阻断C5a/C5aR上调调节性T细胞治疗慢性移植物抗宿主病的实验研究

发布时间：2021-01-17 21:38

　　目的:探讨阻断C5a/C5aR治疗慢性移植物抗宿主病（cGVHD）的疗效,为cGVHD的免疫治疗提供新的实验依据。方法:1.采集异基因造血干细胞移植后cGVHD患者、无cGVHD患者及供者静脉血标本,流式细胞术检测三组外周血淋巴细胞及CD14+单核细胞中C5aR的表达及CD4+4D25+Foxp3+ Tregs细胞的比例,并进行相关性分析。2.流式细胞术检测遗传背景相同的C5aR敲除及野生型BALB/c小鼠脾细胞中CD4+CD25+Foxp3+Tregs细胞占CD4+T细胞的比例;体外培养小鼠脾细胞,分为C5aR-/-组、野生型组、RmC5a蛋白刺激组（分为100ng/mL及500ng/mLRmC5a+野生型脾细胞两组）,分别采用ELISA检测各组培养上清中TGF-β1的分泌水平及流式细胞术检测各组CD4+CD25+Foxp3+Tregs细胞的比例。3.分选C5aR敲除及野生型BALB/c小鼠脾细胞中的CD4+T细胞,设C5aR-R-组及BALB/c组,通过CD3、CD28、IL-2、TGF-β1等细胞因子诱导Tregs细胞分化3天后,检测2组CD4+T细胞中CD4+CD25+Foxp... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－２．?ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇｓ细胞在造血干细胞移植术后患者及健康供者外周血淋巴细??＊＊

ｉ??ｉ：ｌｌ１１１??Ｃｏｎ?Ｎｏｎ－ＧＶＨＤ?ＧＶＨＤ??图１－２．?ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇｓ细胞在造血干细胞移植术后患者及健康供者外周血淋巴细??胞中的表达比例（＊＊＞＜０．０似）??Ｆｉｇｕｒｅｌ－２．?Ｔｈｅ?ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ?ｏｆ?ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋?Ｔｒｅｇ?ｃｅｌｌｓ（＊＊＊，Ｐ＜ｆｔ００７）??１．２．３颜干细胞移植术后ｃＧＶＨＤ患者Ｃ５ａＲ的表达与Ｔｒｅｇｓ细胞表达的相关??性分析（图１－３Ａ和１－３Ｂ）??根据我们的研究结果显示，造血干细胞移植术后ｃＧＶＨＤ患者外周血淋巴??细胞中Ｃ５ａＲ的表达比例与ＣＤ４＋Ｔ细胞中Ｔｒｅｇｓ细胞的表达比例呈显著的负性相??关（Ｒ＝－０．６０３，Ｐ＜０．０１），如图１－３Ａ；而对造血干细胞移植术后ｃＧＶＨＤ患者外??周血ＣＤ１４＋单核细胞中Ｃ５ａＲ的表达与ＣＤ４＋?Ｔ细胞中Ｔｒｅｇｓ细胞表达比例进行??相关性分析尚无显著差异（Ｒ＝－０．３７８，?Ｐ＞０．０５），如图１－３Ｂ。??Ａｎ?Ｂ??Ｒ?＝?－０．６０３，?ｐ?＝?０．００８?１０５１?Ｒ?＝?－０．３７８，?ｐ?＝?０．１２１??０?ｃ．?％?ｃ??Ｓ?Ｉ?１００■?？??１?Ｉ?？?？??％?＾?＾??Ｕ

表达显著降低，明显低于野生型ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞组（Ｐ＜０．００１）；而ＲｍＣ５ａ??（１００ｎｇ／ｍＬ）组及ＲｍＣ５ａ?（５００ｎｇ／ｍＬ）组间Ｔｒｅｇｓ细胞的表达差异无统计学意??义（Ｐ＞０．０５）。具体表达见图２－２Ａ及２－２Ｂ。??２５??

【参考文献】：
期刊论文
[1]Biology of chronic graft-vs-host disease:Immune mechanisms and progress in biomarker discovery[J]. Richard B Presland.  World Journal of Transplantation. 2016(04)
[2]C3a、C5a受体缺失减轻IgA肾病肾损伤[J]. 晏现丽,张颖,郑立运,任凌燕,周雅丽,权松霞,邢国兰.  中国免疫学杂志. 2015(09)



本文编号：2983637