基于噬菌体特异识别和杂交纳米花信号放大构建电化学传感器用于快速检测尿液中活E.coli

发布时间：2021-06-22 20:12

　　目的尿路感染是最常见的细菌感染性疾病之一,临床急需建立能快速鉴别细菌种类、明确细菌对抗生素敏感性的方法,以指导临床正确诊断和合理用药。本研究通过利用噬菌体对细菌的特异性识别,以及葡萄糖氧化酶&辣根过氧化物酶-磷酸铜有机-无机杂交纳米花的信号放大功能,并整合稳定、高效的捕获探针——抗菌肽magainin I,构建新型电化学传感器,拟实现对尿液中活E.coli的快速灵敏检测。并对新构建的电化学传感器进行条件优化和性能评价。方法1.合成有机-无机杂交纳米花:在PBS中同时加入一定量的Cu SO₄·5H₂O、HRP以及GOx,在室温下反应12 h后收集沉淀物,并对其形态和性能进行表征。2.合成纳米花&金纳米颗粒&硫堇&噬菌体（nanoflowers&AuNPs&Thi&phage）纳米复合物:在AuNPs的桥接作用下,通过Au-NH键将Thi和T4噬菌体连接到纳米花表面,收集连接反应后的复合物,并对其进行表征。3.构建电化学传感器:抗菌肽magainin I通过Au-S键被固定到金电极表面。当E... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

纳米花复合物(nanoflowers&AuNPs&Thi&phage)的制备和传感器检测E.coli的过程

具有良好的单分散性（图 2B）。高分辨率的 SEM 图像显示纳米花为牡丹花样的形态，由许多纳米片组装而成（图2C）。Cu3(PO4)2纳米花的 SEM 图像提示 Cu3(PO4)2可能为杂交纳米花的骨架结构（图 2D）。图 2 杂交纳米花的形态学特征（A）GOx&HRP-Cu3(PO4)2纳米花合成前后的溶液状态；（B）和（C）GOx&HRP- Cu3(PO4)2纳米花的 SEM图；（D）Cu3(PO4)2纳米花的 SEM 图；Fig.2. The morphology and optical structure of the hybrid nanoflowers.(A) The photograph of GOx&HRP-Cu3(PO4)2hybrid nanoflowers solutions before and after the synthetic reaction. (Band C) SEM images of the GOx&HRP- Cu3(PO4)2hybrid nanoflowers. (D) SEM images of Cu3(PO4)2nanoflowers

提示磷酸铜为杂交纳米花的骨架结构。XPS 图谱显示杂交纳米花的主要组分为磷、铜、碳、氧和氮（图3C）。综合前述结果，表明 GOx 和 HRP 均被成功组装到磷酸铜骨架上。图 3 杂交纳米花的光谱学特征（A）GOx&HRP-Cu3(PO4)2纳米花的 FT-IR 图；（B）GOx&HRP-Cu3(PO4)2纳米花和 Cu3(PO4)2纳米花的XRD 图谱；（C）GOx&HRP-Cu3(PO4)2纳米花的 XPS 图谱Fig.3. The optical structure of the hybrid nanoflowers.(A) FT-IR spectra of GOx&HRP-Cu3(PO4)2hybrid nanoflowers. (B) XRD patterns of GOx&HRP-Cu3(PO4)2hybrid nanoflowers and Cu3(PO4)2nanoflowers. (C) XPS pattern of GOx&HRP-Cu3(PO4)2hybrid nanoflowers.


本文编号：3243465