NSE启动子驱动报告基因FTH1在骨髓间充质干细胞成神经分化中的表达及体外MR成像

发布时间：2021-07-23 19:18

　　背景与目的磁共振成像（MRI）因其组织分辨率高、软组织对比度良好、无X线辐射损伤等优点已成为移植干细胞的一种主要监测方法。目前,利用MRI对移植细胞的示踪主要有两种方法,即磁标记直接成像和报告基因间接成像,其中磁标记法的主要缺陷在于细胞内标记物会随着细胞的分裂增殖而不断降解,不能有效地对移植细胞实施长期示踪,而MRI报告基因成像将报告基因整合到标记细胞基因组中,通过基因在细胞内持续稳定表达,从而实现MRI对移植细胞的纵向连续示踪,有效地克服了磁标记成像的局限性。在众多MRI报告基因中,铁蛋白基因已成为研究热点。铁蛋白是一种内源性储铁蛋白,分为蛋白壳和铁核两部分。蛋白壳由重链（H）和轻链（L）两种亚基构建而成,其重链多肽1（FTH1）具有亚铁氧化酶的活性,具有诱导转铁蛋白受体的表达并促进铁吸收的能力,能引起MRI信号的改变,目前作为一种功能性磁共振报告基因已成为分子影像学研究的热点。迄今,已有较多研究利用FTH1报告基因MR成像实现了对多种细胞的连续示踪。在我们的前期研究中,利用慢病毒载体将FTH1报告基因转入骨髓间充质干细胞（MSCs）中,并将转基因的MSCs诱导分化为神经元样细胞,发... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

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苏木素染液染色 10 分钟，0sec，ddH2O 冲洗多余染液，晾干。显微镜下观察染色情况。 表示，单因素方差分析用于分析不同处，当 P < 0.05 认为差异有统计学意义。酶切鉴定TH1 重组慢病毒载体,选择的插入酶切位经酶切出一个 1500-2000 bp 的片段后电

重庆医科大学硕士研究生学位论文CTGGAACTTCACAAACTGGCTACTGACAAGAATGATCCCCACTTATGTGACTTCATTGAGACGCATTACCTGAATGAGCAGGTGAAATCCATTAAAGAACTGGGTGACCACGTGACCAACTTACGCAAGATGGGAGCCCCTGAATCTGGCATGGCAGAATATCTCTTTGACAAGCACACCCTGGGACACGGTGATGAGAGCTAA结果显示，序列正确。3.3 荧光显微镜观察细胞绿色荧光的表达1μL LV5- NSE-FTH1 慢病毒感染 293T 细胞 48h，荧光显微镜下结果如图 3A所示，0.1μL LV5- NSE-FTH1 慢病毒感染 293T 细胞 48h，荧光显微镜下的结果如图 3B 所示, 0.01μL LV5- NSE-FTH1 慢病毒感染 293T 细胞 48h，荧光显微镜下的结果如图 3C 所示。

【参考文献】：
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞成神经分化中的FTH1基因表达[J]. 钟毅,蔡金华,贺小娅,秦勇,廖一凡.  第三军医大学学报. 2016(19)
[2]骨髓间充质干细胞移植治疗急性心肌梗死的多模态体内示踪分子成像[J]. 陈荟竹,夏睿,郭应坤,侯江龙,张丽芝,李真林,艾华,宁刚,郜发宝.  四川大学学报(医学版). 2014(06)



本文编号：3299881