CAF的糖代谢变化及对 18 F-FDG PET的影响
发布时间：2021-02-08 00:05
目的:肿瘤是由多种细胞组成的复杂组织,其中CAF是肿瘤间质细胞中最主要的组成部分。本研究拟观察肿瘤相关成纤维细胞（Cancer associated fibroblast,CAF）的糖代谢变化及其对肿瘤18F-FDG PET显像的影响,并探索其在临床应用中的价值。方法:1.使用qRT-PCR及Western Blot方法比较NAF与CAF之间,以及CAF作用下的肿瘤细胞与原始肿瘤细胞之间的糖代谢相关分子表达差异。2.使用?计数仪及GO试剂盒分析比较两者18F-FDG摄取及葡萄糖消耗的差异。3.使用CCK-8方法比较3-BrP对CAF与NAF的毒性差异。4.使用micro-PET/CT及放射自显影的方法,在皮下移植瘤及AOM/DSS自发肠癌动物模型中观察CAF对18F-FDG摄取的影响。5.回顾性分析126例术前行18F-FDG PET/CT的结直肠癌患者的临床病理及影像资料。6.筛选30例临床病理特征匹配的高、低代谢组患者,取其肿瘤组织标本进行FSP-1免疫组化染色,使用inForm图像分析系统进行...
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：104 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
CAF与NAF的糖代谢相关基因mRNA表达水平Figure1ThemRNAexpressionlevelsofHK2,GLUT-1andHIF-1α
上海交通大学医学院博士毕业论文图 2 CAF 与 NAF 的糖代谢相关蛋白表达水平Figure 2 The protein levels analyzed by Western Blot注：左侧为 PDGF 细胞因子（PDGF-induced）及 HCT116 结肠癌细胞上清液（CM-induced）诱导的 CAF 细胞与 NAF 细胞比较，诱导 CAF 细胞的 CAF 特异性蛋白 FSP-1/FAP 高表达，且 HK2、GLUT-1 表达升高；右侧为结肠癌新鲜标本中分离的 CAF 与 NAF之间比较，表达 FSP-1 的 CAF 细胞 HK2 表达显著增强。2.3 CAF 对肿瘤细胞糖代谢相关基因 mRNA 表达及蛋白表达水平的影响我们进一步研究 CAF 对于肿瘤细胞糖代谢的影响，我们用证实被 PDGF 诱导活化的 CAF 细胞上清液培养 HCT116 结肠癌细胞，应用 qRT-PCR 及 WesternBlot 的方法比较其与亲代细胞之间的糖代谢相关基因表达差异，发现 CAF 作用后的 HCT116 细胞的 HK2 表达显著下降，其 mRNA 水平为原始细胞的 0.75 ±0.019，p = 0.015（图 3），其 HK2 的蛋白表达同样显著降低。
上海交通大学医学院博士毕业论文倍， p = 0.0002；HCT116 上清液诱导 CAF 的18F-FDG 摄取为 NAF 的 1.188 ±0.86 倍，p = 0.0046。同时我们进一步用 GO 的方法进行了葡萄糖检测，发现 NAF 剩余的葡萄糖更多，也就意味着 CAF 伴随着 FDG 的摄取增多，24 小时消耗的葡萄糖同样增加。其中 PDGF 诱导 CAF 的葡萄糖消耗为 NAF 的 1.353 ±1.978 倍，p =0.0006；HCT116 上清液诱导 CAF 的葡萄糖消耗为 NAF 的 1.553 ±8.71 倍，p =0.0049。（图 4A）
本文编号：3023046
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：104 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
CAF与NAF的糖代谢相关基因mRNA表达水平Figure1ThemRNAexpressionlevelsofHK2,GLUT-1andHIF-1α
上海交通大学医学院博士毕业论文图 2 CAF 与 NAF 的糖代谢相关蛋白表达水平Figure 2 The protein levels analyzed by Western Blot注：左侧为 PDGF 细胞因子（PDGF-induced）及 HCT116 结肠癌细胞上清液（CM-induced）诱导的 CAF 细胞与 NAF 细胞比较，诱导 CAF 细胞的 CAF 特异性蛋白 FSP-1/FAP 高表达，且 HK2、GLUT-1 表达升高；右侧为结肠癌新鲜标本中分离的 CAF 与 NAF之间比较，表达 FSP-1 的 CAF 细胞 HK2 表达显著增强。2.3 CAF 对肿瘤细胞糖代谢相关基因 mRNA 表达及蛋白表达水平的影响我们进一步研究 CAF 对于肿瘤细胞糖代谢的影响，我们用证实被 PDGF 诱导活化的 CAF 细胞上清液培养 HCT116 结肠癌细胞，应用 qRT-PCR 及 WesternBlot 的方法比较其与亲代细胞之间的糖代谢相关基因表达差异，发现 CAF 作用后的 HCT116 细胞的 HK2 表达显著下降，其 mRNA 水平为原始细胞的 0.75 ±0.019，p = 0.015（图 3），其 HK2 的蛋白表达同样显著降低。
上海交通大学医学院博士毕业论文倍， p = 0.0002；HCT116 上清液诱导 CAF 的18F-FDG 摄取为 NAF 的 1.188 ±0.86 倍，p = 0.0046。同时我们进一步用 GO 的方法进行了葡萄糖检测，发现 NAF 剩余的葡萄糖更多，也就意味着 CAF 伴随着 FDG 的摄取增多，24 小时消耗的葡萄糖同样增加。其中 PDGF 诱导 CAF 的葡萄糖消耗为 NAF 的 1.353 ±1.978 倍，p =0.0006；HCT116 上清液诱导 CAF 的葡萄糖消耗为 NAF 的 1.553 ±8.71 倍，p =0.0049。（图 4A）
本文编号：3023046
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