基于鲁米诺纳米球的H.pylori电化学发光检测新方法

发布时间：2021-07-13 11:59

　　幽门螺旋杆菌（H.pylori）是由慢性活动性胃炎患者胃粘膜组织中分离到的一种螺旋形、微厌氧革兰阴性杆菌。幽门螺旋杆菌被认为是慢性胃炎、胃十二指肠溃疡、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃腺癌等疾病的重要致病因子。世界上约有一半的人口感染了幽门螺旋杆菌,并且世界卫生组织将其列为Ⅰ类致癌因子。故早期、特异性诊断幽门螺旋杆菌,对幽门螺旋杆菌感染相关疾病的治疗和预后具有重要意义。现有的检测方法无法实现对幽门螺旋杆菌的高灵敏检测。因此,本课题设计了一种基于鲁米诺的三元电化学发光纳米球的新方法用于幽门螺旋杆菌的高灵敏检测。本课题中,首次制备了一种新型的三元电化学发光纳米球,该纳米球包含了发光物质鲁米诺,共反应剂聚乙烯亚胺和共反应促进剂氨化的苝系衍生物,由于聚乙烯亚胺-鲁米诺分子内的自增强共反应和氨化的苝系衍生物对鲁米诺/过氧化氢体系的共反应促进效果,这种新型的三元电化学发光纳米球具有更强的电化学发光信号。将基于鲁米诺的三元电化学发光纳米球和靶物质触发的链置换反应相结合,构建了一种高灵敏无酶的生物传感器去检测幽门螺旋杆菌DNA。这种电化学发光生物传感新方法已成功的应用于幽门螺旋杆菌DNA的检测,检测范围从1... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

构建检测幽门螺旋杆菌DNA电化学发光生物传感器的原理图（A）PTC-PEI-Lum/SP的制备（B）靶物质触发的链置换反应扩增的过程（C）PTC-PEI-Lum纳米复合物的双重电

图 2 PTC-PEI-Lum 的合成过程Fig. 2 The schematic diagram of the synthesis of PTC-PEI-Lum.变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（native PAGE）用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）技术，验证了幽门螺杆菌驱动链置换反应的可行性。将等比混合的 DNA 链 Q/F 和 Q/P/R钟，然后缓慢降至室温。电泳时将样品注入 8%的聚丙烯酰胺凝缓冲液（90 mM Tris-boric acid，2 mM EDTA，pH8.4）中，电压 1泳 60 分钟。电泳完成后，应用凝胶成像系统（Bio-Rad Laborator行了成像。物传感器的组装

能是由于 PEI 中缺少共轭基团所致。曲线 b 表明鲁米诺有 3 个特征性吸在 220 nm 处（属于氨基 π-π*跃迁）、300 nm 和 348 nm 处（属于氨基 与文献[38]描述一致。PTC-NH2（曲线 c）在 496 nm 处出现了一条较宽的属于苝核心的 π-π*跃迁[39]。与 PTC-NH2 的吸收光谱相比，PTC-PEI（曲的特征性吸收峰在 501 nm 附近略有红移，这是由于 PEI 的助色基团（TC-NH2的芳香环之间的共轭效应所致。当鲁米诺交联到 PTC-PEI 上面之-PEI-Lum（曲线 e）出现了四个特征性吸收峰，分别在 220 nm，296 nm，39 nm 处。有两个峰从 220 nm 红移到 222 nm、从 501 nm 红移到 509 n红移峰是由于鲁米诺中芳香族环的 π 电子离域作用所致[40]。另外两个峰移到 296 nm、从 347 nm 蓝移到 343 nm，这两个蓝移峰主要是由于 PT米诺之间的静电相互作用引起的。以上这些结果证明了 PTC-PEI-Lum 纳料的成功合成。

【参考文献】：
期刊论文
[1]硫化镉量子点对三联吡啶钌电化学发光的增敏作用及用于邻苯二酚的检测[J]. 王明丽,孙亚楠,郭佳怡,杨学梅,杨敏丽.  分析化学. 2018(05)



本文编号：3282018