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广州与中山地区细菌多粘菌素耐药基因及耐药表型研究

发布时间:2021-07-01 09:58
  多粘菌素被称为是临床防治多重耐药革兰阴性菌的最后一道防线,由质粒介导的耐药基因mcr-1(mobile colistin resistance,mcr)的发现使针对多粘菌素耐药基因的研究成为当下的热点。为进一步完善广州和中山地区细菌多粘菌素的耐药基因谱,本研究以广州市某三甲医院的临床分离革兰阴性菌、中山市某些肉菜市场生鲜肉中的奇异变形杆菌和中山市某些猪场的猪源及环境中的奇异变形杆菌为对象,研究耐药表型,检测多粘菌素耐药基因并研究耐药基因的可转移性。使用全自动微生物鉴定与药敏系统和一些辅助实验对临床分离株进行鉴定与药敏实验,得到临床分离革兰阴性菌,并对相关结果统计分析。煮沸法对研究菌株进行基因组DNA的提取。采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测多粘菌素耐药基因,将检测结果阳性的PCR产物送出测序验证,保证PCR结果的真实性。依照美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)制定的标准采用Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法和肉汤稀释法进行药物敏感性实验,研... 

【文章来源】:广东药科大学广东省

【文章页数】:80 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

广州与中山地区细菌多粘菌素耐药基因及耐药表型研究


多粘菌素B和黏菌素结构式

基因,PCR扩增,猪场环境,生鲜肉


(2) 对 1114 株生鲜肉、猪源及猪场环境中的奇异变形杆菌进行 mcr-1 的,通过琼脂糖电泳初步确认耐药基因的携带情况,本次 PCR 扩增共有变形杆菌的片段大小在 300bp 左右:1DM18b、1acx3a、1acx46a、1bcmx14b、1Y33a、1acD2a、19Pb 和 10Cb,见图 3-1。(3) 经测序验证,所有的阳性菌株均存在 mcr-1 基因。

指纹图谱,接合子


图 5-1 5798 接合子验证图Fig.5-1 The verification of 5798 conjugation从图中可以看出,得到的 6 株接合子与 EC600 和携带 mcr-1 的 5798 的指纹图谱并不完全相同,从这角度可以证明,接合成功;且这些接合子上含有 mcr-1基因。表 5-3 药物敏感性实验结果Tab.5-3 The results of Drug sensitivity test抗菌药物名称菌株编号EC600 5798 5798JH1 5798JH2 5798JH3 5798JH4 5798JH5 5798JTCY S R R R R R R RDOX S R R R R R R RPEN R R R R R R R R

【参考文献】:
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
[1]抗药性沙门氏菌及其噬菌体的相互作用关系[D]. 商延.山东大学 2018
[2]沈阳地区肠杆菌科细菌mcr-1基因筛查及其对多黏菌素耐药表型相关性的研究[D]. 王齐晖.中国医科大学 2018
[3]质粒介导的黏菌素耐药基因mcr-1的发现[D]. 刘艺云.华南农业大学 2016
[4]上海某猪场大肠杆菌中mcr-1基因的传播机制研究[D]. 俞林锋.华南农业大学 2016



本文编号:3258927

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