.成都医学院 2016
本文编号：2966031
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