结核血清标志物SHBG检测试剂盒的构建及相关蛋白多克隆抗体的制备
发布时间：2021-02-18 11:55
结核病（tuberculosis,TB）是世界第十大主要死亡原因,2017年全球结核病死亡数约为157万,其中我国死亡数约为3.7万。中国是全球30个结核病高负担国家之一,2017年我国约有新发病例88.9万,新发患病人数居全球第二。高发病率及高死亡率的结核病现状严重增加了结核病疾病控制的整体负担,结核病防控形势严峻,但目前结核病实验室检测的常见方法还不能满足临床诊断的需求。从1994年澳大利亚科学家提出蛋白组（proteome）一词至今,蛋白组研究已经走过25年的历程。在这25年中5万1千多篇蛋白组研究的论文在国际刊物的发表,不仅记录了蛋白组技术不断发展的历程,也描绘了蛋白组技术在后基因组时代广泛的应用前景,其中八千多篇标志物的研究,用蛋白质组学技术来检测、分析和确定疾病标志蛋白和靶蛋白,阐明疾病蛋白表达水平的变化与疾病发生发展不同阶段的相互关系及其规律,显示蛋白组技术是目前解决疾病标志物的有利的途径。本课题组在前期研究中利用血清蛋白组学技术发现了肺结核患者血清潜在标志物,性激素结合球蛋白（sex hormone-binding globulin,SHBG）和血清淀粉样蛋白4（ser...
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
SHBG检测PTB的ROC曲线
见表 1-6。对 16 例 PTB-DM 患者及浓度检测值绘制 ROC 曲线，结果显示：使用组合，曲线下面积 AUC 为 0.698（P=0.015）；使用，曲线下面积 AUC 为 0.672（P=0.034），两种试剂断 PTB-DM 的曲线下面积差异无统计学意义（图 1-5。1-6 两种试剂盒检测 3 组血清 SHBG 表达水平(nmol/L)[M(P25~P7vels of serum SHBG by two kinds of kits in three groups (nmol/L) [M组合式 SHBG（C）试剂盒 卡方值（P 值） SHBG（A）试剂盒57.17(19.72~106.55) 47.86 (0.017) 36.70(15.76~78.91) 60.87(34.44~90.32) 58.90 (<0.000) 46.92(30.40~65.15) 24.14(14.61~47.32) — 25.06(13.93~33.93)
大于 0.6（P<0.000），且 SHBG 联合 SAA4 指标检显优于单一指标的诊断效率（均 P<0.01），而比断涂阴肺结核时，两蛋白指标单独诊断效率差异两种 SHBG（A 和 C）试剂盒检测结果分别与 SAP-PTB 患者时，AUC、灵敏度及特异度差异均无统表 1-7、图 1-6。表 1-7 SHBG、SAA4 单一与联合检测 SNP-PTBble 1-7 SHBG, SAA4 and SHBG + SAA4 combined detection in SNP指标 AUC AUC（95% CI） 灵敏度 特异（C）+SAA4 0.889 0.837~0.942 0.829 0.8）+SAA4 0.903 0.852~0.953 0.841 0.8BG（C） 0.768 0.693~0.843 0.683 0.7（A） 0.793 0.723~0.864 0.646 0.8A4 0.817 0.749~0.886 0.756 0.7
【参考文献】：
期刊论文
[1]柯萨奇病毒A6型VP1和VP2基因的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 陈静,李鹏飞,吴杰,孟胜利,申硕,王泽鋆. 中华实验和临床病毒学杂志. 2018 (06)
[2]2018WHO全球结核报告:全球与中国关键数据分析[J]. 余卫业,谭卫国,罗一婷,陆普选. 新发传染病电子杂志. 2018(04)
[3]两种恒温扩增分子检测法与实时荧光定量核酸扩增法对肺结核诊断价值的比较[J]. 王少华,郑丹薇,朱岩坤,马晓光,石洁,欧喜超,李辉,邢进,赵雁林. 中华结核和呼吸杂志. 2018 (02)
[4]涂阴肺结核病人血清蛋白组学研究及SHBG蛋白验证[J]. 周颖,李翠萍,何晓,李洪涛,臧宁,郑艳燕,何敏. 中华疾病控制杂志. 2016(06)
[5]γ-干扰素释放试验在中国应用的建议[J]. 中华结核和呼吸杂志. 2014 (10)
[6]检测BDV抗原的双抗夹心ELISA法的建立[J]. 黄艺婧,刘赛,徐平,刘海军,李薇,邓旎. 免疫学杂志. 2013(05)
[7]酶联免疫吸附检测法的应用研究进展[J]. 伏旭,李培武,贺莉,尹稳,傅仲学. 氨基酸和生物资源. 2012(03)
[8]一种“高性价比”切胶纯化原核表达蛋白的方法[J]. 高慎阳,查恩辉,王珅,周铁忠,李慧. 中国农学通报. 2010(22)
[9]His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性[J]. 曾瑞红,王卫华,房桂珍,龚伟,梅兴国,魏林. 中国免疫学杂志. 2008(12)
[10]利用聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化的微量蛋白制备抗血清[J]. 时永全,韩者艺,王新,张宇梅,宁晓暄,翟惠虹,樊代明. 细胞与分子免疫学杂志. 2002(06)
本文编号：3039520
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
SHBG检测PTB的ROC曲线
见表 1-6。对 16 例 PTB-DM 患者及浓度检测值绘制 ROC 曲线，结果显示：使用组合，曲线下面积 AUC 为 0.698（P=0.015）；使用，曲线下面积 AUC 为 0.672（P=0.034），两种试剂断 PTB-DM 的曲线下面积差异无统计学意义（图 1-5。1-6 两种试剂盒检测 3 组血清 SHBG 表达水平(nmol/L)[M(P25~P7vels of serum SHBG by two kinds of kits in three groups (nmol/L) [M组合式 SHBG（C）试剂盒 卡方值（P 值） SHBG（A）试剂盒57.17(19.72~106.55) 47.86 (0.017) 36.70(15.76~78.91) 60.87(34.44~90.32) 58.90 (<0.000) 46.92(30.40~65.15) 24.14(14.61~47.32) — 25.06(13.93~33.93)
大于 0.6（P<0.000），且 SHBG 联合 SAA4 指标检显优于单一指标的诊断效率（均 P<0.01），而比断涂阴肺结核时，两蛋白指标单独诊断效率差异两种 SHBG（A 和 C）试剂盒检测结果分别与 SAP-PTB 患者时，AUC、灵敏度及特异度差异均无统表 1-7、图 1-6。表 1-7 SHBG、SAA4 单一与联合检测 SNP-PTBble 1-7 SHBG, SAA4 and SHBG + SAA4 combined detection in SNP指标 AUC AUC（95% CI） 灵敏度 特异（C）+SAA4 0.889 0.837~0.942 0.829 0.8）+SAA4 0.903 0.852~0.953 0.841 0.8BG（C） 0.768 0.693~0.843 0.683 0.7（A） 0.793 0.723~0.864 0.646 0.8A4 0.817 0.749~0.886 0.756 0.7
【参考文献】：
期刊论文
[1]柯萨奇病毒A6型VP1和VP2基因的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 陈静,李鹏飞,吴杰,孟胜利,申硕,王泽鋆. 中华实验和临床病毒学杂志. 2018 (06)
[2]2018WHO全球结核报告:全球与中国关键数据分析[J]. 余卫业,谭卫国,罗一婷,陆普选. 新发传染病电子杂志. 2018(04)
[3]两种恒温扩增分子检测法与实时荧光定量核酸扩增法对肺结核诊断价值的比较[J]. 王少华,郑丹薇,朱岩坤,马晓光,石洁,欧喜超,李辉,邢进,赵雁林. 中华结核和呼吸杂志. 2018 (02)
[4]涂阴肺结核病人血清蛋白组学研究及SHBG蛋白验证[J]. 周颖,李翠萍,何晓,李洪涛,臧宁,郑艳燕,何敏. 中华疾病控制杂志. 2016(06)
[5]γ-干扰素释放试验在中国应用的建议[J]. 中华结核和呼吸杂志. 2014 (10)
[6]检测BDV抗原的双抗夹心ELISA法的建立[J]. 黄艺婧,刘赛,徐平,刘海军,李薇,邓旎. 免疫学杂志. 2013(05)
[7]酶联免疫吸附检测法的应用研究进展[J]. 伏旭,李培武,贺莉,尹稳,傅仲学. 氨基酸和生物资源. 2012(03)
[8]一种“高性价比”切胶纯化原核表达蛋白的方法[J]. 高慎阳,查恩辉,王珅,周铁忠,李慧. 中国农学通报. 2010(22)
[9]His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性[J]. 曾瑞红,王卫华,房桂珍,龚伟,梅兴国,魏林. 中国免疫学杂志. 2008(12)
[10]利用聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化的微量蛋白制备抗血清[J]. 时永全,韩者艺,王新,张宇梅,宁晓暄,翟惠虹,樊代明. 细胞与分子免疫学杂志. 2002(06)
本文编号：3039520
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