尿源性脓毒性休克早期蛋白质组学研究及其意义

发布时间：2021-07-21 09:03

　　研究目的:本研究利用肾盂内高压致脓毒性休克动物（兔）模型,以蛋白质组学及质谱技术分离和鉴定脓毒性休克动物模型血液中差异表达的蛋白质,研究差异蛋白质与早期脓毒性休克的关系。动物模型结合临床样本筛选早期诊断尿源性脓毒症的新指标。研究方法:1.10只雌性新西兰兔随机分成对照组和实验组,两组均结扎一侧输尿管上段,实验组及对照组均按2ml/kg剂量分别向肾盂注射9.0 ×108cfu/ml浓度标准大肠杆菌和生理盐水,随后监护心率、血压,兔肾盂内高压致脓毒性休克模型及对照组模型建立。2.术后2h、4h、6h时间点于股动脉或兔耳正中动脉抽血（血量统一）,注入等容量生理盐水+肝素。离心后,取上清液保存。血上清液标本随后进行分组蛋白质组学实验。实验结束处死兔子,将其肝、肺、肾组织进行病理学检查。3.将血清样品低丰度蛋白进行富集、洗脱,再将洗脱的蛋白质用胰酶消化成肽段。然后使用三组11-plex TMT稳定同重同位素标记来标记所有样品,标记后,将每个11plex组中的肽混合物合并,分离肽段,收集的肽段合并为10个馏分,完全干燥后,将得到的肽段在纳升液相系统进行分离。最后采用质谱检测技术进行鉴定,采集的RA... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：106 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２．３：分离右侧左侧股动脉

过前期充分的预实验，该法可引起明显肾盂内高压并使动物出现脓毒性休克。??＾?；?Ｐ??图２．１：新西兰兔称重图２．２：麻醉成功后，固定至手术台??图２．３：分离右侧左侧股动脉。图２．４：留置股动脉穿刺针。??６??

義?Ｍｉ?１??图２．５：缝合固定股动脉留置针，备用。图２．６：也可穿刺兔耳中动脉进行监护。??Ｌ?薩０??图２．７：分离右肾及右输尿管，予结扎右输尿管。图２．８：肾盂内注射实验浓度细菌。??｜，鐘??Ｃ，?：ｉ?ｍ－ｌｌ??图２．９：缝合右侧腹部切口。图２．１０：生理监护仪进行监护。??７??

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3294730