RKIP调控非小细胞肺癌放射敏感性的研究

发布时间：2021-07-29 20:19

　　目的:据统计数据表明,近年来肺癌发病率及死亡率呈逐年上升趋势,肺癌已成为我国城镇居民死亡率最高的疾病。非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）可占全部肺癌的80%-85%。约2/3的NSCLC患者在明确诊断时已丧失手术治疗的时机,放射治疗与化学药物治疗相结合的综合治疗是局部进展期NSCLC的主要治疗手段。然而在这些局部进展期NSCLC病例中,只有约10%的患者能够达到完全缓解,其5年生存率也只有约15%。肿瘤细胞的放射抵抗是影响NSCLC放射治疗疗效的主要生物学因素之一。Raf激酶抑制蛋白（Raf kinase inhibitory protein,RKIP）,也被称为PEBP-1,最初于1984年在牛大脑中被发现,并被认为是磷脂酰乙醇胺结合蛋白（phosphatidylethanolamine-binding protein,PEBP）家族中的一员。RKIP作为Raf-MAPK-ERK信号转导通路上重要的调节因子影响着诸如增殖、分化及血管生成等诸多方面的细胞功能。通过调节PI3K-AKT和NF-kB信号通路,RKIP在抑制肿瘤进展与转移方面也发... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：88 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

RKIP在高表达的肺腺癌（a）肺鳞癌（c）和低表达的肺腺癌（b）肺鳞癌（d）中的情况，400x

图 3.2 RKIP 表达水平不同患者的生存曲线3 NSCLC 患者预后的单因素分析采用 Cox 比例风险回归模型分析患者的性别，年龄，病理分型，临床分期，肿瘤大小（T 分期），淋巴结转移程度（N 分期）以及 RKIP 表达水平与预后的。分析结果显示 NSCLC 患者的原发肿瘤（T 分期）和 RKIP 表达情况与预后相

3 结果3.1 构建沉默 RKIP 基因的 A549 和 SK-MES-1 细胞株以及测定沉默RKIP 基因前后的 A549 和 SK-MES-1 细胞中 RKIP 表达水平体外培养人肺腺癌细胞系 A549 和人肺鳞癌细胞系 SK-MES-1，收集处于对数生长期的细胞，提取蛋白。采用 Western blot 方法检测人肺腺癌细胞系 A549 和人肺鳞癌细胞系 SK-MES-1 中 RKIP 蛋白表达水平。结果显示，RKIP 蛋白在这两种细胞系中均为高表达（与β-actin 浓度相比）。（图 3.2）。将空载的慢病毒及携带可沉默RKIP基因表达的shRNA工具慢病毒分别转入人肺腺癌细胞系 A549 和鳞癌细胞系 SK-MES-1 中，通过观察被转染细胞的荧光强度估测转染效率（图 3.1）。经嘌呤霉素持续筛选后，最终得到转入空载慢病毒的 A-EV和 SK-EV 细胞系，以及转入可沉默 RKIP 基因表达的 shRNA 慢病毒的 A/RKIP-KD和 SK/RKIP-KD 细胞系。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Modulation of the MAP kinase signaling cascade by Raf kinase inhibitory protein[J]. Nicholas TRAKUL,Marsha R. ROSNER.  Cell Research. 2005(01)
[2]肺癌癌基因蛋白产物同步检测的对比分析[J]. 赵彤,朱梅刚,黄宗义,张亚历,张素娟,李梅芳.  癌症. 1995(01)



本文编号：3309989